高压蒸汽灭菌法是实验室对实验室材料进行灭菌的主要手段。主要设备是蒸汽高压锅，有卧式和立式两种。此外还有手提式小型高压锅，使用比较方便。

高压灭菌的原理是利用增加锅内蒸汽的压力而提高蒸汽的温度，达到杀灭全部微生物的作用。

本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导

操作方法

高压灭菌器的使用实验

原理

高压灭菌的原理是利用增加锅内蒸汽的压力而提高蒸汽的温度，达到杀灭全部微生物的作用。现在最常用的培养基灭菌条件是1.05kg/cm2(121℃)15min，时间过长有可能破坏培养基的营养成分。含糖的生化培养基的灭苗条件是0.7kg/cm2(116℃)15 min，或用流动蒸汽发灭菌。器皿的灭菌可以1.05kg/cm2(121℃)20min。

步骤

高压灭菌操作方法如下：

1. 将欲灭菌物品放入锅内，关闭锅门，拧紧螺丝。确认已经密闭，方可进入下一步操作。

2.  打开排气阀。

3.  打开蒸汽开关，向锅内输送蒸汽或插上电源，使产生蒸汽。

4.  观察排气阀门的排气情况，待排除的气体由冷空气变为蒸汽，温度为（105℃）时，可关闭排气阀。

高压灭菌时须注意，必须待锅内冷气完全排除后才可关闭排气阀加压，否则达不到灭菌效果。

5.  观察压力表升至1.05 kg/cm2开始记时。

6.  压力达到1.05 kg/cm2后，可调节进气阀，减少进气量，维持压力并使其稳定在1.05 kg/cm2。电加热时。可切断电源，维持压力，持续15min，至多不能超过30min，否则营养物受破坏。

7. 关掉进气阀门或切断电源，让锅内物品正常冷却，不可以马上打开排气阀。

8.  待锅内压力降为零时，才打开锅门，取出物品。

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