单糖分析是ICH Q6B生物药物特性指南中规定的监管要求。该信息可用于药物开发的所有阶段，作为确定糖基化类型（N-连接和/或O-连接）和糖基化程度的方法。它还可用于证明生产过程中QC批次之间的一致性。

单糖分析的常用方法如下：

• 通过温和的酸水解从糖蛋白中释放单糖。

• 用2-氨基苯甲酸（2AA）荧光标记释放的单糖。

• 通过HPLC柱或UHPLC对2AA标记的单糖进行相对定量分析。

单糖释放和标记试剂盒提供了从糖蛋白中释放中性和氨基单糖所需的所有信息，并用2AA标记。该试剂盒包含最多96个糖蛋白样品的试剂和材料（通常每个样品约50µg糖蛋白）。它包括含有6个单糖的定量标准（monomix）。monomix标准允许仪器校准，以定量测定糖蛋白中的单糖成分。我们建议将五点校准曲线用于monomix标准。

木糖是一种单糖，通常存在于植物和昆虫中，但不存在于哺乳动物或酵母表达载体中。它可以用作内部标准（即在标签前添加到每个样品中）。这能够补偿在样品处理过程中可能发生的任何移液/样品制备错误。使用此标准将使您能够检查聚糖释放、标记和回收的效率，并使您对单糖测量的准确性充满信心。

图1：以下单糖的峰值出现在8分钟内；葡萄糖胺（GlcN）、半乳糖胺（GalN）、半乳糖（Gal）、甘露糖（Man）、葡萄糖（Glc）、木糖（Xyl）和岩藻糖（Fuc）。

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