计算溶液所需的质量、体积或浓度。
BioReagent,无菌 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
2-8°C储存,室温。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
本试剂盒在外泌体磁珠捕获法的基础上进行改良优化,添加了携带外泌体亲和分子的磁珠,可以特异性地捕获血液样本中的外泌体。试剂盒中的功能化磁珠对血浆、血清外泌体具有独特亲和性,能够对微量血液样本中的外泌体进行高效提取,提取的外泌体可满足多种下游实验需求,如外泌体蛋白组学研究、NGS高通量测序和WB检测等。
| E778167 | Component | 10T | 25T | Storage |
| E778167A | Magnetic Beads | 0.4 mL | 1 mL | 4℃ |
| E778167B | Incubation Buffer I | 12 mL | 30 mL | RT |
| E778167C | Incubation Buffer II | 12 mL | 30 mL | RT |
| E778167D | Washing Buffer | 12 mL | 30 mL | RT |
| E778167E | Elution Buffer | 4 mL | 10 mL | RT |
产品特点
操作简便:无需超离,仅耗时2h。
高效稳定:亲和纯化,损失少;可适用于微量样本的外泌体提取。
兼容性广:专用于血浆血清样本,也适用于尿液、细胞上清、唾液、脑脊髓液等微量样本。
产品数据

图1. 磁珠修饰原理及应用于蛋白组学结果

图2. WB检测结果,使用本试剂盒提取不同来源的外泌体,均可检测到CD9
操作流程:
样本预处理 (需尽快处理血液样本,避免溶血)
血浆样本:采用EDTA抗凝管收集血液,收集的血液样本于4°C条件下离心 (3000g、15min),收集上清-80°C保存 (避免反复冻融) 或进行EVs分离。
血清样本:血液收集后在室温条件下静置1h进行凝固分层,然后于室温条件下离心 (3000rpm、10min),收集上清转移至新离心管中。于4°C条件下离心 (12000rpm、10min),收集上清-80°C保存 (避免反复冻融) 或进行EVs分离。
EVs分离
1.血浆或血清样本离心 (3000g、10min),取上清备用 (上清表面可能会存在油脂层,吸取上清时应尽量避开油脂层)。
2.取200μL离心后的血浆或血清,加入800μL预冷处理的Incubation buffer I,室温混匀。
3.加入40μL Magnetic Beads,室温摇匀孵育1h。
4.用磁力架磁吸3min,分离弃去上清,再加入1mL Incubation buffer II,上下颠倒摇匀20次,磁吸分离弃去上清。
5.加入1mL Washing Buffer,上下颠倒摇匀20次,磁吸3min分离弃去上清。
6.加入100μL Elution Buffer,涡旋震荡10min后,磁吸3min收集上清。
以下步骤需根据下游实验需求,选择相应的操作方法:
*若下游为蛋白组学研究 (优先推荐)
a.将步骤5得到的Beads,加入50μL外泌体裂解液 (E778170) ;
b.按照实验室常规的蛋白组学前处理步骤处理即可,或者选用组学前处理试剂盒 (P1456469) 进行处理快速且高效。
*若下游为WB表征研究
a.将步骤5得到的Beads,按照上样体系加入上样缓冲液;
b.95°C煮5min后,磁吸分离后,吸取上清进行PAGE胶上样。
备注:若下游为NTA/TEM检测则需酌情增加血浆或血清样本量,建议500μL效果更佳。
注意事项和免责说明
1.磁珠静置后会沉淀,每次使用磁珠前请温和、充分的震荡,使磁珠保持均匀的悬浮状态。
2.Elution buffer有刺激性气味,请在通风橱内使用。
3.磁珠保存及使用过程中应避免冷冻、干燥和高速离心等操作,否则会破坏磁珠结构,影响蛋白结合能力。.
4.本产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA,每批产品都进行了严格的验证,您可放心使用!
| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | E778167 |