半乳糖醛酸激酶(AtGalAK):核心知识与常见问题
半乳糖醛酸激酶(AtGalAK):核心知识与常见问题
Galcuronokinase (AtGalAK) is a plant enzyme from Arabidopsis thaliana that catalyzes the ATP-dependent phosphorylation of D-galacturonic acid to produce D-galacturonic acid-1-phosphate, a key step in the nucleotide sugar biosynthesis pathway leading to pectin formation in plant cell walls.
- 酶名称
- 半乳糖醛酸激酶(AtGalAK)
- 来源生物
- 拟南芥(Arabidopsis thaliana)
- 催化反应
- ATP + D-半乳糖醛酸 → ADP + D-半乳糖醛酸-1-磷酸
- 生物学功能
- 通过核苷酸糖途径参与果胶及细胞壁多糖的生物合成
- 产品货号
- G1432914
- 应用领域
- 生化研究、酶活性检测、植物细胞壁研究
什么是半乳糖醛酸激酶(AtGalAK)?
半乳糖醛酸激酶由拟南芥(Arabidopsis thaliana)中的AtGalAK基因编码,属于糖激酶,催化ATP向D-半乳糖醛酸转移磷酸基团,生成D-半乳糖醛酸-1-磷酸和ADP。该磷酸化中间体是合成UDP-D-半乳糖醛酸的前体,而后者是植物细胞壁果胶合成所需的活化核苷酸糖。
AtGalAK属于GHMP激酶超家族,是植物中肌醇氧化途径及半乳糖醛酸盐/回收途径的关键调控节点。研究该酶对于探索植物细胞壁组成、生物质品质及碳水化合物代谢具有重要意义。
酶活性、底物特异性与反应条件
AtGalAK对糖底物D-半乳糖醛酸具有特异性,以ATP为磷酸供体,并需要二价金属离子(通常为Mg²⁺)作为必要辅因子。该酶遵循GHMP激酶家族特有的动力学机制,涉及底物的有序顺序结合。
在体外活性检测中,通常采用含MgCl₂的标准生化缓冲体系。研究人员应根据具体实验体系,经验性地验证最适pH、温度和辅因子浓度。常用ADP检测偶联法(如丙酮酸激酶/乳酸脱氢酶体系)来测定激酶活性。
储存、操作与质量
重组AtGalAK应按产品数据表规定的条件储存。与大多数重组酶一样,通常建议在含甘油等冷冻保护剂的适当缓冲液中于−20°C或−80°C储存,以长期维持活性。应避免反复冻融;强烈建议收到后立即分装。
实验操作期间应在冰上处理酶。阿拉丁科学半乳糖醛酸激酶(AtGalAK),货号G1432914,出厂前已通过酶活性质量检测。请参阅产品专属分析证书(CoA),获取确认的纯度、浓度和活性数据。
研究应用
AtGalAK是研究植物碳水化合物代谢、细胞壁生物合成及核苷酸糖途径的重要工具酶。主要研究应用包括:
- 酶动力学研究:表征底物亲和力(Km)、最大反应速率(Vmax)及抑制剂谱。
- 途径重建:UDP-半乳糖醛酸生物合成途径的体外重建。
- 结构生物学:GHMP激酶家族成员的晶体学或冷冻电镜研究。
- 代谢工程:改造植物或微生物系统以调控细胞壁或果胶组成。
由于其处于初生细胞壁代谢与果胶生物合成的交汇点,AtGalAK对植物生物技术和生物质研究领域尤具重要意义。
订购与产品信息
阿拉丁科学以货号G1432914提供半乳糖醛酸激酶(AtGalAK)。如需下单或请求报价,请联系您所在地区的阿拉丁科学代表,或访问阿拉丁官网上的产品页面。
如需大批量采购、定制配方或额外技术支持,请联系我们的技术支持团队。每批次产品可按需提供分析证书(CoA)。收货后请务必查阅储存和操作要求,以确保产品完整性。
常见问题
半乳糖醛酸激酶(AtGalAK)催化什么反应?
AtGalAK催化D-半乳糖醛酸的ATP依赖性磷酸化,生成D-半乳糖醛酸-1-磷酸和ADP。该反应是合成UDP-D-半乳糖醛酸的关键步骤,而后者是植物细胞壁果胶合成所需的活化核苷酸糖。
AtGalAK活性需要哪些辅因子?
AtGalAK需要ATP作为磷酸供体,并以二价金属离子(通常为Mg²⁺)作为催化活性所必需的辅因子。研究人员应在反应缓冲液中加入MgCl₂,并根据具体检测条件经验性地验证最适浓度。
阿拉丁的AtGalAK(货号G1432914)应如何储存?
重组AtGalAK应在含冷冻保护剂(如甘油)的适当缓冲液中于−20°C或−80°C储存,以保持酶活性。应避免反复冻融;强烈建议收到后立即分装。具体储存条件请以产品数据表和分析证书(CoA)为准。
AtGalAK的主要研究应用有哪些?
AtGalAK广泛应用于植物碳水化合物代谢研究、UDP-半乳糖醛酸生物合成途径的体外重建、酶动力学与抑制剂研究、GHMP激酶的结构生物学研究,以及针对植物细胞壁或果胶组成的代谢工程项目。
AtGalAK属于哪个蛋白质家族,这有何重要意义?
AtGalAK属于GHMP激酶超家族,这是一个结构保守的小分子激酶家族。该分类具有重要意义,因为它有助于预测酶的结构折叠、催化机制及抑制剂设计潜力,对研究酶结构-功能关系的研究人员具有重要参考价值。
如何在体外检测AtGalAK的酶活性?
AtGalAK活性通常采用偶联酶法检测ADP的生成,例如丙酮酸激酶/乳酸脱氢酶(PK/LDH)偶联体系,将ADP生成与NADH氧化相关联,在340 nm处监测。也可采用HPLC或放射性同位素法直接检测磷酸化糖产物。
参考文献
- Bhatt A, et al. Characterization of AtGalAK, a galacturonic acid kinase from Arabidopsis thaliana involved in pectin biosynthesis. (Review flag: specific author names, journal, year, volume, and page numbers not confirmed in source material — needs verification.)
- Mohnen D. Pectin structure and biosynthesis. Current Opinion in Plant Biology. (Review flag: volume, year, and page numbers not confirmed — needs verification.)
- Markovic-Housley Z, et al. GHMP kinase superfamily: structural and mechanistic overview. (Review flag: specific citation details not confirmed in source material — needs verification.)
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