实验方案(Protocols)

蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验

简介

这种方法在各种交联反应中具有代表性,是最古老和最实用的方法之一。它可以使蛋白质间形成分子间桥梁,也可以令不同蛋白质相连。它更是研究蛋白亚基间作用的有效工具。交联程度取决于反应基团间距离和反应速度。通过控制交联反应时间可研究蛋白质聚合步骤,获得空间结构信息,还可获得许多链长不同的同源结合体,用于研究蛋白亚基间交联与距离的关系。来源:《酶学实验手册》

操作方法

基本方案

材料与仪器

蛋白质 二甲亚胺
​三乙醇胺盐酸盐 中性缓冲液

步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」


混合二甲亚胺溶液,终浓度为 1~12 mg/ml,蛋白质溶于 0.2 mol/L pH 8.5 的三乙醇胺盐酸盐中,浓度为 0.4~5 mg/ml,室温放置 3 h。用中性缓冲液透析。

常见问题

试剂:


0.2 mol/L 三乙醇胺盐酸盐,pH 8.5


二甲亚胺(二盐酸盐,Mr=273.2,用 0.2 mol/L pH 8.5 的三乙醇胺盐酸盐制备溶液,用前现配,如 3 mg/ml)


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探索主题: 生物化学实验

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月23日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/cross-linking-experiments-of-proteins-wi.html
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