掌提白细胞计数显微镜计数法原理及技术．

操作方法

白细胞直接计数实验

原理

用稀醋酸液，将血液稀释并破坏红细胞，混匀后充入计数池，在显微镜计数一定体积内的白细胞计数，，经换算求得每升血液中的白细胞数，常用有以下两种方法：l％盐酸；2％醋酸

材料与仪器

血液
稀醋酸液 盐酸
显微镜 微量吸管 计数板 盖玻片

步骤

1. 取小试管二支，加白细胞稀释液0.38ml．

2. 用微量吸管准确吸取末梢血20微升或抗凝血20微升．3、擦去管尖外部余血，将吸管插入稀释液底部。轻轻注入，吸取上清液清洗3次，摇匀。

4. 将计数板和盖片擦净，盖片盖在计数池上再用微量吸管吸入悬液，充入清洁的计数池与盖玻片间的细缝隙中，静止2-3分钟，待细胞下沉．5、用低倍镜计数四角的四个大方格内的白细胞数．

5. 用低倍镜计数四角的四个大方格内的白细胞数;

6. 计算（四个大方格内白细胞数／4）×10×20×10⁶＝白细胞数/升

实验报告方式：ΔΔΔ×10⁹/L

参考值：成　人： （4－10）×10⁹/L

新生儿： （15－20）×10⁹/L

6月－2岁 （11-12）×10⁹/L

注意事项

l. 加稀释液应固定用甲级1毫升吸管或标准的0.38mL加样器．2. 白细胞数太低者（＜2×109/L） 可数8个大方格内的白细胞数或重新取40ul计数结果除以2，白细胞太高者可增加稀释倍数重新计数．3. 白细胞稀释液不能破坏有核红细胞，因此，在病理情况下，外周血出现大量有核红细胞时应于减去WBC／升＝（校正前有核cell／升）×（100／100+分类计数10O个WBC时的有核细胞数）．

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