实验方案（Protocols）

盐酸环鸟苷：制备与操作规程

· · 发布于 2026年10月4日 · 更新于 2026年10月4日 ·

Cycloguanil Hydrochloride 是氯胍的活性三嗪代谢产物，能有效抑制疟原虫二氢叶酸还原酶（DHFR），是抗疟疾和抗寄生虫研究中重要的药理学工具化合物。

化学名称: 4,6-二氨基-1-(4-氯苯基)-1,2-二氢-2,2-二甲基-1,3,5-三嗪盐酸盐
分子式: C₁₁H₁₄ClN₅ · HCl
主要作用机制: 选择性抑制疟原虫二氢叶酸还原酶（DHFR），干扰寄生虫的叶酸生物合成
推荐溶剂: 水或水性缓冲液（如PBS，pH 7.4）；储备液可有限度地使用DMSO
储存条件: 于2–8 °C避光、防潮密封保存
产品编号: C131997

概述与作用机制

盐酸环胍是双胍类前药氯胍在体内经代谢生成的具有药理活性的环状三嗪代谢产物。它通过选择性抑制疟原虫中对四氢叶酸生物合成至关重要的二氢叶酸还原酶（DHFR），从而阻断核苷酸合成并抑制寄生虫增殖，发挥抗寄生虫作用。

由于该化合物对寄生虫DHFR具有相对于哺乳动物同源酶的选择性，盐酸环胍被广泛用作生化工具，用于探究DHFR功能、研究耐药突变（尤其是恶性疟原虫DHFR的108、51和59位残基），以及在早期药物发现项目中验证抗叶酸支架。研究人员还将其与乙胺嘧啶或阿托伐醌等其他抗叶酸药物联合使用进行研究。

材料与设备

盐酸环胍（Aladdin 产品编号：C131997）
分析天平（可读性0.01 mg）
二级生物安全柜或化学通风橱
棕色玻璃瓶或低吸附聚丙烯管（1.5 mL、15 mL）
注射用无菌水或磷酸盐缓冲液（PBS，pH 7.4）
无水DMSO（如需配制非水储备液）
0.22 µm注射式过滤器（PES或尼龙膜）
已用标准缓冲液校准的pH计
涡旋混合仪和/或水浴超声仪
冰箱（2–8 °C）及–20 °C冰柜（用于储备液长期保存）
个人防护装备：实验服、丁腈手套、安全护目镜

分步操作方案

步骤1 — 储备液的配制

在打开前，将密封的盐酸环胍瓶在其保护容器内平衡至室温（15–25 °C），以防止粉末表面结露。
在通风橱内使用经校准的分析天平准确称量所需量的化合物。
配制水性储备液时，将化合物溶于无菌水或PBS（pH 7.4）中，轻轻涡旋（30–60秒）。由于盐酸盐形式，盐酸环胍在水中具有较好的溶解性。目视确认完全溶解；如有必要，可在室温下进行水浴超声（5–10分钟）。
若需DMSO储备液（如配制高浓度母液），应先溶于无水DMSO，然后在使用前立即稀释至水性介质中；确保检测体系中DMSO终浓度不超过0.1% v/v，以尽量减少细胞毒性假象。
若化合物用于细胞实验，应通过0.22 µm膜过滤除菌。
将储备液分装于棕色或铝箔包裹的管中，避光保存。标签注明化合物名称、浓度、溶剂、日期及操作人员姓名缩写。

步骤2 — 浓度验证（可选但推荐）

通过紫外-可见分光光度法在三嗪发色团的λmax处测定稀释样品的吸光度（参照文献或扫描220–320 nm进行确认）。
若需高精度，可选择HPLC外标法对储备液浓度进行验证。

步骤3 — 检测应用

使用前立即在适当检测缓冲液或细胞培养基中对储备液进行梯度稀释。
用于DHFR酶抑制实验时，典型工作浓度范围为低纳摩尔至低微摩尔；参考所研究特定DHFR变体的已发表IC₅₀数据进行相应滴定。
用于全细胞抗疟实验（如恶性疟原虫生长抑制实验）时，在完全RPMI-1640培养基（或同等培养基）中进行稀释，以所需浓度加入寄生虫培养体系。
每次实验均应设置适当的溶剂对照（水或DMSO，浓度与处理组匹配）。

步骤4 — 实验后处理与废弃物处置

将所有含化合物的溶液及污染耗材收集于指定化学废弃物容器中。
按照机构及当地法规要求处置含卤素化合物废弃物。

储存、稳定性与安全性

储存：按照供货状态，将盐酸环胍于2–8 °C密封避光、防潮保存。配制好的水性储备液应分装以减少反复冻融，于–20 °C保存，并在3个月内使用。DMSO储备液若密封良好（防止水分进入），可于–20 °C保存最长6个月。

稳定性：固体形式在推荐储存条件下预计稳定。水溶液长期存放可能发生水解；尽可能现配现用工作液，避免反复冻融。

安全性：盐酸环胍是具有抗叶酸活性的生物活性化合物，操作时应穿戴适当的个人防护装备（实验服、丁腈手套、安全护目镜），避免吸入粉末或气溶胶，操作后彻底洗手。完整的危害分类、急救措施和废弃物处置要求请参阅Aladdin Scientific提供的安全数据表（SDS）。本品仅供研究使用，未批准用于人类或兽用治疗。

故障排查

问题	可能原因	建议解决方法
溶解不佳或不完全	混合不充分；粉末因吸湿结块	将溶剂适当加温（37 °C），剧烈涡旋后水浴超声（5–10分钟）。确保化合物在称量前已平衡至室温。
活性随时间降低	反复冻融或光照导致降解	配制单次用量分装液；于–20 °C棕色管中保存；避免溶液直接暴露于光照。
DHFR检测背景过高	检测体系中DMSO过多；杂质荧光干扰	将DMSO控制在≤0.1% v/v；同步设溶剂对照；通过紫外-可见光谱或HPLC验证试剂质量。
不同实验间IC₅₀值不一致	储备液浓度漂移；DHFR酶活性变化	每次检测系列前用HPLC验证储备液浓度；加入内部参考抑制剂（如甲氨蝶呤）作为检测性能对照。

常见问题

溶解盐酸环胍推荐使用哪些溶剂？

盐酸环胍最适合溶于水或水性缓冲液（如PBS，pH 7.4），可充分利用其盐酸盐形式带来的良好水溶性。若需在DMSO中配制高浓度储备液，应先溶于无水DMSO，在使用前立即稀释至水性检测介质，并将终体系中DMSO浓度控制在0.1% v/v及以下。

如何储存盐酸环胍储备液以保持其稳定性？

固体粉末应于2–8 °C密封避光保存。配制好的储备液应分装为单次用量，用铝箔包裹或置于棕色管中，于–20 °C保存。应避免反复冻融（会加速降解），每份分装液仅使用一次。

盐酸环胍通常用于哪些检测体系？

盐酸环胍常用于以下检测体系：生化DHFR酶抑制实验、以恶性疟原虫培养为基础的全细胞抗疟生长抑制实验、比较野生型与突变型DHFR变体的耐药性分析研究，以及与其他抗叶酸或抗疟药物的联合药理学研究。

盐酸环胍适合用于体内研究吗？

盐酸环胍（产品编号C131997）作为研究级试剂提供，主要用于体外实验室研究。若需用于任何体内研究，研究人员须自行核实其适用性、纯度规格、制剂要求，并确保符合机构动物伦理和相关法规要求。本品未批准用于人类或兽用治疗。

参考文献

Ferone R. Dihydrofolate reductase inhibition by antifolates: selectivity and mechanism. In: Antifolate drugs in cancer therapy. Totowa: Humana Press; 1999.
Nzila A. The past, present and future of antifolates in the treatment of Plasmodium falciparum infection. J Antimicrob Chemother. 2006;57(6):1043-1054. doi:10.1093/jac/dkl104
Watkins WM, Mberu EK, Winstanley PA, Plowe CV. The efficacy of antifolate antimalarial combinations in Africa: a predictive model based on pharmacodynamic and pharmacokinetic analyses. Parasitol Today. 1997;13(12):459-464.

产品仅供科研与开发使用，不用于人体、动物、诊断或治疗。

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探索主题：实验方案抗寄生虫盐酸环胍抗疟疾 DHFR抑制剂

Da — 若无特别说明，分子量单位默认为道尔顿。 Mw — 重均分子量。 Mn — 数均分子量。