技术文章

IHC常见问题分析及处理

问题 原因 建议
结果中显色过深 一抗浓度过高或孵育时间过长 降低一抗浓度或减少孵育时间
结果中显色过深 孵育温度过高 室温或4 ℃孵育
结果中显色过深 HRP标记二抗孵育时间过长 缩短时间
IHC结果中非特异性显色 石蜡切片脱蜡不彻底 延长脱蜡时间
IHC结果中非特异性显色 操作过程中冲洗不充分 增加冲洗的次数与冲洗时间
IHC结果中非特异性显色 组织富含内源性的生物素与过氧化物酶 使用相关试剂进行封闭
IHC结果中非特异性显色 发生抗原异位
IHC结果中非特异性显色 蛋白封闭不充分 增加蛋白封闭时间
IHC结果中显色强度弱 一抗浓度过低或孵育时间过短 增加一抗浓度或延长孵育时间
IHC结果中显色强度弱 试剂超过保质期 实验前确认试剂的保质期
IHC结果中显色强度弱 操作过程冲洗过度 适度冲洗
IHC结果中无染色 组织中无目的抗原的表达
IHC结果中无染色 一抗种属来源与二抗不匹配 实验前确认一抗的种属来源
IHC结果中无染色 显色物质与HRP系统不匹配 实验前确认显色体系


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探索主题: 免疫组织化学

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《IHC常见问题分析及处理》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年10月30日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/analysis-and-handling-of-ihc-common-problems.html
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