DIAPH2 小鼠单克隆抗体:靶点生物学、应用及实验方案
DIAPH2 小鼠单克隆抗体:靶点生物学、应用及实验方案
DIAPH2 Mouse mAb是一种在小鼠中制备的单克隆抗体,特异性靶向人DIAPH2(Diaphanous相关formin-2)蛋白,可在多种实验平台上可靠检测和功能研究这一重要的肌动蛋白细胞骨架调节因子。
- 产品名称
- DIAPH2鼠单克隆抗体
- 货号
- Ab349495
- 宿主物种
- 小鼠
- 抗体类型
- 单克隆抗体(mAb)
- 靶蛋白
- DIAPH2(Diaphanous相关formin-2)
- 参考克隆编号
- KC-40807(absea)
靶点概述:DIAPH2是什么?
DIAPH2,又称Diaphanous相关formin-2,是Diaphanous相关formin(DRF)蛋白家族的成员。Formin蛋白是公认的非分支肌动蛋白丝成核剂和延伸因子,在调节肌动蛋白细胞骨架中发挥关键作用。DIAPH2参与胞质分裂、细胞极性、丝状伪足形成和微管动力学,是细胞形态和分裂的多功能调节因子。
DIAPH2含有特征性的formin同源结构域(FH1和FH2),负责profilin结合和肌动蛋白聚合,以及受Rho GTPases调控的自抑制Diaphanous抑制结构域(DID)。DIAPH2的失调与癌症进展、卵巢早衰和神经发育障碍有关,凸显了其重要的生物医学意义。
产品描述与试剂规格
DIAPH2鼠单克隆抗体(货号Ab349495)是针对DIAPH2蛋白制备的小鼠单克隆抗体,由Aladdin Scientific作为高质量研究试剂提供,用于在实验样品中检测DIAPH2。原始制造商的参考克隆编号为KC-40807(absea)。与多克隆血清相比,单克隆抗体具有更优越的批次间一致性和表位特异性,使Ab349495成为可重复研究的可靠选择。
注意:具体技术参数,包括免疫原序列、克隆性确认、同型、偶联方式、推荐稀释比例、经验证的物种反应性及储存条件,应参照Aladdin Scientific产品页面上的最新官方数据表或联系技术支持进行核实,因为这些详细信息未在来源资料中提供。
推荐实验方案与应用指南
针对formin家族蛋白(如DIAPH2)的小鼠单克隆抗体通常用于以下检测格式。请务必查阅官方产品数据表,了解Ab349495各应用的经验证状态和优化条件:
- 蛋白质印迹(WB):对细胞或组织裂解液进行变性还原处理,经SDS-PAGE分离后转膜至PVDF或硝酸纤维素膜。用5%脱脂奶粉或BSA-TBST封闭。按制造商推荐稀释比例在4 °C条件下孵育一抗过夜。使用适当的HRP偶联抗鼠二抗进行检测。DIAPH2的预期分子量应参照当前数据表确认。
- 免疫荧光(IF)/免疫细胞化学(ICC):用4%多聚甲醛固定细胞,用0.1–0.3% Triton X-100通透,封闭后孵育一抗。用荧光素偶联抗鼠二抗可视化。与鬼笔环肽(F-肌动蛋白标记物)共染色可为DIAPH2定位研究提供有价值的参考。
- 免疫沉淀(IP):在非变性条件下裂解细胞。将裂解液与Ab349495孵育,并用Protein A/G磁珠捕获免疫复合物。洗脱后经SDS-PAGE/WB分析。
- 免疫组织化学(IHC):对FFPE组织切片进行抗原修复(常用热诱导、柠檬酸缓冲液pH 6.0),封闭内源性过氧化物酶,施加一抗后用HRP聚合物抗鼠检测系统检测。
最佳工作稀释度、孵育时间及经验证的应用须从官方Ab349495数据表中确认。
储存、操作与质量保证
为保持抗体活性并确保实验重复性,请遵循单克隆抗体储存和操作的一般最佳实践:
- 储存:按产品数据表上的说明储存。抗体通常在稳定缓冲液(如含BSA和叠氮钠的PBS)中提供,长期使用存于-20 °C,短期使用存于4 °C。首次使用时分装,避免反复冻融。
- 操作:在冰上解冻,轻柔混匀(勿涡旋),使用前短暂离心以收集凝液。在洁净环境中操作,防止污染。
- 质量:作为单克隆抗体,Ab349495具有高表位特异性和批次间重复性。每批次均经制造商质量控制检测。质检证书(CoA)数据可向Aladdin Scientific申请获取。
具体储存温度、缓冲液组成、浓度和保质期须从官方产品数据表或CoA中确认。
常见问题
DIAPH2鼠单克隆抗体在Aladdin Scientific的货号是什么?
DIAPH2鼠单克隆抗体在Aladdin Scientific的货号为Ab349495。原始制造商(absea)的参考克隆编号为KC-40807。
DIAPH2鼠单克隆抗体(Ab349495)经验证适用于哪些应用?
针对DIAPH2的小鼠单克隆抗体常见应用包括蛋白质印迹(WB)、免疫荧光(IF)、免疫组织化学(IHC)和免疫沉淀(IP)。但Ab349495经验证的具体应用应通过查阅Aladdin Scientific官方产品数据表或联系技术支持来确认,因为现有来源资料中未完整提供此信息。
为什么检测DIAPH2时要使用单克隆抗体而非多克隆抗体?
像Ab349495这样的单克隆抗体识别DIAPH2蛋白上的单一确定表位,提供更优越的特异性、更低的背景噪音和出色的批次间重复性。这使其在定量检测以及需要在不同实验和实验室之间保持一致、可重复结果的研究中尤为有优势。
应如何储存DIAPH2鼠单克隆抗体(Ab349495)以保持其活性?
一般最佳实践建议将单克隆抗体长期存于-20 °C,短期使用存于4 °C。为避免活性损失,首次解冻时应分装,以防止反复冻融。具体储存条件,包括缓冲液组成和推荐温度,应从官方Ab349495产品数据表或质检证书中核实。
DIAPH2作为研究靶点的生物学意义是什么?
DIAPH2是Diaphanous相关formin家族成员,在肌动蛋白丝成核、胞质分裂、丝状伪足形成和微管调控中发挥关键作用。其失调与癌症进展、卵巢早衰和神经发育障碍有关,使其成为细胞生物学、肿瘤学和生殖医学研究中具有重要意义的靶点。
参考文献
- Aladdin Scientific product page: DIAPH2 Mouse mAb, Cat. No. Ab349495 (reference clone KC-40807, absea).
- Chesarone MA, DuPage AG, Goode BL. Unleashing formins to remodel the actin and microtubule cytoskeletons. Nat Rev Mol Cell Biol. 2010;11(1):62-74. doi:10.1038/nrm2816
- Rivero F, et al. The Diaphanous-related formins: an emerging subfamily of effectors of Rho GTPases. Cell Mol Life Sci. 2005;62(12):1385-1396.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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