实验方案(Protocols)

支气管肺发育不良动物模型

简介

支气管肺发育的主要病理特征为肺泡和肺血管发育受阻,表现为肺泡数目减少、体积增大、肺泡结构简单化。越来越多的动物实验和临床研究表明,高氧是导致新生儿支气管肺发育不良 (bronchopulmonary dysplasia,BPD) 发生、发展的个重要因素,因此常用高氧暴露的动物模型来研究 BPD 的发生机制。

操作方法

新型支气管肺发育不良动物模型的建立

材料与仪器

动物模型:
新生鼠。
试剂:
①4% 多聚甲醛;
②酒精;
③生理盐水;
④10% 水合氧醛;
⑤乙醇;
⑥石蜡。

步骤

新型支气管时没育不良动物模型的造模方法如下:


(一)BPD 动物模型的建立:

A、将高氧各组新生鼠 10-12 只每窝连同代母鼠一起置入温度为 25- 26 ℃,湿度 60% -65% 的自制氧箱内。


B、测氧仪控制氧浓度维持在 60%,箱内放钙石灰吸收 CO2,防止箱内 CO2 浓度过高。


C、空气组置于同一室内空气中,饲养条件同高氧组。


D、每天开箱 1 小时、新生鼠称重,将氧箱中的母鼠与空气对照组互换防止母鼠氧中毒,并更换饲料、水和垫料,密切观察各组大鼠的存活情况活动度、呼吸频率、唇色等。


E、通氧 4 天、14 天后进行检查,出现氧依赖,肺组织表现肺泡结构紊乱。肺泡增大,间隔增厚 (4 天) 或肺泡腔扩大、结构简化、间隔增厚、肺泡数量减少 (14 天) 判为合格 BPD 模型。


(二)肺组织大体形态改变:

A、通氧 4 天、14 天后分别从各组随机抽取 10 只大鼠,腹腔注射 10% 水合氧醛 (0.3 mL/g) 麻醉。


B、剖开胸腔,气管插管保持肺充气状态,观察肺组织色泽变化、体积大小,是否有出血、坏死及水肿发生。


(三)肺组织镜下形态学改变:

A、剖开大鼠胸腔,生理盐水灌注全肺后,从左支气管注入预冷的 4% 多聚甲醛至肺膨胀至肺尖。


B、取左肺放入多聚甲醛固定液中固定 24 小时后,梯度乙醇脱水,石蜡包埋,制作石蜡切片 (厚度 4 μm),每例标本取连续的石蜡切片 3 张。


C、苏木素-伊红 (HE) 染色,光镜下观察各组鼠的肺组织病理学改变。


D、每张切片随机取不重叠的 5 个视野 (×200),以 15 个视野的相应指标均值作为该例标本的 RAC 测定值。


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探索主题: 实验动物

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《支气管肺发育不良动物模型》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月23日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/animal-model-of-bronchopulmonary-dysplas.html
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