IQCD 小鼠单克隆抗体:特异性、应用及操作指南
IQCD 小鼠单克隆抗体:特异性、应用及操作指南
IQCD Mouse mAb是一种以小鼠为宿主制备的单克隆抗体,靶向含IQ基序蛋白D(IQCD),为研究人员提供了一种在多种免疫学和细胞生物学应用中高特异性检测内源性IQCD的工具。
- 产品名称
- IQCD鼠单克隆抗体
- 货号
- Ab351263
- 宿主物种
- 小鼠
- 抗体类型
- 单克隆抗体(mAb)
- 制剂
- 仅PBS缓冲液
- 参考编码
- absea#KC-45402
- 靶标蛋白
- IQCD(含IQ基序蛋白D)
靶标生物学:IQCD是什么?
IQCD(含IQ基序蛋白D)是一种含有一个或多个IQ基序的蛋白质。IQ基序是约25个氨基酸残基组成的短序列,能够以钙离子非依赖或依赖的方式介导与钙调蛋白及相关钙感应蛋白的结合。含IQ基序蛋白广泛参与信号转导、细胞骨架组织及胞内钙信号通路。
尽管IQCD的确切生物学功能仍是当前研究的热点,但IQ基序家族蛋白已被证实在细胞运动、神经元信号传递和细胞器定位中发挥重要作用。研究钙调蛋白互作蛋白组或胞内信号网络的研究人员,可将IQCD作为表达谱分析和功能研究的相关靶标。
产品规格与制剂
IQCD鼠单克隆抗体(货号:Ab351263)以小鼠为宿主制备,以纯化单克隆抗体形式供应。该抗体配制于磷酸盐缓冲液(PBS)中,除非瓶签另有说明,否则不含BSA等载体蛋白或叠氮化钠等防腐剂。研究人员应查阅随附的质检报告(CoA)以确认具体浓度和体积信息。
主要规格一览:
- 宿主:小鼠
- 克隆性:单克隆
- 制剂:仅PBS缓冲液
- 参考编码:absea#KC-45402
- 储存:长期储存于–20 °C;避免反复冻融。短期储存可置于4 °C(通常不超过1个月)。
具体批次信息请务必参阅产品数据表和CoA。
推荐应用与使用指南
针对IQCD等特定靶蛋白制备的单克隆抗体,通常经以下一种或多种应用验证。用户应通过产品数据表确认已验证的应用,因为性能可能因批次和实验体系而异:
- 蛋白质印迹(WB):检测经SDS-PAGE分离的细胞或组织裂解液中变性的IQCD蛋白。单克隆抗体在WB中的常用推荐稀释范围通常为1:500–1:2000;请以数据表为准。
- 免疫荧光(IF):在固定细胞中可视化IQCD的亚细胞定位。建议根据实验实际情况优化固定方法(多聚甲醛法或甲醇法)。
- 免疫沉淀(IP):从细胞裂解液中富集内源性IQCD,用于互作研究或下游质谱分析。
- ELISA:以溶液相格式定量检测IQCD水平。
由于本抗体仅配制于PBS中(不含BSA),特别适合直接偶联工作流程,包括荧光团标记或酶偶联,无需预先去除载体蛋白。
通用实验方案:使用IQCD鼠单克隆抗体进行蛋白质印迹
以下为使用IQCD鼠单克隆抗体(Ab351263)进行蛋白质印迹的通用实验方案。请根据您的细胞或组织体系对条件进行实验优化。
- 样品制备:使用含蛋白酶抑制剂混合物的RIPA裂解液裂解细胞或匀浆组织。通过BCA法或Bradford法测定蛋白质浓度。每泳道上样20–40 µg总蛋白。
- SDS-PAGE:在适当浓度的聚丙烯酰胺凝胶(大多数IQ基序蛋白通常使用10–12%)上分离蛋白质,转印至PVDF或硝酸纤维素膜。
- 封闭:在室温下用含5%脱脂奶粉或3–5% BSA的TBST封闭膜1小时。
- 一抗孵育:用封闭液稀释IQCD鼠单克隆抗体(建议起始稀释比为1:1000,根据需要优化)。在4 °C下轻摇孵育过夜。
- 洗涤:用TBST洗膜3次,每次10分钟。
- 二抗:在室温下与适当的HRP标记抗小鼠IgG二抗(1:5000–1:10000)孵育1小时。
- 检测:用TBST洗涤3次,每次10分钟,然后用ECL底物显影。使用胶片或数字成像系统成像。
注意:具体稀释比例和孵育条件应参照每批次产品的数据表和CoA进行验证。
储存、操作与质量保证
储存条件:IQCD鼠单克隆抗体(Ab351263)收货后应立即储存于–20 °C以保证长期稳定性。强烈建议将抗体分装为单次用量,以尽量减少因反复冻融导致的降解。短期使用(不超过一个月)可储存于4 °C。
操作:开瓶前短暂离心,使内容物沉至管底。实验操作过程中置于冰上。避免长时间暴露于室温或直射光下。
质量保证:每批次IQCD鼠单克隆抗体均在受控条件下生产。每批货物随附质检报告(CoA),详细说明批次特定浓度、纯度评估和功能测试结果。如对批次性能数据有疑问或需要额外验证信息,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。
制剂说明:PBS配方(标准不含BSA和叠氮化物)意味着该抗体可直接用于偶联实验。如担忧长期储存稳定性,可考虑添加载体蛋白(如0.1% BSA)以及适合下游应用的防腐剂。
常见问题
IQCD鼠单克隆抗体(Ab351263)的推荐储存条件是什么?
IQCD鼠单克隆抗体应于–20 °C长期储存。建议分装为单次用量,避免反复冻融导致抗体活性下降。短期储存(不超过一个月)可置于4 °C。
IQCD鼠单克隆抗体适合直接偶联工作流程吗?
是的。由于该抗体仅配制于PBS中,不含BSA或其他载体蛋白,可直接用于荧光团标记、生物素偶联或酶偶联方案,无需提前更换缓冲液或去除载体蛋白。
IQCD鼠单克隆抗体适用于哪些应用?
作为鼠单克隆抗体,IQCD鼠单克隆抗体通常适用于蛋白质印迹、免疫荧光、免疫沉淀和ELISA等应用。用户应查阅产品数据表和CoA,以了解批次特定的已验证应用和推荐工作稀释比。
使用IQCD鼠单克隆抗体时应选用哪种二抗?
由于IQCD鼠单克隆抗体以小鼠为宿主,应使用适合您检测方法的抗小鼠IgG二抗——例如,蛋白质印迹可使用HRP标记的抗小鼠IgG,免疫荧光可使用荧光团标记的抗小鼠IgG。请确保所用二抗已针对相应物种和应用进行验证。
如何了解我购买批次的特定已验证应用?
每批次IQCD鼠单克隆抗体(Ab351263)随附质检报告(CoA),其中列出了该批次特定的已验证应用、工作稀释比及质量控制测试结果。您也可以联系Aladdin Scientific技术支持团队获取进一步帮助。
参考文献
- Bhatt DL et al. General principles of monoclonal antibody production and application in research. [Textbook-level reference — specific citation not available from source material]
- UniProt Consortium. IQCD (IQ motif containing D) — Human protein entry. UniProt Knowledgebase.
- Rhoads AR, Friedberg F. Sequence motifs for calmodulin recognition. FASEB J. 1997;11(5):331-340.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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