2′-脱氧胞苷:性质、用途及实验室常见问题解答
2′-脱氧胞苷:性质、用途及实验室常见问题解答
2′-脱氧胞苷是一种天然存在的嘧啶脱氧核糖核苷,由胞嘧啶与2′-脱氧核糖相连而成,是DNA的基本构建单元,也是分子生物学、生物化学及细胞生物学研究中的重要试剂。
- 化学名称
- 2′-脱氧胞苷
- 分子式
- C₉H₁₃N₃O₄
- 分子量
- 227.22 g/mol
- CAS号
- 951-77-9
- 外观
- 白色至类白色结晶粉末
- 储存条件
- 储存于2–8°C,避光防潮
- 产品编号
- D104773
什么是2′-脱氧胞苷?
2′-脱氧胞苷(dC)是一种天然嘧啶核苷,其核碱基胞嘧啶通过N-糖苷键与2′-脱氧核糖相连。它是DNA生物合成所需的四种典型脱氧核糖核苷之一。以其磷酸化形式——脱氧胞苷单磷酸(dCMP)、二磷酸(dCDP)和三磷酸(dCTP)——直接参与DNA复制和修复,作为DNA聚合酶的底物。
除其内源性生物学功能外,2′-脱氧胞苷作为研究级试剂被广泛应用于核苷酸合成、酶活力测定以及细胞同步化方案等多个领域。其分子式为C₉H₁₃N₃O₄,分子量为227.22 g/mol(CAS 951-77-9)。
溶解性与储备液的配制
2′-脱氧胞苷在室温下可溶于水。通常建议在无菌蒸馏水或磷酸盐缓冲液(PBS)中配制储备液,浓度应根据具体实验需求确定。用于细胞培养时,溶液应在使用前经0.22 µm滤膜过滤除菌。
2′-脱氧胞苷在DMSO等有机溶剂中溶解性有限,强烈建议采用水溶液配制,以避免生物检测中的细胞毒性和相容性问题。溶解后,储备液应分装后储存于−20°C,以减少反复冻融导致的降解。应避免长时间暴露于光照下,因为核苷类化合物对光敏感。
主要研究应用
细胞同步化:2′-脱氧胞苷在实验室中的一个重要用途是用于双胸苷或胸苷/脱氧胞苷阻断方案,以将细胞同步阻断于G1/S期边界,从而使研究人员能够以均一的细胞群体研究细胞周期依赖性事件。
核苷酸代谢研究:2′-脱氧胞苷可作为嘧啶补救合成途径相关酶(包括脱氧胞苷激酶,dCK)动力学研究中的底物或抑制剂参考化合物。
表观遗传学研究:作为胞嘧啶甲基化底物的前体核苷,2′-脱氧胞苷被用于DNA甲基化、去甲基化动态变化及DNA甲基转移酶(DNMTs)活性的研究。
核苷类似物基准测试:在评价胞苷类抗病毒或抗肿瘤核苷类似物的活性和选择性时,它通常被用作天然参考标准品。
储存、稳定性与操作注意事项
2′-脱氧胞苷固体应储存于2–8°C、密封容器中,避光防潮。在适当处理条件下,上述储存方式可保证产品自生产之日起至少两年内稳定。不建议将溶液储备液在4°C长期保存,应将分装液冷冻于−20°C。
操作时建议佩戴标准实验室个人防护装备(实验服、手套、护目镜)。尽管2′-脱氧胞苷在通常的法规框架下不被归类为危险品,但仍应遵循良好实验室操作规范。使用前请查阅产品安全数据表(SDS)以获取详细危害信息。
质量、纯度与法规注意事项
Aladdin Scientific的2′-脱氧胞苷(产品编号:D104773)为科研级试剂,仅供体外实验室使用,不适用于诊断、治疗或食品领域。纯度通常通过HPLC进行检测;建议客户在购买时索取对应批次的质量检测报告(CoA)。
若研究人员需要更高规格的产品(如药品参考标准品级),请联系Aladdin Scientific技术支持团队讨论可用选项。所有产品均经过Aladdin Scientific的标准质量控制流程。用于法规申报或GMP应用时,可能需要额外的相关文件。
常见问题
溶解2′-脱氧胞苷的推荐溶剂是什么?
推荐使用水性溶剂。2′-脱氧胞苷可溶于无菌蒸馏水或PBS,这是细胞培养和生化检测的首选溶剂。DMSO溶解性有限,且可能引入细胞毒性风险,强烈建议采用水溶液配制。
配制后的2′-脱氧胞苷储备液应如何保存?
溶解后,储备液应分装为单次用量的小份,储存于−20°C,以防止反复冻融导致降解。溶液应避光保存,并在合理时限内使用;避免在4°C长期存放,否则可能影响稳定性。
2′-脱氧胞苷可用于细胞同步化实验吗?
可以。2′-脱氧胞苷常与胸苷联合用于细胞同步化方案,将细胞阻断于G1/S期边界,从而获得用于研究细胞周期依赖性过程的同步化细胞群体。研究人员应针对其具体细胞系优化浓度和处理时间。
Aladdin Scientific的2′-脱氧胞苷(D104773)纯度等级是多少?
D104773为科研级试剂,纯度通过HPLC检测。如需具体纯度数值及批次质量数据,客户应在购买时向Aladdin Scientific索取对应批次的质量检测报告(CoA)。
2′-脱氧胞苷在标准实验室条件下稳定吗?
以固体形式储存于2–8°C密封避光容器中时,2′-脱氧胞苷在适当处理条件下自生产之日起至少可稳定两年。水溶液稳定性较差,应冷冻保存并避光,以保持其完整性。
2′-脱氧胞苷在细胞中的主要生物学功能是什么?
2′-脱氧胞苷是DNA的基本构建单元。在细胞内,它被磷酸化为dCTP,在DNA复制和修复过程中与鸟嘌呤互补掺入。它还参与嘧啶补救合成途径,并作为与表观遗传调控中胞嘧啶甲基化相关的前体核苷。
参考文献
- Alberts B, et al. Molecular Biology of the Cell. 6th ed. Garland Science; 2014. Chapter on DNA Replication, Repair, and Recombination.
- Stryer L, Berg JM, Tymoczko JL. Biochemistry. 8th ed. W.H. Freeman; 2015. Chapter on Nucleotide Metabolism.
- Aladdin Scientific. Certificate of Analysis, 2′-Deoxycytidine, SKU D104773. [Internal document; available on request].
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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