Name: 重组糖苷内切酶F1 (Endo F1)
SKU: E755053
Availability: InStock

重组糖苷内切酶F1 (Endo F1)

CAS: 37278-88-9 货号: E755053 EC号: 998-699-9

概述规格储存与运输技术文档高级数据质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱) 技术文档和文章溶液计算器

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为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,His标签,生物活性,重组,高性能级提供 ≥90%(SDS-PAGE) 纯度，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

Endo F1 大肠杆菌重组表达的高度特异性的糖苷内切酶，基因来源 Elizabethkingia miricola，是一种高度特异性糖苷内切酶，可以从糖蛋白上切除没有核心岩藻糖基化的高甘露糖、杂交型 N-聚糖，本产品活性高，稳定性好，可以用于抗体糖基化修饰和分析。

组分和说明

E755053	Component	300U	1KU	Storage
E755053A	Endo-β-N-acetylglucosaminidase F1	300U	1KU	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
E755053B	10×Glycoprotein Denaturing Buffer (0.5% SDS, 40mM DTT)	1000μl	1000μl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
E755053C	10×GlycoBuffer 2 (500 mM Sodium Phosphate, pH7.5)	1000μl	1000μl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
E755053D	10% NP-40	1000μl	1000μl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

使用前准备：
使用前，请将 Endo F1 试剂取出，4℃或者冰上解冻，10000rpm 离心 10 秒，确保所有试剂都在管底。
反应试剂：将-20℃储存的 10×Glycoprotein Denaturing Buffer 缓冲液、10×GlycoBuffer 2 及 10%NP-40 溶液取出，待用。
注意：根据实验需要，准备相应的试剂，如非变性条件下进行去糖基化反应，不需要准备 10×Denaturing缓冲液及 10% NP-40 溶液。
使用方法：
变性条件下糖蛋白去糖基化
1、用去离子水溶解 1-20 µg 的糖蛋白，加入 1 µl 的 10×Glycoprotein Denaturing Buffer，用去离子水定容到10 µl；
2、75℃孵育 10 min；
3、加入 2 µl 的 500 mM Sodium acetate pH5.5，2 µl 的 10% NP-40，轻轻吹打混匀；
4、加入 1-4 µl 的 Endo F1，加去离子水到 20 µl，轻轻吹打混匀；
5、37℃孵育 1-4hr；
6、用于 SDS-PAGE 分析或 HPLC 分析。
非变性条件下糖蛋白去糖基化
1、取10-100µg 糖蛋白溶液，加入 2µl 500 mM Sodium acetate pH5.5,2-5µl Endo F1 ，补加纯化水使得反应体系总体积为 20µl，轻柔混匀；
2、37℃ 条件下反应 4-24hr。
注意：当对天然糖蛋白去糖基化时，建议将等量糖蛋白样品进行变性后再同步进行酶切实验作为阳性对照，以确定非变性条件下去糖基化反应的程度。
【注】体系放大时候，孵育时间或酶量需要根据实际情况调整，可低速震荡混匀，可以增加转化率。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅作科研用途！

Endo F1 is a highly specific recombinant endoglycosidase expressed in Escherichia coli. Its gene originates from Elizabethkingia miricola. It specifically cleaves core-fucose-free high-mannose and hybrid-type N-glycans from glycoproteins. This product boasts high enzymatic activity and excellent stability, and is applicable to the modification and analysis of antibody glycosylation.

Components List

E755053	Component	300U	1KU	Storage
E755053A	Endo-β-N-acetylglucosaminidase F1	300U	1KU	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
E755053B	10×Glycoprotein Denaturing Buffer (0.5% SDS, 40mM DTT)	1000μl	1000μl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
E755053C	10×GlycoBuffer 2 (500 mM Sodium Phosphate, pH7.5)	1000μl	1000μl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
E755053D	10% NP-40	1000μl	1000μl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

Pre-experiment Preparation

Before use, take out the Endo F1 reagent, thaw it at 4°C or on ice, then centrifuge at 10,000 rpm for 10 seconds to ensure all liquid collects at the bottom of the tube.

Reaction Reagents: Take out Endo-β-N-acetylglucosaminidase F1, 10× Glycoprotein Denaturing Buffer, 10× GlycoBuffer 2 and 10% NP-40 solution stored at -20°C for later use.

Note: Prepare reagents according to experimental requirements. If deglycosylation is carried out under non-denaturing conditions, 10× Denaturing Buffer and 10% NP-40 solution are not required.

Operating Procedures

Glycoprotein Deglycosylation under Denaturing Conditions

1. Dissolve 1–20 µg glycoprotein in deionized water, add 1 µL of 10× Glycoprotein Denaturing Buffer, and adjust the volume to 10 µL with deionized water.

2. Incubate at 75°C for 10 min.

3. Add 2 µL of 500 mM Sodium Acetate (pH 5.5) and 2 µL of 10% NP-40, then mix gently by pipetting.

4. Add 1–4 µL Endo F1, top up to 20 µL with deionized water and mix gently by pipetting.

5. Incubate at 37°C for 1–4 hr.

6. The reaction product can be analyzed by SDS-PAGE or HPLC.

Glycoprotein Deglycosylation under Non-denaturing Conditions

1. Transfer glycoprotein solution containing 10–100 µg target protein, add 2 µL of 500 mM Sodium Acetate (pH 5.5) and 2–5 µL Endo F1. Add purified water to a total reaction volume of 20 µL and mix gently.

2. Incubate the mixture at 37°C for 4–24 hr.

Note: For deglycosylation of native glycoproteins, it is recommended to digest an equal amount of denatured sample in parallel as a positive control to assess the extent of deglycosylation under non-denaturing conditions.Remark: When scaling up the reaction system, adjust incubation time or enzyme dosage accordingly. Gentle low-speed shaking can improve digestion efficiency.

Precautions

Wear a lab coat and disposable gloves during operation to protect personal safety and health. This product is for research use only.

规格

产品名称

重组糖苷内切酶F1 (Endo F1)

别名

内切糖苷酶F1

英文别名

Endoglycosidase F1 | mannosyl-glycoprotein endo-beta-N-acetylglucosaminidase | di-N-acetylchitobiosyl beta-N-acetylglucosaminidase | endo-beta-N-acetylglucosaminidase | endOF1

规格或纯度

生物活性, 重组, ActiBioPure™, 高性能, EnzymoPure™, His标签, ≥90%(SDS-PAGE), ≥300 U/mL; 蛋白浓度: 见COA

生化机理

来源于米尔伊丽莎白菌的糖苷内切酶F1在蛋白质聚糖结构中壳二糖核心的两个N-乙酰葡糖胺残基的裂解中起到重要作用。它介导高甘露糖和杂交寡聚糖的裂解。

生物活性

≥300U/ml，单位定义：10 μl的反应体系中，37℃反应 1 小时从变性的5 μg RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量。

表达系统

E. coli

种属

伊丽莎白病(Elizabethkingia miricola)

蛋白标签

N-His

来源

重组表达

SDS-PAGE

32 kDa

CAS编号和信息

37278-88-9

酶学委员会编号

3.2.1.96

分子类型

酶

产品线

生物产品

储存与运输

物理形态

液体

储存缓冲液

20 mM Tris-HCl, 500mM NaCl, 10% Glycerol, pH 7.5.

浓度

≥300 U/mL; 蛋白浓度: 见COA

储存条件

-20°C储存,避免反复冻融

运输条件

超低温运输

稳定性与储存

长期储存-20℃（18个月）；避免反复冻融。

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

下载 SDS →

✅ 分析证书 (COA)

批次质量数据。输入批号以获取对应 COA。

查询 COA →

📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

查看数据表 →

🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

查看规格说明 →

高级数据

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

输入批号以搜索分析图谱:

通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA，每批产品都进行了严格的验证，您可放心使用！

找到2个结果

批号(Lot Number)	证书类型	货号
ZJ25F0724231	分析证书	E755053
ZJ25F0724230	分析证书	E755053

技术文档和文章

e755053_重组糖苷内切酶f1 产品说明书.pdf

His标签级试剂

目录：阿拉丁试剂的规格、级别和纯度

探索主题:

His标签

His Tag Grade Reagents

目录：阿拉丁试剂的规格、级别和纯度

探索主题:

His Tag His-Tag

溶液计算器

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计算溶液所需的质量、体积或浓度。

质量

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体积（添加到小瓶中）

质量（小瓶）

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