掌握红细胞计数（显微镜计象法）原理及技术

操作方法

红细胞计数实验

原理

用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数地中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数，经过换算示得每升血液内的红细胞数。

材料与仪器

赫母代氏红细地稀释液 氯化钠 结晶硫酸钠 氯化高汞 蒸馏水 柠檬进盐甲留盐水
显微镜 血红蛋白吸管 计数板 盖玻片

步骤

三、实验试剂：

l、赫母（Hayem）代氏红细地稀释液

氯化钠（NaCl）                  0.1g

结晶硫酸钠                      5.0g

（或 Na2SO4）2.5g

氯化高汞（HgC12）                0.5g

蒸馏水                          加至20Oml过滤后使用其中氯化钠。硫酸钠起调节渗透浓度作用，另Na2SO4还能防止红细胞聚集；HgCI2为防腐剂。

2、柠檬进盐甲留盐水

NaCl                             0.6g

柠檬酸钠（Na3C6H5O7?2H2O）          1.0g

Formalin                         1mL

蒸馏水        加至100mL过滤后使用NaCl、Na3C6H5O7?2H2O调节渗透浓度，后者可抗凝，甲醛防腐。

3、新配制的等渗盐水

四、实验器材：显微镜、血红蛋白吸管、计数板、盖玻片五、实验操作：

l、取试管1支，加稀释液3.98mL(或1.99mL)

2、用清洁干燥的微量吸管准确吸取末梢血10微升。

3、擦去管尖外部余血、轻轻注入红细胞稀释液底部．再吸取上层稀释液清吸管2-3次，立即摇匀。

4、将计数池与盖玻片用软布料擦净，将盖玻片覆盖于计数池上。

5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液，充入计数池中。

6、静止2-3分钟，待经红细胞下沉后，用高倍镜或低倍镜计数中央大方格内四角和正中五个中方格内的红细胞数．六、计算：

N（五个中方格内RBC数）×5×10×10⁶×200＝N×10¹²个/升×5：表示5个中方格内RBCovt 换算为1个大方格内RBC数×10：l个大方格容积、0.1ul、换算为lul内RBC数

×10⁶：1uL换算为1升内红细胞救

×20O：稀释倍数

七、实验报告方式：ΔΔΔ×10¹²/L

正常参考值：成年男性：4.OO－5.50×10¹²/L

成年女性：3.50－5.00×10¹²/L

新生儿：  6.00－7.00×10¹²/L

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