实验方案(Protocols)
蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验
蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验
这种方法在各种交联反应中具有代表性,是最古老和最实用的方法之一。它可以使蛋白质间形成分子间桥梁,也可以令不同蛋白质相连。它更是研究蛋白亚基间作用的有效工具。交联程度取决于反应基团间距离和反应速度。通过控制交联反应时间可研究蛋白质聚合步骤,获得空间结构信息,还可获得许多链长不同的同源结合体,用于研究蛋白亚基间交联与距离的关系。来源:《酶学实验手册》
操作方法
基本方案
材料与仪器
蛋白质 二甲亚胺 步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」 混合二甲亚胺溶液,终浓度为 1~12 mg/ml,蛋白质溶于 0.2 mol/L pH 8.5 的三乙醇胺盐酸盐中,浓度为 0.4~5 mg/ml,室温放置 3 h。用中性缓冲液透析。 常见问题 试剂: 0.2 mol/L 三乙醇胺盐酸盐,pH 8.5 二甲亚胺(二盐酸盐,Mr=273.2,用 0.2 mol/L pH 8.5 的三乙醇胺盐酸盐制备溶液,用前现配,如 3 mg/ml) 如需了解更多产品详情,请前往阿拉丁官网查询。
三乙醇胺盐酸盐 中性缓冲液
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