二水氯化钙:实验室使用常见问题解答
二水氯化钙:实验室使用常见问题解答
Calcium chloride dihydrate(二水氯化钙)是一种化学式为CaCl₂·2H₂O的常用无机盐试剂,因其高水溶性、作为钙离子来源的特性以及在感受态细胞制备、冷冻保护和缓冲液配制等方面的广泛应用而深受科研实验室青睐。
- 化学式
- CaCl₂·2H₂O
- 分子量
- 147.01 g/mol
- 外观
- 白色结晶固体(易潮解)
- 水中溶解度
- 极易溶于水;以无水物计,20 °C时溶解度约为745 g/L
- CAS号
- 10035-04-8
- 阿拉丁货号
- C431167
- Sigma参考编号
- C5080
什么是二水氯化钙?其主要理化性质有哪些?
二水氯化钙(CaCl₂·2H₂O,CAS号10035-04-8,分子量147.01 g/mol)是一种白色结晶性无机盐,具有强烈的吸湿性。其在水溶液中迅速解离,提供Ca²⁺和Cl⁻离子。二水合物是实验室中最常用的水合物形式,因为与会强烈吸收空气中水分的无水形式相比,其称量更为准确方便。
主要理化性质包括:高水溶解度、溶解时放热以及较低的二水晶体熔点(约29 °C)。其离子特性使其在适当浓度下与大多数标准实验室缓冲液和生物培养基相容。
如何为常见实验室应用配制氯化钙溶液?
配制1 M储备液时,将147.01 g二水氯化钙溶于约800 mL超纯水中,搅拌至完全溶解(溶解过程为放热反应,需待其冷却至室温),然后定容至1 L。若用于细胞培养或微生物实验,需通过0.22 µm滤膜进行过滤除菌。
在制备细菌感受态细胞时,常用方案是在冷的Tris-HCl或HEPES缓冲液中使用60–100 mM CaCl₂。请始终使用新鲜配制或经过验证的储备液;钙离子可与含磷酸盐的培养基发生沉淀,因此除非方案有特殊要求,否则应避免将CaCl₂直接与磷酸盐缓冲液混合。
分子量提示:使用二水合物(MW 147.01 g/mol)而非无水盐(MW 110.98 g/mol)时,在称量前务必确认实验方案所要求的具体形式,以确保计算准确。
二水氯化钙的主要科研应用有哪些?
分子生物学:CaCl₂是制备大肠杆菌化学感受态细胞的核心试剂。钙离子能使细菌外膜通透性增加,从而在热休克转化过程中允许质粒DNA的摄取。
细胞生物学与信号转导:钙离子是关键的第二信使。研究人员在成像缓冲液和灌流液中使用特定浓度的CaCl₂,以研究细胞内钙动态、胞吐作用及钙依赖性酶活性。
生物化学:许多酶(蛋白酶、激酶、磷脂酶)需要Ca²⁺作为辅因子。CaCl₂以µM至mM浓度范围添加到分析缓冲液中,以支持酶活性或钙结合蛋白的结构完整性。
培养基和缓冲液配制:CaCl₂是生理盐溶液(如Hanks平衡盐溶液、Tyrode溶液)的标准组分,也被包含在许多干细胞和原代细胞培养配方中。
冷冻保存和凝胶形成:钙离子能交联海藻酸盐聚合物,形成用于细胞包埋的水凝胶;CaCl₂还被用于某些细胞类型的冷冻保护剂配方中。
二水氯化钙应如何安全储存和操作?
储存:将二水氯化钙储存在密封容器中,置于阴凉干燥处,避免潮湿。由于该化合物具有强吸湿性,暴露于潮湿空气中会导致结块和重量增加,从而在浓度计算中引入误差。建议原包装开封后使用干燥剂或密封袋保存。推荐储存温度为2–25 °C;避免存放在无湿度控制的冰箱中。
安全:二水氯化钙在实验室使用中被认为急性毒性较低,对皮肤、眼睛和黏膜有轻度刺激性。常规操作时,标准个人防护装备(实验室外套、丁腈手套和防护眼镜)即可满足要求。应避免吸入粉尘;处理大量物料时应在通风良好的区域操作或佩戴防尘口罩。溶解时会产生热量;应将固体缓慢加入水中,切勿将水加入密闭容器中的大量固体中。
废弃处置:稀水溶液通常可按照当地法规通过下水道处置,因为钙离子和氯离子普遍存在于自然水体系统中。请向所在机构的环境健康安全部门确认具体处置要求。
质量、纯度级别与产品选择指南
二水氯化钙有多种纯度级别可供选择,适用的级别取决于具体应用:
- ACS/试剂级(≥99%):适用于大多数普通实验室应用、缓冲液配制及非GMP研究。
- 细胞培养级:经过内毒素、重金属及生物性能检测,推荐用于哺乳动物细胞培养、培养基制备及邻近cGMP的工作。
- 分子生物学级:低DNase/RNase污染,适用于核酸操作和转化实验方案。
阿拉丁科学提供货号为C431167的二水氯化钙,对应参考标准编号C5080。使用前请务必查阅特定批次的分析证书(CoA),以确认纯度、重金属限量及任何功能性检测结果。如对级别适用性有疑问,请联系阿拉丁科学技术支持团队。
常见问题
无水氯化钙与二水氯化钙有何区别?
无水氯化钙(CaCl₂,分子量110.98 g/mol)不含结晶水,吸湿性更强,称量精度较难保证。二水氯化钙(CaCl₂·2H₂O,分子量147.01 g/mol)每摩尔盐含两摩尔水,在典型实验室条件下更为稳定,是大多数重量法溶液配制的首选形式。称量前务必确认方案要求的具体形式,以避免浓度误差。
二水氯化钙可以用于细菌转化吗?
可以。氯化钙是制备大肠杆菌化学感受态细胞的经典试剂。细菌在冷CaCl₂溶液(通常为60–100 mM)中孵育,该溶液能短暂增加外膜通透性,使质粒DNA在42 °C短暂热休克过程中进入细胞。试剂级或分子生物学级CaCl₂·2H₂O(货号C431167)适用于此应用;使用新鲜配制的冰冷溶液可获得最佳转化效率。
为什么瓶中的二水氯化钙会结块?
结块是由于吸湿性潮解造成的。即使短暂暴露于潮湿的实验室空气中,二水合物晶体也会吸收额外的水分,导致晶体融合成团块。为防止此现象,每次使用后应立即将容器密封,储存于阴凉干燥处,开封后可考虑将试剂转移至装有硅胶干燥剂的干燥器或密封容器中。结块的物料若未明显液化仍可使用,但需仔细称量;若对重量法精度要求较高,可在使用前于100–120 °C干燥——需注意在约30 °C以上长时间加热会开始脱去结晶水。
二水氯化钙与磷酸盐缓冲液(PBS)相容吗?
钙离子与磷酸根离子反应会生成不溶性磷酸钙沉淀,因此CaCl₂通常不直接添加到标准PBS中。若方案同时需要钙和磷酸盐缓冲液,应使用低磷酸盐或无磷酸盐缓冲体系,或以极低浓度添加钙并检查是否产生可见沉淀。当钙必须以生理浓度或更高浓度存在时,可改用HEPES或Tris为基础的缓冲液作为主要介质。
哺乳动物细胞培养基中通常使用多大浓度的氯化钙?
大多数标准哺乳动物细胞培养基(如DMEM、MEM)中钙的含量约为1.8 mM,接近生理细胞外钙水平。使用粉末状培养基配制或补充定制配方时,可加入CaCl₂·2H₂O来达到该浓度。请务必使用细胞培养级或同等经检测的试剂,以避免引入可能影响细胞活力的内毒素或重金属污染物。
参考文献
- Sambrook J, Russell DW. Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001.
- Freshney RI. Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique and Specialized Applications, 6th ed. Wiley-Blackwell, 2010.
- Aladdin Scientific Product Page: Calcium Chloride Dihydrate, SKU C431167 (Sigma ref C5080). https://www.aladdin-e.com
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)