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如何选择流式抗体?
如何选择流式抗体?
高质量、可靠的荧光抗体,是顺利完成流式检测及其相关数据分析的保障,尤其是基于荧光补偿、对分辨率要求较高的多色流式检测。如何选择优质的荧光抗体进行流式细胞术呢?以下是一些关键因素。
三大要素
1. 常用克隆编号
对于特定的细胞表面抗原CD家族蛋白,通常会有多种不同克隆号的单抗。流式细胞实验中使用的克隆号越常见,实验获得成功的几率也大。
2. 高染色指数
高染色指数有利于阳性和阴性细胞群的分离,特别是检测的目的蛋白表达量低的情况下。
3. 低背景结合
虽然通常使用同型对照或者抗原保守区阻断剂(Fc Blocking Reagent)可以降低背景,但荧光染料与抗体的偶联效果不佳会明显加重背景结合。降低背景使得界定阳性和阴性细胞更加容易。
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