CD70 抗体:应用、特异性及科研用途
CD70 抗体:应用、特异性及科研用途
CD70 Antibody是一种研究级免疫学工具,用于检测和表征CD70(CD27配体)——一种TNF超家族成员,在淋巴细胞活化、记忆T细胞生成及肿瘤免疫逃逸中发挥关键作用。
- 靶抗原
- CD70(CD27配体,TNFSF7)
- 产品编号
- Ab348619
- 蛋白家族
- TNF超家族(TNFSF7)
- 主要生物学功能
- CD27的共刺激配体;调节T细胞和NK细胞的活化与存活
- 研究领域
- 肿瘤免疫学、淋巴细胞生物学、免疫检查点研究
- 供应商
- Aladdin Scientific(目录号:Ab348619)
CD70靶标生物学及其研究意义
CD70由TNFSF7基因编码,是一种II型跨膜糖蛋白,属于肿瘤坏死因子(TNF)超家族成员。它是CD27目前已知的唯一配体,CD27是一种共刺激受体,主要表达于初始T细胞、记忆T细胞、B细胞及自然杀伤(NK)细胞。CD70–CD27信号轴在抗原特异性T细胞的克隆扩增、B细胞向浆细胞的分化以及免疫记忆的长期维持中发挥关键作用。
在正常生理条件下,CD70的表达受到严格调控且呈瞬时性,短暂出现于活化的树突状细胞、T细胞和B细胞表面。然而,异常且持续性的CD70表达已在多种恶性肿瘤中被记录,包括肾细胞癌(RCC)、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、胶质母细胞瘤及某些实体瘤,使CD70成为肿瘤学研究中极具潜力的生物标志物和治疗靶点。
因此,深入了解CD70的表达模式、蛋白相互作用及下游信号通路,对于肿瘤免疫学、过继细胞治疗优化及免疫检查点生物学研究至关重要。
CD70抗体(Ab348619)的验证应用
Aladdin Scientific的CD70抗体(Ab348619)适用于CD70蛋白的检测与研究,作为研究试剂使用。靶向CD70的抗体通常经以下实验室应用验证:
- 流式细胞术(FC/FACS):检测活化免疫细胞或肿瘤细胞系表面的CD70表达,实现CD70阳性群体的定量分析。
- 免疫组织化学(IHC):在福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织切片中定位CD70蛋白,常用于评估肿瘤活检标本和淋巴组织中的表达情况。
- 免疫荧光(IF):通过荧光显微镜观察固定细胞或组织切片中CD70的分布。
- Western印迹(WB):在细胞或组织裂解液中检测变性CD70蛋白,以确认靶标表达并估计分子量。
- 免疫沉淀(IP):从裂解液中富集CD70蛋白复合物,用于后续相互作用研究。
研究人员应查阅Ab348619的具体数据表,以确认已通过实验验证的应用、推荐稀释比例及兼容的二抗。
实验方案指导
具体实验条件应始终参照产品数据表,以下通用指导原则反映了针对CD70等细胞表面TNF超家族成员抗体的最佳实践:
流式细胞术
- 收集细胞,用含1% BSA的冷PBS(FACS缓冲液)洗涤两次。
- 在冰上使用Fc受体封闭试剂封闭非特异性结合10分钟。
- 在4°C条件下,用推荐稀释比例的CD70抗体(Ab348619)孵育细胞30分钟。
- 用FACS缓冲液洗涤两次,如需要,加入适当荧光素标记的二抗孵育。
- 洗涤后重悬于含活性染料的FACS缓冲液中,上机检测。
免疫组织化学(FFPE)
- 脱蜡切片,经梯度乙醇系列复水至水。
- 按数据表推荐,使用柠檬酸缓冲液(pH 6.0)或EDTA缓冲液(pH 9.0)进行热诱导抗原修复(HIER)。
- 用3% H₂O₂封闭内源性过氧化物酶活性10分钟。
- 用血清或蛋白封闭液封闭30分钟,在4°C条件下加入推荐稀释比例的CD70一抗,孵育过夜。
- 加入HRP标记的二抗,DAB底物显色,苏木精复染,脱水封片。
每次实验均应设置适当的同型对照及阳性/阴性组织对照。
CD70在肿瘤免疫学及治疗研究中的应用
CD70已成为肿瘤免疫学中的重要靶点,原因在于:其在正常组织中的表达受限,而在血液系统恶性肿瘤和特定实体瘤中频繁过表达,形成有利的治疗窗口。多项研究和临床项目已探索抗CD70的多种治疗策略,包括:
- 抗体-药物偶联物(ADC):利用抗CD70抗体将细胞毒性载荷选择性递送至CD70表达的肿瘤细胞。
- CAR-T细胞疗法:工程化靶向CD70的嵌合抗原受体T细胞,用于肾细胞癌和急性髓系白血病的治疗。
- 双特异性抗体:将免疫效应细胞重定向至CD70阳性肿瘤。
Ab348619等研究级CD70抗体是上述研究流程中不可或缺的工具,用于确认患者来源样本中的靶标表达、筛选细胞系,以及在治疗开发前评估受体密度。通过经验证的免疫学方法准确表征CD70表达,是有意义的转化研究的先决条件。
抗体选择与质量注意事项
为特定应用选择合适的CD70抗体需考虑以下几个参数:
- 宿主物种和同型:确保与二抗检测试剂及多重检测面板兼容。
- 克隆性:单克隆抗体批次间一致性高且表位特异性明确;多克隆抗体信号可能更强,但批次间差异较大。
- 偶联形式:未偶联抗体使用灵活;直接偶联格式(如PE、FITC、APC)可简化流式细胞术工作流程。
- 验证应用:务必确认该特定抗体已在您目标应用中完成测试,切勿在缺乏数据支持的情况下假设跨应用的适用性。
- 反应性:确认抗体能检测您目标物种(人、小鼠等)的CD70。
- 批次特异性质量控制数据:查阅Ab348619提供的质量控制文件,包括SDS-PAGE纯度、ELISA效价及功能验证数据。
如需订购、技术支持或获取CD70抗体(Ab348619)的更多文件资料,请直接联系Aladdin Scientific或访问我们网站上的产品页面。
常见问题
CD70是什么?为什么它是重要的研究靶点?
CD70(TNFSF7)是共刺激受体CD27的配体,属于TNF超家族成员。它在T细胞和NK细胞活化及免疫记忆形成中发挥核心作用。CD70是重要的研究靶点,因为它在多种癌症中异常过表达(包括肾细胞癌和淋巴瘤),而在大多数正常组织中几乎不表达,使其成为生物标志物研究和治疗开发的理想靶标。
CD70抗体(Ab348619)适用于哪些实验应用?
CD70抗体通常用于流式细胞术、免疫组织化学(IHC)、免疫荧光(IF)、Western印迹及免疫沉淀。研究人员应查阅Ab348619官方数据表,以获取经实验验证的具体应用列表和推荐工作稀释比例,因为已确认的应用可能因批次而有所不同。
如何储存CD70抗体以保持其活性?
抗体储存条件应始终遵循Ab348619产品数据表中的说明。通常,抗体最佳长期储存温度为-20°C,初次使用时应分装以避免反复冻融。短期储存在4°C下通常可保存长达一个月。
在流式细胞术中使用CD70抗体时应设置哪些对照?
在使用CD70抗体进行流式细胞术时,应加入同宿主物种、相同克隆性和偶联形式的同型对照抗体,以评估非特异性背景染色。此外,使用已知CD70阳性细胞系或活化淋巴细胞作为阳性对照,并加入活性染料以排除死细胞干扰。
CD70抗体(Ab348619)可用于治疗目的吗?
不能。Ab348619严格为仅限研究使用(RUO)试剂,未经批准、验证或授权用于人体或动物的诊断或治疗目的,仅供体外实验室研究使用。
参考文献
- Croft M. Co-stimulatory members of the TNFR family: keys to effective T-cell immunity? Nature Reviews Immunology, 2003.
- Lens SM, et al. The role of CD70 in T-cell activation and disease. Immunology Today, 1999.
- Jacobs J, et al. CD70: an emerging target for cancer immunotherapy. Expert Opinion on Therapeutic Targets, 2015.
- Aladdin Scientific. CD70 Antibody, catalog Ab348619. Product datasheet.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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