磺胺类药物能与某些试剂发生反应生成有色物质，通过比色可以对其血浓度进行定量检测。酸性环境下，磺胺类药物苯环上的氨基（-NH2）离子化生成铵类（-NH3+）化合物，与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成重氮盐（-N=N+-）。这种化合物在525 nm波长下比色，其光密度与磺胺类药物的浓度呈正比。

操作方法

比色法

原理

磺胺类药物能与某些试剂发生反应生成有色物质，通过比色可以对其血浓度进行定量检测。酸性环境下，磺胺类药物苯环上的氨基（-NH2）离子化生成铵类（-NH3+）化合物，与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成重氮盐（-N=N+-）。这种化合物在525 nm波长下比色，其光密度与磺胺类药物的浓度呈正比。药代动力学：研究药物在体内转运和转化的动力学规律。通过观察用药后血药浓度的变化（时量曲线），研究药物从血浆中消除的速率，并以房室模型描述其规律，指导临床用药、调整用药剂量和给药间隔时间。

材料与仪器

兔子
三氯醋酸 亚硝酸钠 麝香草酚 磺胺嘧啶
分光光度计

步骤

1.  麻醉，分离颈动脉。耳缘静脉注射肝素抗凝后，颈动脉插管，取动脉血备用。

2.  取血：先取空白动脉血。然后给家兔耳缘静脉注射磺胺嘧啶（SD，0.3 g），分别于注射后0、3、5、15、30、45、60、90 min 时取动脉血。

3.  测定血药浓度：严格按照下表中的顺序加药：
 
  根据标准管的药物浓度及其光密度值，可计算出样品管内的药物浓度。公式如下：

OD 样/OD 标 = C 样/C 标

将所测得的血药浓度值与时间通过计算机进行曲线拟合，得到药时曲线，表达公式如下：

C_t = Ae^-αt + Be^-βt

其中，
C_t：时间t后的血药浓度
A：分布开始时的血药浓度；
α：分布速率常数；
B：消除开始时的血药浓度；
β：消除速率常数。

在半对数坐标纸上以时间（t）为横坐标，实测的光密度值换算而得的血药浓度的对数为纵坐标，绘制时量曲线图。 

注意事项

1.  加取血样的吸量管为同一只，因此应先取空白血样，分别加到对照管和标准管中后，再从注射后90min 时的血样开始取起，然后是注射后60、45、30、15、5、3、0 min 的血样。

2.  每只试管内，先加三氯醋酸，再加入血样，加完血样后立即振荡，否则会很快发生凝固，影响结果的准确性。

3.  显色剂的顺序一定不能错：亚硝酸钠→麝香草酚。

4.  SD的血药浓度单位为μg/ml。

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