NUDT22 小鼠单克隆抗体实验方案:应用与使用指南
NUDT22 小鼠单克隆抗体实验方案:应用与使用指南
NUDT22 Mouse mAb是一种以小鼠为宿主制备的单克隆抗体,以PBS为储存液,专门用于在多种标准免疫学实验中特异性检测NUDT22蛋白。
- 产品名称
- NUDT22小鼠单克隆抗体
- 货号
- Ab351022
- 宿主物种
- 小鼠
- 抗体类型
- 单克隆抗体(mAb)
- 制剂
- 仅PBS缓冲液
- 靶标蛋白
- NUDT22(Nudix水解酶22)
NUDT22简介及抗体规格
NUDT22(Nudix水解酶22)是Nudix水解酶超家族的成员,该家族酶能催化与其他基团相连的核苷二磷酸的水解反应。NUDT22与核苷酸代谢及细胞稳态维持密切相关。NUDT22小鼠单克隆抗体(货号:Ab351022)以小鼠为宿主制备,配制于磷酸盐缓冲液(PBS)中,不含额外防腐剂或稳定剂。使用前,研究人员应确认缓冲液与下游实验的相容性。
主要规格:
- 宿主:小鼠
- 抗体类型:单克隆抗体
- 制剂:仅PBS缓冲液
- 货号:Ab351022
样品制备
正确的样品制备对于使用NUDT22小鼠单克隆抗体获得可靠结果至关重要。请根据您的实验应用参照以下指南:
- 细胞裂解液:在含蛋白酶抑制剂混合物的RIPA裂解液中,于冰上裂解细胞30分钟。于4°C、12,000 × g离心15分钟,收集上清液,并用BCA法或Bradford法测定蛋白浓度。
- 组织裂解液:在含蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液中匀浆组织,离心后收集上清液,操作同上。
- 固定细胞/组织(用于IHC/ICC):使用标准甲醛固定石蜡包埋(FFPE)或冷冻切片方案。根据需要使用柠檬酸缓冲液(pH 6.0)或EDTA缓冲液(pH 9.0)进行抗原修复。
注意:具体样品制备条件可能需要根据细胞或组织类型及所用实验方法进行优化。
Western Blot推荐实验方案
以下为使用NUDT22小鼠单克隆抗体(Ab351022)进行Western blot的通用方案。具体稀释比例和孵育条件应根据各实验室实际情况进行优化。
- 凝胶电泳:使用适合NUDT22分子量的SDS-PAGE凝胶,每泳道上样20–40 µg总蛋白。
- 转膜:使用湿转或半干转方式将蛋白转移至PVDF或硝酸纤维素膜上。
- 封闭:用含5%脱脂奶粉或5% BSA的TBST于室温封闭膜1小时。
- 一抗孵育:将NUDT22小鼠单克隆抗体按推荐稀释比例(需通过滴定确定)稀释于封闭液中,4°C孵育过夜。
- 洗涤:用TBST洗膜3次,每次10分钟。
- 二抗孵育:使用适当的HRP标记抗小鼠二抗,室温孵育1小时。
- 洗涤:用TBST洗膜3次,每次10分钟。
- 检测:使用ECL底物显色,通过X光胶片或数字成像系统成像。
重要提示:当前产品说明中未提供推荐工作稀释度,用户应进行稀释梯度实验以确定最适抗体浓度。
储存、操作及质量控制
储存:NUDT22小鼠单克隆抗体(Ab351022)应于–20°C长期保存。短期使用(不超过1个月)可在4°C存放。应避免反复冻融,以免降低抗体活性。建议首次使用时进行分装。
操作:该抗体以PBS为制剂,请勿用含叠氮化钠或其他抑制性防腐剂的缓冲液稀释,除非已确认与您的实验相容。开瓶前请短暂离心,使内容物沉于管底。
质量控制:每批次NUDT22小鼠单克隆抗体均应由终端用户在其具体实验体系中进行测试。建议每次实验均设置适当的阳性和阴性对照,以确认抗体特异性和实验有效性。
常见问题
NUDT22小鼠单克隆抗体(Ab351022)的制剂是什么?
NUDT22小鼠单克隆抗体(Ab351022)仅以磷酸盐缓冲液(PBS)为制剂,不含额外防腐剂或载体蛋白。用户应根据具体实验需求确认缓冲液的相容性。
如何储存NUDT22小鼠单克隆抗体以保持最佳活性?
如需长期储存,请将抗体保存于–20°C。若在一个月内频繁使用,可在4°C保存。为保持活性,应避免反复冻融,建议首次使用时进行分装。
使用NUDT22小鼠单克隆抗体时,应使用何种阳性对照?
应使用已知内源性表达NUDT22的细胞系或组织作为阳性对照。当前产品说明中未详细说明具体推荐的阳性对照细胞系,用户可查阅相关文献或联系Aladdin Scientific技术支持获取指导。
NUDT22小鼠单克隆抗体经过哪些应用验证?
当前产品说明未明确Ab351022已验证的实验应用。此类单克隆抗体的常见应用包括Western blot(WB)、免疫组织化学(IHC)和免疫荧光(IF),但用户应针对其目标应用自行验证,并联系Aladdin Scientific获取最新验证数据。
参考文献
- Aladdin Scientific. NUDT22 Mouse mAb, SKU Ab351022. Product datasheet. Aladdin Scientific.
- Mildvan AS, et al. Structures and mechanisms of Nudix hydrolases. Arch Biochem Biophys. 2005;433(1):129-143.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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