细胞组织中的碱性磷酸酶在碱性（PH9.0－9.6）环境下使作用液中的底物（a一磷酸萘酚钠）水解，产生出a萘酚，然后再与偶氮盐偶联，生成不溶性的耐晒染料（最终产物的颜色因所用偶氮盐的品种不同而有所不同）。本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导

操作方法

碱性磷酸酶染色实验

原理

细胞组织中的碱性磷酸酶在碱性（PH9.0－9.6）环境下使作用液中的底物（a一磷酸萘酚钠）水解，产生出a萘酚，然后再与偶氮盐偶联，生成不溶性的耐晒染料（最终产物的颜色因所用偶氮盐的品种不同而有所不同）．

材料与仪器

磷酸萘酚钠 偶氮盐 丙二醇

步骤

一、实验试剂：底物作用液的配制：α－磷酸萘酚钠35mg，偶氮盐（FastGsrnet）35mg，0.05M丙二醇（Propcmeliul）缓冲液35ml，配成后可直接过滤到涂片上。

二、实验方法：

l. 涂片在冷的（0土5℃）10％福尔马林甲醇液中固定30秒．

2. 蒸馏水冲洗．

3. 往涂片上滴加底物作用液，在室温下作用5-10分钟。

4. 自来水冲洗10分钟．

5. 2％甲绿复染10分钟。

6. 水洗，晾干、封固（用甘油）

三、实验结果判断：NAP阳性颗粒为红色，可采用表内评分，根据100个中性粒细胞胞浆内NAP颗粒的多少进行0－4＋计分，再将100个细胞分值相加，即得总积分值，注意，只限于成熟的带形及多形核中性粒细胞，不计淋巴细胞，嗜酸性和嗜碱性粒细胞。



注：·指偶氮染料沉积所占细胞浆的百分比

附注：

1. 涂片应新鲜，厚薄适宜，及时固定．

2. 染色液应新鲜配制，注意PH值应以9.4为好．

3. 每次染色时，最好同时做1份化脓性感染患者血涂片作阳性对照，同时报告待检者和对照者阳性细胞率和积分值．

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