实验方案(Protocols)

沉淀 σ32 和 RNA 聚合酶实验

简介

本实验介绍沉淀 σ32 和 RNA 聚合酶需聚乙烯亚胺的含量。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。

操作方法

沉淀σ32和RNA聚合酶实验

材料与仪器

聚乙烯亚胺
SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶

步骤

材料与设备

SDS-PAGE 电泳装置

聚丙烯酰胺小胶(10%)

试剂

聚乙烯亚胺(PEI)(6% 储液,pH7.9)

(配方,见“试剂的配制”,pp.184~189)

操作程序

1)0.2%DOC 上清 (见 p.153), 取 6x50-ul 等分试样。各试样分别加入 0、1、2、3、4 和 5ul 6%PEI 储液(使 PEI 浓度分别为 0%、0.12%,0.24%、0.36%、0.48% 和 0,6%), 充分混匀,孵育 5~10 min。

2) 用微型离心机离心 1ml,离下沉淀物。如需要,取上清样品,供快速蛋白质斑点印迹试验(见 PP.172?173) 或 SDS 凝胶电泳分析用。做斑点印迹试验应立即进行。

结果

典型的显示 PEI 滴定实验结果的 SDS 凝胶照片,见图 3-5。


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探索主题: 蛋白质实验

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《沉淀 σ32 和 RNA 聚合酶实验》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月23日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/precipitation-σ32-and-rna-polymerase-ass.html
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