Mueller-hinton(MH)琼脂可应用于：

（1）抗生素敏感性测试；（2）分离和维持奈瑟菌和莫拉氏菌。 MH琼脂平板，药物敏感试验专用，本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导

操作方法

脱水培养基制备法

原理

Mueller-Hinton琼脂由哈佛大学的John Howard Mueller和Jane Hinton共同开发，作为淋球菌和脑膜炎球菌的培养物，于1941年发表该方法。它通常包含：牛肉提取物：2.0克；酪蛋白的酸水解产物：17.5克；淀粉：1.5克；琼脂：17.0克。

材料与仪器

牛肉提取物
酪蛋白的酸水解产物 淀粉 琼脂 纯净水
培养皿

步骤

1.将38克培养基（或上面列出的组分）悬浮在1升纯净水中。

2.彻底混合。

3.经常搅拌加热并煮沸1分钟以完全溶解组分。

4.在121℃下高压灭菌15分钟。

5.冷却至45°C

6.将冷却的Mueller Hinton Agar倒入水平的水平表面上的无菌培养皿中，以获得均匀的深度。

（注意：必须将板倾倒至4毫米的深度（对于100毫米板，大约25毫升液体琼脂，对于150毫米板，大约60毫升液体琼脂，但在任何情况下，测量深度为4毫米）。太浅的平板会产生错误的敏感结果，因为抗微生物化合物将比它应该进一步扩散，产生更大的抑制区。相反，浇注到> 4 mm深度的板将导致抗假结果。）

7.在室温下固化。

8.检查制备的Mueller Hinton琼脂，确保最终pH值在25°C时为7.3±1。

（注意：如果pH值<7.2，某些药物似乎会失去效力（氨基糖苷类，喹诺酮类，大环内酯类），而其他药物似乎有过量活性（四环素）。如果pH> 7.4，则可能发生相反的结果。）

9.准备好的介质可以在4到8°C的温度下储存。Mueller-Hinton琼脂从制备之日起约70天稳定。

注意事项

1.Mueller Hinton琼脂应至少每周用已知的生物菌株进行测试，以验证培养基和培养基是否按预期工作。

2.Mueller Hinton琼脂培养基中添加5％羊血，可以用于测定抗菌药物的敏感性（如肺炎链球菌，脑膜炎奈瑟菌）。

3.当对链球菌属物种进行药敏试验时，也可加入5％羊血和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。这种类型也常用于弯曲杆菌的药敏试验。

常见问题

Mueller-hinton（MH）琼脂非常适合抗生素使用。首先，它是一种非选择性的非差别媒介。这意味着几乎所有镀在其上的生物都会生长。另外，它含有淀粉。已知淀粉吸收细菌释放的毒素，因此它们不会干扰抗生素。其次，它是一种松散的琼脂。与大多数其他平板相比，这允许抗生素更好地扩散。更好的扩散导致更真实的抑制区。

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