实验方案（Protocols）

骨髓细胞移植实验

· · 发布于 2024年12月23日 · 更新于 2024年12月23日 ·

操作方法

骨髓细胞移植实验

材料与仪器

器材：
① 注射器
试剂：
① IMDM；
② 1x PBS；
③ 酸化抗生素水。

步骤

骨髓细胞移植实验的基本过程可分为如下几步：

（一）准备骨髓移植受体小鼠

A 受体小鼠在接受辐射 1 周前，要饲喂酸化并添加抗生素的灭菌水。

B 受体小鼠接受辐射后 2 周内要继续饲喂酸化并添加抗生素的灭菌水，然后才可以改喂酸化但不含抗生素的饮用水。

C 对 C57BL6／J 小鼠而言，辐射剂量是 10 Gy 的伽马射线，受体小鼠要在 4 小时内接受尾静脉骨髓移植手术。

（二）准备移植用供体骨髓细胞

A 收获供体小鼠股骨，保存在 RPM11640（2％ FBS，10 U/mL 肝素＋青霉素＋链霉素）。

C 用注射器冲洗股骨骨髓腔，用灭菌的 40 μm 细胞滤器过滤骨髓细胞。

C 用无血清的 RPMI1640 冲洗细胞，4 ℃ 离心 5 分钟，转速 2000 r/mi。

D 用 25 mL 无血清 RPMI 重悬细胞，细胞计数。

E 无血清 RPMI1640 调整细胞浓度至 1x10 cells/mL。

F 对受体小鼠进行尾静脉注射骨髓细胞，每只小鼠注射 0.5 mL 细胞液，即 5x10⁶细胞。

（三）酸化抗生素水制备

A 用 HCl 将水的 pH 调至 2.6，灭菌。

B 每升酸化水加 10 mL 新霉素（10 mg/mL）和 400 μL 硫酸多黏菌素 B（25 mg/mL），过滤灭菌。

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目录：实验方案（Protocols）

探索主题：实验动物

Da — 若无特别说明，分子量单位默认为道尔顿。 Mw — 重均分子量。 Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用，不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《骨髓细胞移植实验》. 阿拉丁知识库，更新于 2024年12月23日。
                            https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/bone-marrow-cell-transplantation-experim.html

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