了解白喉棒状杆菌毒力试验的原理及作用。

操作方法

琼脂平板毒力试验

原理

毒素与抗毒素在琼脂内扩散相遇，当其比例适合时可形成肉眼可见的特异性沉淀线。本试验法代替动物皮内试验，其优点为简便，不需动物，且与动物试验结果基本一致。

步骤

取磷酸盐蛋白琼脂11ml加热溶解，待冷却至50 ℃倾入已灭菌的7.5 cm直径的平皿中。
 
待凝固后，放入37℃温箱约一小时使培养基表面干燥。
 
镊取小圈滤纸片浸于白喉抗毒素中（注意取出时滤纸上剩余液体应使流去），然后将含有抗毒素的圆滤纸片置平板中央。
 
于距离小圆滤纸片边缘6-8mm处，接种数株待检白喉棒状杆菌培养物，接种面积约等于小圆滤纸片的大小（接种菌量宜多一些）。
 
置37 ℃孵育24-48h，阳性者于小圆滤纸片与培养物之间出现一条白色沉淀线。

常见问题

如待检菌株有毒力则与含白喉抗毒素的滤纸片之间出现一条清晰的白色沉淀线；如设有阳性对照，则此沉淀线往往与阳性对照株的沉淀线相吻合。

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