荧光标记多肽
荧光标记多肽
荧光标记多肽是一类通过共价连接荧光基团的活性肽,能够实现分子水平的可视化检测,具有高灵敏性、安全性及低成本的优势。其基本原理为:荧光物质含共轭双键体系,受紫外或蓝紫光激发后,电子从激发态回到基态时释放光子,产生荧光信号。
1.主要特点与优势:
高灵敏度:能够检测低浓度分子,实现精确成像。
安全无辐射:不产生放射性污染,实验操作安全。
成本低:相比放射性标记和高端成像技术更经济。
2.荧光基团选择:
体外研究:发射波长400–600 nm(如AMC、FITC、TAMRA),适用于细胞或蛋白体外实验。
体内成像:发射波长650–900 nm(如ICG、Cy5.5、Nile Blue),穿透力强,背景干扰低。
3.荧光标记多肽的应用
3.1荧光多肽的合成与标记
荧光基团多通过共价键连接于多肽N端或C端以保其活性;长链多肽可在内部引入FRET(荧光共振能量转移)对,用于探测蛋白质间相互作用。
3.2FRET技术的应用
FRET技术是通过供体荧光团与受体荧光团之间的能量转移来研究分子间的相互作用。FRET效率与供体和受体之间的距离的六次方成反比,因此可以精确监测蛋白质间的相互作用、酶活性以及分子动态变化。
3.3体外与体内成像
体外成像:利用共焦显微镜或荧光显微镜,通过荧光标记多肽高效研究细胞内分子靶标及生物学过程。
体内成像:荧光标记多肽可在活体内实时成像,用于血管造影、肿瘤成像等,助力精准医疗与个性化治疗方案制定。
4.多肽荧光修饰
名称 | 激发波长(nm) | 发射波长(nm) | 发射颜色 |
7-甲氧基香豆素-4-乙酸 | 328 | 393 | 蓝色 |
FITC-Ahx | 494 | 521 | 绿色 |
FAM | 495 | 520 | 绿色 |
Cy3 | 555 | 570 | 黄色 |
5-羧基四甲基罗丹明(TMR) | 542 | 568 | 橙色 |
Cy5 | 646 | 662 | 红色 |
Cy5.5 | 673 | 707 | 近红外 |
Cy7 | 750 | 773 | 近红外 |
5.FRET对
供体名称 | 激发波长 | 发射波长 | 受体名称 | 激发波长 | 发射波长 |
Cy2 | 490 | 510 | Cy3 | 555 | 570 |
FITC | 494 | 521 | TRITC | 557 | 576 |
FAM | 495 | 520 | Cy3 | 555 | 570 |
FAM | 495 | 520 | 德克萨斯红 | 589 | 615 |
FAM | 495 | 520 | Cy5 | 646 | 662 |
Cy3 | 555 | 570 | Cy5 | 646 | 662 |
EDANS | 335 | 493 | DABCYL | 453 | - |
Glu(EDANS)-NH2 | 335 | 493 | DABCYL | 453 | - |
MCA | 328 | 393 | DNP | 348 | - |
Abz | 330 | 420 | DNP | 348 | - |
Abz | 330 | 420 | Tyr (3-NO2) | 360 | - |
6.询价与订购
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