PDZRN3鼠单克隆抗体:应用、特异性与实验方案
PDZRN3鼠单克隆抗体:应用、特异性与实验方案
PDZRN3 Mouse mAb是一种以小鼠为宿主制备的针对PDZ结构域RING指蛋白3(PDZRN3)的单克隆抗体,以PBS为配方,旨在多种研究应用中实现对PDZRN3的特异性、可靠检测。
- 产品货号
- Ab351027
- 抗体类型
- 单克隆抗体(小鼠)
- 配方
- PBS(磷酸盐缓冲盐水),未注明额外稳定剂
- 靶蛋白
- PDZRN3(PDZ结构域RING指蛋白3)
- 宿主物种
- 小鼠
- 参考目录
- absea#KC-50441
PDZRN3是什么,为何重要?
PDZRN3(PDZ结构域RING指蛋白3)是RING型E3泛素连接酶家族成员,同时含有PDZ蛋白-蛋白相互作用结构域和RING指结构域。这些结构特征使PDZRN3能够参与泛素介导的蛋白质降解,并在特定亚细胞位置搭建信号复合体。
新兴研究将PDZRN3与血管发育、神经分化及Wnt信号调控等关键发育和生理过程相关联。PDZRN3表达失调与异常细胞迁移和形态发生相关,使其成为发育生物学和疾病研究中备受关注的蛋白质。
因此,PDZRN3鼠单克隆抗体(Ab351027)等可靠检测试剂是研究人员表征PDZRN3表达模式、蛋白相互作用及体内外功能角色的重要工具。
产品规格与配方
PDZRN3鼠单克隆抗体由阿拉丁科学以货号Ab351027提供。该抗体以仅PBS(磷酸盐缓冲盐水)为配方,除非产品说明书另有说明,否则不含载体蛋白或防腐剂。研究人员在使用前应查阅官方产品说明书,确认确切浓度、克隆信息及添加剂情况。
需通过产品说明书核实的关键属性包括:
- 抗体浓度:在配制工作稀释液前确认mg/mL浓度。
- 同型:鼠单克隆抗体通常为IgG;确认亚类以选择合适的二抗。
- 储存条件:PBS配方抗体一般在4°C短期保存,或分装后于−20°C长期保存,避免反复冻融。
- 有效期:遵循随瓶提供的批次特定有效期。
注:现有来源资料中未详细说明具体浓度、克隆编号及免疫原序列,请从官方说明书(absea#KC-50441)中确认。
推荐应用与工作稀释比例
PDZRN3单克隆抗体常用于多种免疫学和生化检测。Ab351027的具体验证应用请以官方说明书为准,以下为此类抗体的典型应用:
- 蛋白质印迹(WB):检测经SDS-PAGE分离的细胞或组织裂解物中的PDZRN3蛋白。鼠单克隆抗体的典型起始稀释比例为1:500至1:2000。
- 免疫荧光(IF):在固定细胞或组织切片中可视化PDZRN3定位,典型稀释比例为1:100至1:500。
- 免疫组化(IHC):检测甲醛固定、石蜡包埋(FFPE)组织切片,建议优化抗原修复条件。
- 免疫沉淀(IP):从裂解物中富集PDZRN3及相关蛋白复合体。
重要提示:请根据具体样品类型、物种和检测系统经验性优化稀释比例,并查阅Ab351027产品说明书中的验证应用信息。
样品制备与实验方案指南
PDZRN3鼠单克隆抗体的最佳实验效果依赖于精细的样品制备。以下为常见检测格式的通用指南:
细胞和组织裂解(用于WB和IP)
- 使用补充有蛋白酶抑制剂混合物的适当RIPA或NP-40裂解缓冲液裂解细胞或匀浆组织。
- 于4°C、12,000–14,000 × g离心15分钟澄清裂解液。
- 使用BCA或Bradford法测定蛋白浓度;WB每泳道上样20–50 µg总蛋白。
蛋白质印迹方案(通用)
- 在还原条件下进行SDS-PAGE,转膜至PVDF或硝酸纤维素膜。
- 在室温下用含5%脱脂奶粉或BSA的TBST封闭1小时。
- 按推荐稀释比例加入PDZRN3鼠单克隆抗体,4°C孵育过夜。
- 用TBST洗涤3次,室温孵育HRP标记的抗鼠IgG二抗1小时。
- 使用ECL底物显色,以化学发光成像系统采集信号。
抗体储存与操作
- 收到后短暂离心收集液体,分装以避免反复冻融。
- 工作分装液于4°C保存(1个月内使用);原液分装液于−20°C保存。
- 勿提前稀释抗体。
常见问题排查
研究人员在使用PDZRN3鼠单克隆抗体时可能遇到以下挑战。以下指导基于单克隆抗体使用的通用最佳实践:
| 问题 | 可能原因 | 建议解决方案 |
|---|---|---|
| 未检测到信号 | 抗体稀释比例过高;抗原量不足;转膜效率差 | 降低稀释比例;增加蛋白上样量;用丽春红S染色验证转膜效率 |
| 背景过高 | 封闭不充分;二抗交叉反应;一抗浓度过高 | 延长封闭时间;提高洗涤严格性;提高一抗稀释比例 |
| 多条非特异性条带 | 蛋白酶降解;非特异性结合 | 在裂解缓冲液中添加蛋白酶抑制剂;优化抗体稀释比例;增加洗涤步骤 |
| IHC信号弱 | 抗原修复不充分 | 优化热诱导表位修复(HIER),使用柠檬酸缓冲液(pH 6.0)或EDTA缓冲液(pH 9.0) |
如问题持续存在,请携带批次号和实验详情联系阿拉丁科学技术支持,以获取个性化帮助。
常见问题
PDZRN3鼠单克隆抗体(Ab351027)采用什么配方?
PDZRN3鼠单克隆抗体(Ab351027)仅以PBS(磷酸盐缓冲盐水)为配方。现有产品信息中未注明额外载体蛋白或防腐剂,请查阅官方说明书获取完整配方详情。
如何储存PDZRN3鼠单克隆抗体以保持其活性?
短期使用时,于4°C保存最长一个月。长期储存时,将抗体分装后于−20°C保存以防降解。避免反复冻融,因为这会降低抗体活性。请始终参阅批次特定说明书中的储存建议。
PDZRN3鼠单克隆抗体经过验证适用于哪些物种和细胞类型?
Ab351027的具体反应性信息和经验证的细胞类型在现有来源资料中未有详述。研究人员应查阅官方产品说明书(absea#KC-50441)或联系阿拉丁科学技术支持,以获取已确认的物种反应性和细胞类型兼容性信息。
PDZRN3鼠单克隆抗体适用于哪些应用?
针对PDZRN3的鼠单克隆抗体通常适用于蛋白质印迹(WB)、免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)和免疫沉淀(IP)。Ab351027的具体验证应用请以官方说明书为准,因为并非所有应用均针对该特定克隆进行了验证。
在哪里可以找到Ab351027的克隆编号和免疫原信息?
Ab351027的克隆编号、免疫原序列和同型亚类在现有产品信息中未予说明。请参阅官方产品说明书(absea#KC-50441)或联系阿拉丁科学客户支持以获取相关详情。
参考文献
- Aladdin Scientific. PDZRN3 Mouse mAb, Product Ab351027. Official product datasheet, absea#KC-50441.
- Bhatt DL et al. (general reference for PDZRN3 biology and ubiquitin ligase function — placeholder; specific primary literature citation required).
- Lin C et al. PDZRN3 is required for vascular morphogenesis and endothelial cell function — placeholder citation; specific journal, volume, and pages require verification.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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