原理与背景

活化部分凝血活酶时间（APTT）是一种广泛应用的凝血检测方法，用于评估内源性和共同凝血通路。该检测常规用于监测普通肝素治疗、筛查凝血因子缺乏（凝血因子VIII、IX、XI、XII、前激肽释放酶及高分子量激肽原），以及检测狼疮抗凝物。

鞣花酸是一种多酚类化合物，通过与凝血因子XII（Hageman因子）结合，触发接触激活通路，发挥接触激活剂的作用。将鞣花酸加入去血小板血浆后，可激活凝血因子XII，进而依次激活凝血因子XI、IX，最终激活凝血因子X，导致凝血酶生成和纤维蛋白凝块形成。与高岭土或硅藻土等传统激活剂相比，鞣花酸能为接触激活提供更一致、可重复的表面，从而降低批间变异性。

Aladdin Scientific的APTT鞣花酸溶液（货号：A1356028B）经专业配制，能提供可靠的接触相激活效果，适用于手工、半自动及全自动凝血分析仪工作流程。

所需材料与设备

• APTT鞣花酸溶液（Aladdin Scientific，货号：A1356028B）
• 枸橼酸抗凝去血小板血浆（PPP）：采集于3.2%枸橼酸钠真空采血管中，室温下以2,000–2,500 × g离心15分钟
• 0.025 M氯化钙（CaCl₂）溶液，预热至37 °C
• 能维持37 °C孵育的凝血分析仪或手工倾斜管装置
• 微量移液器及校准枪头（100 µL和200 µL量程）
• 与分析仪或倾斜管法兼容的聚丙烯或玻璃比色杯
• 计时器（手工法时使用）
• 个人防护装备（PPE）：实验服、丁腈手套、护目镜

注意：所有试剂和血浆样本在使用前均应在水浴或仪器孵育槽中预热至37 °C。避免对血浆样本进行反复冻融。

APTT逐步操作方案

步骤1 – 试剂准备

从储存处取出APTT鞣花酸溶液（A1356028B），使其达到产品标签规定的温度。轻轻颠倒混匀，勿涡旋振荡。使用前将试剂和CaCl₂溶液在37 °C预热至少3–5分钟。

步骤2 – 血浆准备

将采集于3.2%枸橼酸钠采血管中的全血以2,000–2,500 × g离心15分钟，制备枸橼酸抗凝去血小板血浆。小心转移上清液，避免带入白膜层。室温保存时血浆应在采集后4小时内使用，如需长期保存，应冷冻于−70 °C。

步骤3 – 接触激活剂孵育

将100 µL患者或对照血浆移入预热比色杯中。加入100 µL APTT鞣花酸溶液，轻轻混匀后在37 °C孵育3–5分钟，使接触激活完全。具体孵育时间应根据所用仪器或方法进行验证。

步骤4 – 凝块启动

向血浆-激活剂混合物中加入100 µL预热的0.025 M CaCl₂溶液。加入CaCl₂后立即启动计时器（或启动仪器检测）。记录凝块形成时间（纤维蛋白终点检测）。

步骤5 – 结果记录

以秒为单位记录APTT凝血时间。每批次检测均应运行正常和异常质控（QC）血浆样本。将结果与本实验室建立的参考区间进行比较。健康成人APTT的典型参考范围约为25–35秒，但各实验室必须建立自身的参考区间。

重要提示：请务必遵循本实验室的标准操作规程（SOP）及仪器制造商指南。本方案仅提供一般性指导。

故障排除与质量控制

每班次或每次分析运行开始时，至少运行两个水平的质控品（正常和异常）。根据实验室质量管理体系记录所有质控结果及纠正措施。

安全、储存与废弃物处置

安全：按照标准实验室预防措施操作APTT鞣花酸溶液。佩戴适当的个人防护装备，包括实验服、丁腈手套和护目镜。该试剂可能含有人或动物血浆成分，应视为潜在生物危害材料。使用前请查阅产品安全数据表（SDS）以获取完整危害信息。

储存：按产品标签和安全数据表规定的条件储存。避光保存，避免反复冻融。请勿使用超过有效期的试剂。收货时记录批号和有效期。

废弃物处置：所有生物样本、废弃试剂及污染材料的处置，须符合当地、国家及机构有关生物危害废弃物的法规要求。未经核实是否符合适用废弃物处置法规前，请勿将试剂直接倒入下水道。