缓冲液配制指南
缓冲液配制指南
Buffer配方
1.0 mol/L TrisHCl(pH 6.8)
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溶解后,用浓盐酸调pH至6.8,最后用超纯水定容至250 mL,高温灭菌后室温下保存。
1.5mol/L TrisHCl(pH 8.8)
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溶解后,用浓盐酸调pH至8.8,最后用超纯水定容至250mL,高温灭菌后室温下保存。
10% SDS
取SDS 10g,加蒸馏水至100 mL, 50 ℃水浴下溶解,室温保存。如在长期保存中出现沉淀,水浴溶化后,仍可使用。
10% 过硫酸胺(APS)
取过硫酸胺 0.1 g ,加超纯水1.0 mL 溶解后,4 ℃保存,保存时间为1周。(-20 ℃长期保存)
30% 丙烯酰胺
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溶于总体积为50 mL的水中,定容至100 mL。室温保存于棕色瓶。
10× PBS(2L)
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NaOH调pH值至7.4,定容至2 L。保存于室温。
还原型5×SDS上样缓冲液
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混匀后,分装于1.5 mL离心管中,4 ℃可保存数周,-20 ℃可长期保存。
电泳液缓冲液
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加蒸馏水溶解定容至1000 mL室温保存,1次溶液可重复使用3~5 次。
转移缓冲液
1X电转液:
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加蒸馏水溶解定容至1000 mL 溶解后4 ℃保存,1次溶液可重复使用3~5次。
TBS缓冲液
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加蒸馏水溶解,冰醋酸调pH至7.2,定容至1000 mL。室温保存。
洗脱液TBST溶液
TBS溶液1000 mL ,1 mL吐温20,混匀后即可使用,最好现用现配。
封闭液(含5%脱脂奶粉的TBST缓冲液)
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溶解后使用,一次性使用。
RIPA(中)裂解液
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Tris-base、NaCl、EDTA、SDS称量后用蒸馏水溶解,浓HCl调pH值至7.4,先配置10%脱氧胆酸钠,加入5 mL即为0.5%,再加入1 mL的NP-40,混匀后定容至100 mL,分装,-20℃保存。
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