干化学试剂带法检测尿蛋白实验
干化学试剂带法检测尿蛋白实验
加热可使蛋白质变性凝固,加酸可使蛋白质接近等电点,促使蛋白质沉淀.此外,加酸还可以溶解碱性盐类沉淀,本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制临床实验指导
操作方法
干化学试剂带法检测尿蛋白实验
原理
用钨酸沉淀尿液中的蛋白质,然后用双缩脲反应进行定量。
材料与仪器
硫酸溶液 钨酸钠溶液 蒸馏水 步骤 一、实验试剂; 1、1.75mmol/L 硫酸溶液 2、15g/L 钨酸钠溶液 3、双缩脲试剂;取硫酸铜(CuSO420)3.0g溶于500ml蒸馏水中加酒石酸钾钠 9.0 gKI 50g使溶,加 6 moL/LNaOH液 100 ml加水到1000 ml混匀.密闭贮存于聚乙烯瓶内。 4、蛋白质标准液(2.0 g/L)用准确定值的混合入血清,以 3 g/L的苯甲酸液作稀释,释成 2.0 g/L的浓度,贮存待用. 二、实验方法: 1、留取 24 h尿液标本,(加甲苯防腐),混合后,记总量,取小量尿液离心用滤纸过滤. 2、先作蛋白质定性+-++在10ml刻度离心管加尿液5ml如(+++-++++)则在管中加尿液lml蒸馏水4ml. 3、加75mmol/L硫酸2.5ml混合. 4、加钨酸钠2.5ml,充分混合静止10分钟 5、离心沉淀5分钟倾去上清,保留沉淀加生理盐水1.0ml混合,为测定管. 6、按下表操作 测定管 标准管 Pr标液 1.0 双缩同试剂(ml) 4.0 4.0 充分混和,37℃水浴30分钟,用540nm处比色,读取SU 三、计算: 24小时尿蛋白总量(g)=(V/S)×50×(0.05/固定管尿量(ml))×(24总尿量/1000) 如需了解更多产品详情,请前往阿拉丁官网查询。
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