红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性凝集。当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此的红细胞刚被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用．

操作方法

聚凝胶法交叉配血实验

原理

红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性凝集。当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此的红细胞刚被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。

材料与仪器

血清
试管

步骤

一、交叉配血试验

1、取试管2支，标主次侧．主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血者3一

5％红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次侧反之．

2、各加LIM0.7ml，混合均匀后，再各加Polybrene溶液 2滴，并混合均匀．

3、用血库专用离心机1000g离心力，离心1O秒，（若用普通离心机，离心条件为：3400rpm离心1O秒）然后把上清液倒掉，不要沥干让管底残留约0.1ml液体．

4、轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集则必须重作．

5、最后加入Resuspending2滴．轻轻转动试管混合并同时观察结果．如果在30s内凝集散开，代表是由Polybrene引起的非特异性聚焦，配血结果相合，如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合，如反应可凝，可进一步倒在玻片上用显微镜观察．

二、血型测定

1、取试管并标记，加入己知诊断血清2滴，再加待检者3－5％红细胞悬液（洗涤不洗涤均可）l滴．

2、加LIMO.7ml混合均匀后，再加Polybrene2滴，并混合均匀·

3、用BaSO血库专用离心机1000g离心力，离心10秒（若用普通离心机其离心条件为：3400rpm离心10秒）然后把上清液倒掉，不要沥干．让管底残留约 0.1ml液体．

4、轻轻摇动试管．目测红细胞有无凝集，如无凝集则必须重作．

5、最后加入Resuspending2滴，轻轻转动试管混合并观察结果，如凝集散    开，结果为阴性，如凝集不散开结果为阳性．

注意事项

1、可以用含EDTA之血浆代替血清使用．2、若病人血清（血浆）含肝素，如洗肾患者，须多加4-6滴polybrene溶液以中和肝素。

3、本试剂盒的操作方法也适用于抗体鉴定．4、试剂使用前请回复室温再进行操作。

5、加做辅助性抗球蛋白试验，目的是增加检测抗一K的敏感性，对检测其   他红细胞抗体无帮助．6、在冬天气温极底的情况下，操作交叉配血试验某些病人血清中可能含有    寒冷凝集素等因素，而导致假阳性的结果出现，若有此怀疑，建议在最后滴入Resuspending时试管立即置入37℃水浴时，轻轻转动试管混合，并在30秒      内观察结果．7、BaSO血库专用离心1000g离心力相当于3000γpm上文所指的普通离心机离一般为80型离心机，其相当离心力所对应转速为3400γpm．

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