正交实验优选丹参酮 ⅡA 的提取实验
正交实验优选丹参酮 ⅡA 的提取实验
丹参酮是丹参中具有橙黄色和橙红色特征的脂溶性二萜类化合物,按其结构的不同可分为丹参酮I、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB、隐丹参酮、二氢丹参酮I、羟基丹参酮、丹参酮甲酯、异丹参酮、异隐丹参酮等 10 多种成分,其中丹参酮ⅡA 是丹参中脂溶性成分的代表,丹参酮ⅡA还具有天然抗氧化作用,大量的研究表明在抗肿瘤、心脑血管疾病、抗菌消炎等方面均有良好的治疗作用。
操作方法
正交法
原理
1. 丹参酮ⅡA (TanshinoneⅡA)来源于为唇形科植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.) 的干燥根及根茎、南欧丹参(Salvia sclarea L.) 根或陇西鼠尾草的根。桔红色针状结晶(EtOAc), mp 209~210 ℃。易溶于乙醇,丙酮,乙醚,苯等有机溶剂,微溶于水。2. 正交实验设计原理正交试验设计(Orthogonal experimental design)是研究多因素多水平的又一种设计方法,它是根据正交性从全面试验中挑选出部分有代表性的点进行试验,这些有代表性的点具备了"均匀分散,齐整可比"的特点,正交试验设计是分式析因设计的主要方法。是一种高效率、快速、经济的实验设计方法。日本著名的统计学家田口玄一将正交试验选择的水平组合列成表格,称为正交表。例如作一个三因素三水平的实验,按全面实验厦门大学医学院药学系-天然药物化学实验讲义要求,须进行33=27种组合的实验,且尚未考虑每一组合的重复数。若按L9(33)正交表安排实验,只需作9次,若按L18(37)正交表则进行18次实验,显然大大减少了工作量。因而正交实验设计在很多领域的研究中已经得到广泛应用。正交表是一整套规则的设计表格,用 L为正交表的代号,n为试验的次数,t为水平数,c为列数,也就是可能安排最多的因素个数。例如L9(34),它表示需作9次实验,最多可观察4个因素,每个因素均为3水平。
材料与仪器
丹参粗粉 步骤 1. 提取方法 分别精密称取丹参粗粉2.5 g, 按正交试验表L9 (33)安排实验,药材浸泡30 min后,超声提取,抽滤收集滤液,量取滤液体积。精确吸取滤液0. 25 ml置与25 ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,微孔滤膜过滤,HPLC测定。 2. 正交设计 根据丹参酮ⅡA的理化性质,选择在提取中三个影响因素,采用三因素水平的正交试验表L9 (33 )设计试验方案,见下表。
水
容量仪 抽滤器 微孔滤膜 HPLC
3. 正交实验数据处理:参照下表处理方法,以纯度和转移率为指标,选择最优提取方法。

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