鲍曼不动杆菌 （Acinetolacter baumannii）为不发酵糖类的革兰氏阴性球杆菌，广泛分布于自然界。 医院及人体皮肤，属于条件致病菌， 可引起肺部感染，泌尿道，皮肤软组织，中枢神经系统等多部位感染及败血症。近年来，其所致院内感染率。包括碳青霉烯类抗菌药物在内的抗菌药物耐药率均呈上升趋势，因此构建鲍曼不动杆菌感染动物模型对探讨其致病及耐药机制具有重要意义。由于鲍曼不动杆菌易侵及肺组织，且对其致病机制的研究主要集中于呼吸道上皮细胞，故感染途径以肺部研究较多，BALB/C，C3H/HeN 等小鼠及大鼠均适用。

原理

鲍曼不动杆菌感染动物模型的基本原理是免疫抑制小鼠运用微量气管注射法或超声雾化构建肺部局部感染性病变。

应用

铜绿假单胞菌感染动物模型的常用应用领域如下：可用于多重耐药，泛耐药 Ab 感染的致病机制、耐药机制等方面研究，利于临床用药研究。

操作方法

甲氨蝶呤免疫抑制小鼠鲍曼不动杆菌感染肺炎动物模型

原理

免疫抑制小鼠运用微量气管注射法或超声雾化构建肺部局部感染性病变。

材料与仪器

器材：雄性小鼠、眼科手术器械
试剂：
① 甲氮蝶呤 0.2 mg/d
② 10％ 水合氯醛
③ 生理盐水

步骤

甲氨蝶呤免疫抑制小鼠鲍曼不动杆菌感染肺炎动物模型的基本过程可分为如下几步：
A. 造模菌株为常规分离的鲍曼不动杆菌 （菌液浓度为 108 efu/ml）， 造模动物选用 4 周龄 BAL.BC 清洁级雄性小鼠， 体重 13～14 g。
B. 小鼠连续 2 日予甲氮蝶呤 0.2 mg/d 经腹腔注射。3 日后再经腹腔注射 10％ 水合氯醛 0.05 ml 麻醉，运用微量气管注射法或超声雾化感染法致肺部鲍曼不动杆菌感染， 菌液量均为 0.05 ml。
C. 微量气管注射方法：小鼠麻醉后，用眼科手术器械分析暴露气管， 然后用微量注射器直接注射细菌或生理盐水， 注射完毕后立即垂直悬挂小鼠 10 分钟， 然后再缝合创口， 正常分笼喂养。
D. 超声雾化感染方法：将小鼠麻醉后， 置 1 个有 2 个口的塑料容器中， 另将浓度为 108 CFU/ml 菌液置超声雾化器中， 以 2 ml/min 雾化速度开启雾化器， 雾化管接入塑料容器其中 1 个人口， 然后从另外一端的出口排出， 雾化 30 分钟。 所有操作均在生物安全柜中进行。
E. 监测小鼠感染率、死亡率、细菌清除率及肺部病理变化。

注意事项

微量气管注射法。 超声雾化法感染免疫力低下的 BALB/C 小鼠的肺部感染率均为 100％（30/30）。 死亡率分别为 100％ 10/10），33％（3/10）。小鼠肺部细菌感染 Ⅱ 2～24 小时后支气管周及肺泡间质内见中性粒细胞、淋巴细胞。 巨噬细胞为主的炎症细胞浸润。微量气管注射法感染小鼠部分肺泡组织结构崩解， 肺泡腔内可见脓肿形成及较多细菌集落。超声雾化法感染小鼠 24 小时可见肺部部分区域存在细胞变性， 但支气管及肺泡组织结构基本正常， 肺泡壁血管轻度扩张伴淤血。

2－4－48 小时后可见支气管和支气管周围变性， 部分肺组织血管高度扩张， 伴有水肿，48 小时后炎症逐渐恢复。

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