MGMT 小鼠单克隆抗体:检测与研究应用
MGMT 小鼠单克隆抗体:检测与研究应用
MGMT Mouse mAb是一种在小鼠中制备的单克隆抗体,专门用于特异性检测O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT),该酶是一种关键的DNA修复酶,与多种癌症类型中的化疗耐药性及表观遗传调控密切相关。
- 产品编号
- Ab351302
- 宿主物种
- 小鼠
- 抗体类型
- 单克隆抗体(mAb)
- 制剂
- 仅PBS缓冲液
- 靶蛋白
- MGMT(O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶)
- 参考编号
- absea#KC-2555
什么是MGMT?它在研究中为何重要?
O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)是一种保守的DNA修复蛋白,能够去除鸟嘌呤O6位上的烷基加合物。这类损伤通常由烷化类化疗药物(如替莫唑胺和卡莫司汀)引入。MGMT通过单步自杀式反应逆转此类损伤,从而保护基因组完整性,但同时也赋予肿瘤细胞对烷化剂化疗方案的耐药性。
在肿瘤学研究中,MGMT被广泛研究,因为其启动子在胶质母细胞瘤、结直肠癌等多种肿瘤中频繁发生甲基化并被沉默。启动子甲基化导致MGMT蛋白表达降低,使肿瘤细胞对烷化剂更为敏感,并可作为预测治疗反应的生物标志物。因此,通过免疫学方法准确检测MGMT蛋白水平是基础研究和转化癌症研究的重要基础。
产品概述:MGMT鼠单克隆抗体(Ab351302)
Aladdin Scientific以目录编号Ab351302提供MGMT鼠单克隆抗体。该单克隆抗体在小鼠中制备,以磷酸盐缓冲液(PBS)为制剂,不含额外的载体蛋白或防腐剂,适合需要无载体蛋白格式以进行偶联或特定检测方法开发的研究人员。
该抗体参考编号为absea#KC-2555,仅供研究使用。单克隆抗体的特性确保了批次间的一致性及对MGMT靶点的高特异性,降低与其他DNA修复蛋白发生交叉反应的风险。研究人员应在其具体实验体系中验证该抗体的性能,因为其效果可能因物种、组织类型和应用方式不同而存在差异。
典型研究应用
针对MGMT的鼠单克隆抗体通常应用于多种免疫学及分子生物学技术,典型应用包括:
- 蛋白质印迹(WB):检测细胞裂解物或组织匀浆中的MGMT蛋白,评估不同实验条件下的蛋白表达水平。
- 免疫组织化学(IHC):在福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织切片中定位MGMT蛋白,尤其适用于评估肿瘤活检组织中的蛋白表达。
- 免疫荧光(IF):在培养细胞中可视化MGMT的亚细胞定位(通常为细胞核定位)。
- 免疫沉淀(IP):分离MGMT蛋白复合物,用于下游蛋白质组学或相互作用研究。
- 酶联免疫吸附试验(ELISA):定量测定生物样品中MGMT蛋白的浓度。
研究人员应查阅产品说明书或联系Aladdin Scientific技术支持,确认Ab351302已验证的具体应用范围,因为已验证的应用可能因批次不同而有所差异。
储存、操作及质量注意事项
单克隆抗体的正确储存和操作对于长期维持其活性和特异性至关重要。PBS制剂抗体的通用最佳操作规范包括:
- 短期使用(一个月内)可在4°C储存;如需长期保存,应分装后于-20°C或-80°C储存。
- 避免反复冻融,因为冻融会使抗体变性并降低其性能。强烈建议使用一次性分装。
- 避免长时间光照,尤其是在下游制备荧光偶联物时。
- 若发现沉淀,开封前应短暂离心。
由于Ab351302仅以PBS为制剂(不含BSA或甘油等稳定剂),如需长期储存,研究人员应考虑添加载体蛋白或冷冻保护剂。请始终参阅产品随附的官方说明书,了解特定批次的储存条件和有效期信息。
订购与技术支持
MGMT鼠单克隆抗体可通过Aladdin Scientific以SKU Ab351302订购。如需下单,请访问Aladdin Scientific官方网站,通过产品名称或目录编号搜索。大批量及定制制剂可能按需提供——请联系Aladdin Scientific销售团队获取报价及供货信息。
如有关于抗体验证、推荐稀释比例、配套二抗或检测性能故障排除等技术问题,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。提供目标物种、样品类型及预期应用等详细信息,将有助于获得最具针对性的指导建议。
常见问题
MGMT鼠单克隆抗体在研究中有哪些用途?
MGMT鼠单克隆抗体(Ab351302)用于检测和研究O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶,该酶是化疗耐药性研究和癌症生物学的核心酶。根据特定批次的已验证应用,可用于蛋白质印迹、免疫组织化学、免疫荧光和ELISA等技术。
MGMT抗体仅PBS制剂对实验有何重要意义?
仅PBS制剂意味着抗体不含载体蛋白(如BSA)或防腐剂(如叠氮化钠),这对于将抗体偶联至荧光团、酶或磁珠,或在对上述添加剂敏感的检测系统中使用抗体具有明显优势。但如需在-20°C或更低温度下保存分装样品,研究人员应添加冷冻保护剂。
如何在实验室中验证MGMT鼠单克隆抗体?
验证应包括:在已知表达MGMT的阳性对照样品中,以您的具体应用方式(如WB或IHC)测试该抗体;同时设置阴性对照,如MGMT基因敲除细胞系或同型对照抗体。在开展大规模实验前,还建议进行滴度实验以确定最佳工作浓度。
MGMT鼠单克隆抗体是否适用于人体组织样品?
许多抗MGMT单克隆抗体是针对保守表位制备的,对人源MGMT蛋白具有交叉反应性;但Ab351302的物种反应性应以产品说明书为准。如说明书中未提供物种反应性信息,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。
参考文献
- Pegg AE. Repair of O(6)-alkylguanine by alkyltransferases. Mutat Res. 2000;462(2-3):83-100.
- Hegi ME, et al. MGMT gene silencing and benefit from temozolomide in glioblastoma. N Engl J Med. 2005;352(10):997-1003.
- Kaina B, et al. MGMT: key node in the battle against genotoxicity, carcinogenicity and apoptosis induced by alkylating agents. DNA Repair (Amst). 2007;6(8):1079-1099.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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