高碘酸-雪夫氏反应实验
高碘酸-雪夫氏反应实验
PAS反应显示糖类的原理是由于含有乙二醇基的多糖类,在过碘酸的作用下,氧化产生醛基,此醛塞进而与Schiffs液作用便无色品红变成紫红色染料而附着于含有多糖类的组织上.本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导
操作方法
高碘酸-雪夫氏反应实验
原理
PAS反应显示糖类的原理是由于含有乙二醇基的多糖类,在过碘酸的作用下,氧化产生醛基,此醛塞进而与Schiffs液作用便无色品红变成紫红色染料而附着于含有多糖类的组织上.碱性品红+2H2SO3→品红亚硫酸(无色)品红亚硫酸+带醛基物质→无色物
材料与仪器
标本 步骤 一、实验试剂: 1. 标本选择:一般可用于新鲜干燥的涂片,未染而长期储存的标本也可用。如用瑞氏法染过的标本,先用酸酒精脱色然后进行PAS染色亦可. Schiff氏液. 2. 配制:碱性复红1克溶于200毫升沸水中,冷却至60℃时进行过滤,滤后、加20毫升1N HCI再加入NaHSO32克(多加亦可),以有强烈的SO2刺鼻味为佳,塞紧瓶口过滤,液体呈淡茶色可用.之后再加入300mg活性炭过滤,滤液应透明无色.保存于4℃冰箱. 二、实验步骤 1. 干燥血片或骨髓片固定于95%酒精10分钟 2. 蒸馏水冲洗几次 3. 1%过碘酸(水溶液)10分钟(可用1-2周) 4. 用蒸馏水冲洗几次 5. 放入Schiff’s液30分钟 6. 自来水冲洗(大约5分钟)最后用蒸馏水冲洗,然后用2%甲绿复染20分钟. 积分标推:(血片计数小淋巴细胞) “0” 胞浆内没有颗粒 + 胞浆中有一圈PAS阳性颗粒 ++ 胞浆中有二圈PAS阳性颗粒 +++ 胞浆内有三圈PAS阳性颗粒,或有大团块形成 计数100个细胞求其积分 正常值:(血片淋巴细胞) 阳性率10-30%,积分12-56,均数31 有核红细胞积分法: “0” 阳性 “+” 胞浆中分散有少量阳性颗粒或呈浅红色,应比正常红细胞色深 “++” 胞浆中有1或2个浓的颗粒环,或胞浆呈中等度弥散之红色 “+++” 胞浆中有大量浓颗粒,或呈甚深之红色 正常值:有核红积分0-7大多数阴性. 注意事项 1. Schiff’s液变红即不能再用,2. Schiff’s液中SO2饱和度与PAS反应的恒定性有关,NaHSO3如时间久了会失效,配出SO2达不到饱和,因此NaHSO3可多加。 3. 碱性品红出厂牌号与染色深浅有关,加NaHSO3过夜后仍为红色则说明染料不合用.4. 活性炭可以多加,其目的在于吸附颜色,如系品红不合用多加活性炭颜色亦不能被吸附.5. 配制Schiff’s液器械需十分清洁干燥。 如需了解更多产品详情,请前往阿拉丁官网查询。
碱性复红 HCI 活性炭 酸酒精
涂片
危险品化学品经营许可证(带存储)