研究藻酸盐是SS的发病原因之一,采用藻酸盐诱发出类似人类SS的动物模型。研究方法:采用已获藻酸盐免疫的新西兰白兔16只,随机分为A1、B1两组,A2、B2组各为6只正常新西兰白兔作为对照组,间隔1d经腮腺导管灌注藻酸盐,分别于2w(A组)和4w(B组)后检测类似于人类SS在唾液量、施墨实验(Schirmer test)、T淋巴细胞亚群、腮腺造影和组织病理等方面的改变。

操作方法

藻酸盐包裹实验

材料与仪器

藻酸盐
生理盐水 无血清培养基 CaCl2 苯巴比妥钠 葡聚糖
加样枪 磁力搅拌器 注射器 研钵 荧光酶标仪

步骤

1. 将藻酸钠溶于无菌生理盐水，终浓度为1.5%；   2. 收集培养的肿瘤细胞，用无血清的培养基洗涤1 次，将细胞沉淀重悬于1.5%藻酸钠溶液中；   3. 将上述肿瘤细胞悬浮液用1 ml 加样枪缓慢滴入磁力搅拌的250 mM CaCl₂ 溶液中，形成乳白色的藻酸盐小珠。继续静置于250 mM CaCl₂ 中30 min 即可使用。以上操作步骤均在无菌条件下进行；   4. 将第4 次免疫后7 天的小鼠用苯巴比妥钠0.1ml (按100 mg/kg 计) 腹腔注射麻醉，小鼠麻醉后置于解剖台上，切开背部皮肤，皮下植入4 粒藻酸盐包裹颗粒，缝合皮肤，外敷手术胶膜；   5. 天以后，小鼠经尾静脉注入100 μl (按100 mg/kg 计) FITC 标记的葡聚糖(FITCDextran)；   6. 20 min 后处死动物，取出藻酸盐颗粒，常温下加入1 ml 的生理盐水，剪碎研磨颗粒，再加入1 ml 的生理盐水,混匀标本，放置1 小时，1500 rpm 离心5 min。取上清液用荧光酶标仪测定；   7. 用不同浓度的FITC-Dextra n 制备标准曲线。

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