MOTS-c(人源)醋酸盐:操作与复溶实验方案
MOTS-c(人源)醋酸盐:操作与复溶实验方案
MOTS-c(human) acetate is a mitochondria-derived peptide reagent supplied as a lyophilized acetate salt, requiring careful reconstitution and storage to preserve biological activity in metabolic and mitochondrial research applications.
- 产品名称
- MOTS-c(人源)醋酸盐
- 肽序列
- H-Met-Arg-Trp-Gln-Gly-Met-Gly-Tyr-Ile-Phe-Thr-Pro-Arg-Lys-Leu-Arg-OH
- 来源
- 人源线粒体衍生肽(MDP)
- 盐型
- 醋酸盐
- 物理形态
- 冻干粉末
- 储存建议
- 于-20°C或以下避光防潮保存,避免反复冻融
- 应用
- 代谢生物学、线粒体研究、细胞实验及肽类药理学
所需材料
开始操作前,请确保以下材料准备齐全:
- MOTS-c(人源)醋酸盐冻干粉(货号:M658801)
- 无菌无核酸酶水或磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4)用于水相复溶
- 无菌低蛋白结合微量离心管(1.5 mL)
- 已校准的微量移液器及无菌吸头
- 分析天平(如需重量法验证)
- 涡旋混合仪或温和旋转混合仪
- 冰桶或冷却架
- 适合-80°C保存的分装储存管
- 个人防护装备(PPE):丁腈手套、实验服、护目镜
复溶操作步骤
按以下步骤复溶MOTS-c(人源)醋酸盐,用于研究实验:
- 回温至室温:从-20°C取出样品瓶,在打开前于室温(约15–25°C)放置10–15分钟,以减少瓶内冷凝水的产生。
- 离心样品瓶:短暂低速离心密封瓶(如低速离心5–10秒),使运输过程中可能迁移至瓶盖或瓶壁的冻干物集中至瓶底。
- 准备复溶溶剂:大多数应用推荐使用无菌水或PBS(pH 7.4)作为主要复溶溶剂。若溶解性较差,可加入少量DMSO或稀乙酸(≤总体积的10%)作为助溶剂,再用水相缓冲液稀释至终体积。
- 缓慢加入溶剂:将计算好体积的溶剂沿瓶壁缓慢加入(勿直接滴于冻干饼上),以获得所需储液浓度(通常为1–5 mg/mL)。避免将移液器直接对准多肽进行剧烈操作。
- 轻柔混合:轻轻涡旋或滚动样品瓶30–60秒,直至多肽完全溶解。勿使用超声波处理,以免导致多肽降解。
- 目视检查:确认溶液澄清透明、无可见颗粒。若仍有颗粒,以1,000–2,000 × g轻轻离心2–3分钟后取上清液使用。
- 分装并储存:将复溶后的储液分装至低蛋白结合管中,每管为单次用量,避免反复冻融。分装管于-80°C长期保存,或于4°C短期保存(不超过1周)。
储存与稳定性指南
妥善储存对维持MOTS-c(人源)醋酸盐的生物活性和化学完整性至关重要:
- 冻干粉:于-20°C或以下避光防潮保存。在此条件下,冻干多肽预期可长期稳定保存(具体有效期请参阅产品质量检验报告)。
- 复溶溶液:工作液应于-80°C长期保存。避免将复溶多肽于4°C保存超过7天,否则多肽完整性可能受损。
- 冻融循环:尽量减少冻融次数,以防止聚集和活性损失。复溶时即行分装为单次用量。
- 防潮防光:多肽具有吸湿性;使用后务必立即用Parafilm封口膜或同类产品重新密封样品瓶,并及时放回-20°C保存。
注:本产品的具体稳定性数据应以每批次所附质量检验报告(CoA)为准。
安全与操作注意事项
尽管MOTS-c(人源)醋酸盐属于研究级肽类试剂,依据标准实验室法规不被列为危险化学品,但仍须遵守标准实验室安全操作规程:
- 始终佩戴适当的个人防护装备:丁腈手套、实验服及安全护目镜。
- 在通风良好的区域或层流罩下操作冻干粉,避免吸入细微颗粒物。
- 本产品仅供研究使用,不用于人体或兽医治疗用途。
- 按照机构及当地法规要求处置所有废弃物(已用样品瓶、吸头、离心管等)。
- 若发生皮肤或眼睛接触,立即用大量清水冲洗;若刺激症状持续,应立即就医。
故障排除
如在复溶或实验使用过程中遇到问题,请参阅下表:
| 问题 | 可能原因 | 建议措施 |
|---|---|---|
| 多肽无法完全溶解 | 溶剂不适合或混合不充分 | 尝试加入少量稀乙酸(0.1%水溶液)或DMSO作为助溶剂;短暂温和加热至37°C;勿使用超声波处理 |
| 溶液出现浑浊 | 多肽聚集或缓冲液不相容 | 以2,000 × g离心5分钟,取上清液;考虑调整缓冲液pH或离子强度 |
| 实验中活性损失 | 因冻融或储存不当导致降解 | 重新分装新鲜样品;确认储存条件;减少冻融次数;验证复溶溶剂兼容性 |
| 离心后仍有可见颗粒 | 工作浓度下多肽沉淀 | 降低储液浓度;使用新鲜无菌溶剂;如有必要,过0.22 µm低蛋白结合滤膜 |
常见问题
MOTS-c(人源)醋酸盐推荐使用何种溶剂复溶?
大多数研究应用推荐使用无菌水或磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4)。若多肽溶解性较差,可先用少量DMSO或0.1%乙酸水溶液作助溶剂,再用所选水相缓冲液稀释至终体积。
MOTS-c(人源)醋酸盐复溶后应如何储存?
复溶后的溶液应分装为单次用量,于-80°C长期保存。短期保存可置于4°C,不超过约一周。应避免反复冻融,以防止多肽聚集及活性损失。
MOTS-c(人源)醋酸盐的氨基酸序列是什么?
MOTS-c(人源)醋酸盐的肽序列为:H-Met-Arg-Trp-Gln-Gly-Met-Gly-Tyr-Ile-Phe-Thr-Pro-Arg-Lys-Leu-Arg-OH。该16个氨基酸序列来源于人线粒体12S rRNA开放阅读框。
MOTS-c(人源)醋酸盐是否可用于体内研究?
MOTS-c(人源)醋酸盐(货号:M658801)作为研究级试剂供应,仅供实验室研究使用,未经批准或验证用于治疗、诊断或临床用途。拟将该多肽用于动物实验的研究人员应咨询所在机构相关规定,并在使用前向阿拉丁科学确认适当的纯度规格。
MOTS-c是什么?为何受到广泛研究?
MOTS-c是一种由线粒体基因组(12S rRNA)编码的线粒体衍生肽(MDP)。研究表明其参与调节代谢稳态、胰岛素敏感性、运动生理及细胞应激反应。由于MOTS-c与衰老、肥胖及代谢疾病的潜在相关性,其在代谢与线粒体生物学研究中作为工具肽的价值日益凸显。
参考文献
- Lee C, Zeng J, Drew BG, et al. The mitochondrial-derived peptide MOTS-c promotes metabolic homeostasis and reduces obesity and insulin resistance. Cell Metabolism. 2015;21(3):443-454. doi:10.1016/j.cmet.2015.02.009
- Kim SJ, Mehta HH, Wan J, et al. Mitochondrial peptides modulate mitochondrial function during cellular senescence. Aging (Albany NY). 2018;10(6):1239-1256.
- Aladdin Scientific. Product Information: MOTS-c(human) acetate, SKU M658801. Aladdin Scientific Inc.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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