NFAT5 小鼠单克隆抗体:科研用途常见问题解答
NFAT5 小鼠单克隆抗体:科研用途常见问题解答
NFAT5 Mouse mAb是一种在小鼠中制备的单克隆抗体,专门用于检测NFAT5——一种对细胞适应高渗透压应激至关重要的渗透压响应性转录因子。
- 产品名称
- NFAT5鼠单克隆抗体
- 货号
- Ab349695
- 抗体类型
- 单克隆抗体,小鼠来源
- 靶蛋白
- NFAT5(活化T细胞核因子5)
- 生物学意义
- NFAT5调控渗透压应激下的基因表达,与免疫功能、肾脏生理及肿瘤生物学密切相关
- 供应商参考编号
- absea#KC-641
NFAT5是什么?为何重要?
NFAT5(活化T细胞核因子5),又称TonEBP(渗透压响应性增强子结合蛋白),是属于Rel同源结构域超家族的转录因子。与其他受钙调磷酸酶介导去磷酸化调控的NFAT家族成员不同,NFAT5独特地被高渗应激所激活。在高渗条件下,NFAT5转位至细胞核,驱动编码渗透保护蛋白的基因表达,包括参与有机渗透物积累和热休克应答的基因。
除渗透调节外,NFAT5还在T细胞活化、巨噬细胞功能、肿瘤进展及胚胎发育中发挥重要作用。其广泛的生物学相关性使其成为肾脏病学、免疫学和肿瘤学的重要研究靶标。
NFAT5鼠单克隆抗体:核心产品信息
Aladdin Scientific的NFAT5鼠单克隆抗体(货号:Ab349695)是在小鼠中制备的单克隆抗体,靶向NFAT5蛋白,对应absea参考编号KC-641。单克隆抗体具有高特异性和良好的批间一致性,是定量及可重复实验的优选试剂。
关于物种交叉反应性、克隆号、免疫原序列、同种型、偶联状态及经过验证的应用等详细信息,请查阅Aladdin Scientific产品页面上的产品数据表,或联系我们的技术支持团队。储存条件、浓度及体积信息见产品标签及随附的质量检验证书。
推荐应用与使用指南
靶向NFAT5的单克隆抗体通常用于免疫印迹(WB)、免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫沉淀(IP)及流式细胞术(FC)等技术。Ab349695在每种应用中的适用性应以官方数据表中列明的经验证应用为准,因为性能可能因技术和样品类型而异。
在设计实验时,研究人员应设置适当的阳性对照(如已知可上调NFAT5的高渗应激处理细胞的裂解液)和阴性对照(如同型对照抗体或NFAT5敲除细胞裂解液)。强烈建议对一抗浓度进行梯度稀释优化,以获得最佳信噪比。
储存、操作与稳定性
单克隆抗体通常对反复冻融敏感,可能导致聚集和活性丧失。最佳实践包括:首次解冻后将抗体分装为单次使用量;按数据表规定的温度储存(长期储存通常为–20 °C,短期储存为4 °C);如抗体有荧光标记,应避免长时间暴露于光照。
若抗体溶液出现浑浊或沉淀,请先离心澄清后再使用,否则聚集物可能导致高背景或结果不一致。请务必查阅Ab349695产品专属数据表,获取确切的储存及稳定性建议。
常见问题排查
背景过高:提高封闭严格性(例如,磷酸化蛋白检测时使用5% BSA代替脱脂奶粉)、优化一抗稀释比例,或延长洗涤步骤。确保二抗与样品物种无交叉反应。
无信号或信号弱:确认在所选条件下目标细胞或组织模型中确实表达NFAT5——可考虑通过高渗应激(如NaCl或山梨醇处理)诱导表达。检查抗体批次的有效性,确认二抗配对正确,并确保IHC应用中抗原修复充分。
非特异性条带(免疫印迹):使用经验证的阳性对照裂解液,降低一抗浓度,并确认样品制备过程未导致靶蛋白降解。若标准排查步骤无法解决问题,建议联系Aladdin Scientific技术支持团队。
常见问题
NFAT5鼠单克隆抗体(Ab349695)经过验证的应用有哪些?
Ab349695经过验证的具体应用详见产品数据表。通常情况下,NFAT5单克隆抗体可用于免疫印迹、免疫荧光、免疫组化、免疫沉淀和流式细胞术。请查阅Aladdin Scientific官方产品页面或联系技术支持获取经确认的应用列表。
NFAT5鼠单克隆抗体(Ab349695)能识别哪些物种?
Ab349695的物种反应性详见产品数据表。研究人员在使用前应确认该抗体已针对目标物种进行验证,因为并非所有物种均保证交叉反应性。如需了解特定模式生物的反应性,请联系Aladdin Scientific技术支持。
如何储存NFAT5鼠单克隆抗体以维持其活性?
单克隆抗体通常应在–20 °C长期储存,短期使用时存放于4 °C,并通过分装为单次使用量来避免反复冻融。请务必参照Ab349695产品标签和数据表上的具体储存说明,以制造商指导为准。
使用NFAT5鼠单克隆抗体时,应使用何种阳性对照?
适合的阳性对照是已知表达NFAT5的细胞裂解液,尤其是经高渗应激处理(如高浓度NaCl或山梨醇处理)的细胞,这类处理可上调NFAT5表达。NFAT5过表达细胞系或已知NFAT5高表达的组织(如肾髓质)也可作为阳性对照。
NFAT5鼠单克隆抗体可用于免疫沉淀实验吗?
Ab349695是否经过免疫沉淀验证应在产品数据表中确认。若该应用已列为经过验证,可按照针对单克隆抗体优化的标准IP操作规程进行实验。若IP未列入验证应用,请联系Aladdin Scientific技术支持,讨论可行性或替代产品选择。
NFAT5与其他NFAT家族成员有何区别?
NFAT5在NFAT家族中独具特色,因为其激活主要由高渗应激驱动,而非调控NFAT1–4的钙-钙调磷酸酶信号通路。此外,NFAT5缺乏钙调磷酸酶靶向的调控性富丝氨酸结构域,且在静息状态下即呈部分核内定位,这进一步将其与经典NFAT家族成员区分开来。
参考文献
- Burg MB, Ferraris JD, Dmitrieva NI. Cellular response to hyperosmotic stresses. Physiological Reviews. 2007;87(4):1441-1474.
- Lopez-Rodriguez C, Aramburu J, Jin L, Bhatt A, Darieva Z, Bhatt DL, Rao A. Bridging the NFAT and NF-κB families: NFAT5 dimerization regulates cytokine expression in T cells. Nature Immunology. 2001;2(2):149-156.
- Yancey PH. Organic osmolytes as compatible, metabolic and counteracting cytoprotectants in high osmolarity and other stresses. Journal of Experimental Biology. 2005;208(Pt 15):2819-2830.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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