蛋白质凝胶电泳凝胶的制备
蛋白质凝胶电泳通常用于（1）分析分子生物学、遗传学和生物化学（2）制备技术（3)采用某些方法（如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹）检测之
主题
蛋白质实验
用于检测、定量和定位抗原与抗体的技术——ELISA、免疫印迹、免疫组化与流式细胞术。以下是我们知识库中标注该主题的实验方案、常见问题与技术文章。
223 项资源 · 实验方案、常见问题与文章
蛋白质的抽提实验
蛋白质的抽提实验是进行蛋白质实验分析的基本操作，可用于（1）蛋白质的分离（2）蛋白质功能结构检测（3）蛋白质表达前的基本操作。
蛋白质的纯化实验
不同大小的蛋白质分子进入胶体过滤管柱，可依其分子量差异分离；是一种广泛应用的蛋白质partition色析法 。
蛋白质的表达、分离、纯化实验
蛋白质表达、分离、纯化可以：（1）探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理；（2）供作结构与功能的研究；（3）作为催化剂、营养剂等。
免疫球蛋白提取技术
免疫球蛋白提取技术可应用于：（1）推知机体的体液免疫功能；（2）诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。
膜钳片
运用膜片钳 进行膜离子通道特性的研究，是一项艰辛、细致、繁杂的工作，要求较高的技术水平和实验条件作保证，现在大致介绍一下膜片钳 实验的过程。
血清制备实验
抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清，一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。
血清蛋白琼脂糖凝胶电泳
血清蛋白琼脂糖凝胶电泳可应用于：（1）测定血清中蛋白质含量；（2）诊断疾病。
蛋白质测序
蛋白质测序可用于： （1）鉴定蛋白质； （2）表征蛋白质翻译后修饰。 （3）分析蛋白质一级结构与功能的关系。
血浆游离血红蛋白测定
血浆游离血红蛋白的测定可以用于：（1）与红细胞的使用价值近似。（2）血红蛋白的升高和降低可参考红细胞升高与降低的临床意义。
镉--血红素法测定组织水平金属硫蛋白
金属硫蛋日(metallothionein，MT)是富含金属及硫的可诱导性蛋白，它可被某些金属( Bi，Zn，Cu等)、激素（糖皮质激素）、细胞毒药物（顺铂及烷化剂）及其他与物理化学刺激相
豆粕中尿素酶活性的测定
将粉碎的大豆制品与中性尿素缓冲溶液混合，在30℃保持30min后，尿素酶催化尿素水解产生氨的反应。用过量的盐酸溶液中和所产生的氨，再用氢氧化标准溶液回滴。
蛋白质的提取及粗分离实验
分离纯化蛋白质，首先要从原材料中提取目的蛋白，然后通过粗分离的方法除去大量杂质，最后进行精细分离，得到目的蛋白。本实验以新型基因重组人TNF为例阐明重组蛋白TNF的提
高效反相液相色谱
高效反相液相色谱可应用于：分离非极性、极性或离子型化合物。
高效排阻液相色谱
高效排阻液相色谱又叫体积排阻色谱（ SEC），分子筛色谱，凝胶过滤等，生化界常用凝胶过滤。SEC是一种纯粹按照溶质分子在流动相溶剂中的体积大小分离的色谱法，填料具有一
多肽的固相合成、切割及纯化
固相肽合成技术是现代蛋白质化学的一项关键技术，也是对现代分子生物学和基因工程研究具有重大影响和重要意义的技术。它的基本过程为：1、偶联保护氨基，即将第一个保护氨
核酸酶保护实验
核糖核酸酶保护实验（Ribonuclease protection assay，RPA）是近十年发展起来的一种全新的mRNA定量分析方法。其基本原理是将标记的特异RNA探针（32P或生物素）与待测的RNA
离子交换色谱
离子交换色谱是将离子交换基因（CM、SP、Q、DEAE等）键合于一定的惰性载体（纤维素、交联葡聚糖，交联琼脂糖等）之上，并以此作为固定相，依据样品所带电荷的不同，从而与
蛋白质紫外分光测定实验
由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，因此蛋白质具有吸收紫外线的性质，吸收高峰在280nm波长处。在此波长范围内，蛋白质溶液的光吸收值（A280）与其含量
蛋白质序列分析和结构预测实验
内容来源：广东药学院实验指导手册。
底物浓度对催化反应速度的影响及米氏常数Km 和最大反应速度Vmax的测定实验
本实验是以蔗糖为底物, 利用一定浓度的蔗糖酶水解不同浓度的蔗糖所形成的产物( 葡萄糖和果糖) 的量来计算蔗糖酶的Km值。
酵母蔗糖酶的制备实验
蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranoside fructohydrolase ) ( EC. 3 . 2 . 1 . 26 ) 特异地催化非还原糖中的α-呋喃果糖苷键水解, 具有相对
离子交换柱层析分离核苷酸实验
本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离子交换柱层析进行分离, 最后采用紫外吸收法进行鉴定。旨在了解并掌握RNA 碱水解的原理和方法，掌握离子交换柱层
丹磺酰化法分析蛋白质 N-末端氨基酸实验
蛋白质的α-氨基与丹磺酰氯(DNS-Cl 是一种荧光物质) 反应, 生成DNS-蛋白质, 经水解可生成DNS-氨基酸。本实验旨在了解丹磺酰化法分析蛋白质N-末端氨基酸的基本原理以及掌握
醋酸纤维素膜电泳分离鉴定蛋白质实验
混合蛋白质样品中各种蛋白质的等电点不同, 在pH8 . 6 的巴比妥缓冲液中, 各种蛋白质所带的静电荷量不同, 加上蛋白质分子大小不相同, 在电场中移动的速度也不等, 例如, 血清
凝胶过滤层析法测定蛋白质的分子量实验
凝胶过滤也称排阻层析、分子筛层析和凝胶层析。本实验目的是了解凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量的基本原理，巩固柱层析的操作方法。
蛋白质的盐析分级分离及凝胶层析脱盐实验
本实验的目的是了解盐析分级分离蛋白质的基本原理及操作；了解葡聚糖凝胶SephadexG-25脱盐的基本原理和凝胶柱的制备及洗脱技术以及了解752型紫外可见分光光度计的使用方法
磷酸氨基酸分析实验
鉴定蛋白质中磷酸化的氨基酸残基是很有意义的。磷酸化作用发生在蛋白质的丝氨酸、苏氨酸和酩氨酸时，通过部分的HCl水解及接着进行双向薄层电泳，可以便利地鉴定 标记的磷酸
蛋白质生产高峰期的确定实验
蛋白质（protein）是生命的物质基础，没有蛋白质就没有生命。因此，它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。
重组蛋白质的代谢标记实验
由于重组蛋白质表达的时候，宿主蛋白质的合成基本终止，因此体内代谢标记是检测重组蛋白质的敏感方法。
硫氧还原蛋白融合蛋白的表达和纯化实验
以大肠杆菌trxA基因产物-硫氧还蛋白作为融合伴侣的基因融合表达系统，特别适用于在大肠杆菌胞质中表达髙产量的可溶性融合蛋白。
探针合成实验
探针是一小段单链DNA或者RNA片段（大约是20到500 bp），用于检测与其互补的核酸序列。双链DNA加热变性成为单链，随后用放射性同位素（通常用磷-32）、萤光染料或者酶（如辣
相互作用蛋白的捕获实验
相互作用蛋白的捕获试验要经过两次连续大量的酵母菌平板筛选过程。酵母菌含有lexA 融合合探针，报道基因和插入pJG4-5的GAL启动子控制下的cDNA表达文库。
诱饵蛋白特性鉴定实验
捕捉相互作用蛋白的第一步是构建一种诱饵蛋白，它是LexA与目的蛋白的融合体。要进行一系列的对照实验来鉴定所构建的诱饵蛋白是否适用，需不需要修饰。
分子排阻高效液相层析实验
分子排阻色谱法又称凝胶色谱法，是利用被分离物质分子大小的不同导致在填料上渗透程度不同使组分分离；常用的填料有分子筛、葡聚糖凝胶、微孔聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等，
蛋白质回收实验
回收试验，是“对照试验”的一种。当所分析的试样组分复杂，不完全清楚时，向试样中加入已知量的被测组分，然后进行测定，检查被加入的组分能否定量回收，以判断分析过程是
免疫筛选实验
根据抗原-抗体相互作用的原理从群体中选出目的物的技术。如用抗体检测表达型的基因文库所合成的蛋白质，从而筛选出目的基因的克隆。
核蛋白的免疫荧光定位实验
核蛋白的免疫荧光定位可应用于：（1）定位细胞内核蛋白分布；（2）病毒研究。
金属硫蛋白的测定实验
金属硫蛋白（metallothionein）是由由微生物和植物产生的金属结合蛋白，富含半胱氨酸的短肽，对多种重金属有高度亲和性。它是分子质量较低，半胱氨酸残基和金属含量极高的
心肌肌浆网钙-三磷酸腺苷酶的活性测定
心肌肌浆网钙-ATP酶(SERCA2a)在心肌细胞内的钙稳态调控中起主要作用,对SERCA2a在IPC过程中基因转录调控的研究有可能从基因表达调控层面揭示SERCA2a在IPC中的作用和机制。
心肌肌浆网钙-三磷酸腺苷酶的提取
心肌肌浆网钙-ATP酶(SERCA2a)在心肌细胞内的钙稳态调控中起主要作用,对SERCA2a在IPC过程中基因转录调控的研究有可能从基因表达调控层面揭示SERCA2a在IPC中的作用和机制。
钠，钾-三磷酸腺苷酶活性测定
ATP酶，又称为三磷酸腺苷酶，是一类能将三磷酸腺苷（ATP）催化水解为二磷酸腺苷（ADP）和磷酸根离子的酶，这是一个释放能量的反应。在大多数情况下，能量可以通过传递而被
肝药酶的诱导
肝药酶是肝脏微粒体混合功能酶系统的简称。此酶系是光面内质网上的一组混合功能氧化酶系，主要能催化许多结构不同药物氧化过程的氧化酶系。其中最重要的是CYP450，即细胞色
苯胺-4-羟化酶活性的测定
羟化酶亦称为氢氧化酶，是加氧酶的一种，是催化利用氧分子形成氢氧化物（酚、醇）反应的酶。所谓单（加）氧酶，除底物外，还需要电子供体（NADP-H），AH+O2+NADPH+H+→AOH+
葡萄糖醛酸-转移酶活性的测定
葡萄糖醛酸转移酶是指能催化间接胆红素与葡萄糖醛酸结合形成葡萄糖醛酸酯(即直接胆红素）的酶。
血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳实验
血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶具有机械强度好、弹性大、透明、化学稳定性高、无电渗作用、设备简单、用样量少和分辨率高等优点，并可通过控制单体浓度或单体与交联剂的比例聚合
蛋白质的电转实验
很多膜可作为蛋白质电转移的固相支持物，如重氮化纤维素膜（DPT， DBM）、DEAE-纤维素膜、尼龙膜等，但用的最多的还是硝酸纤维素膜（NC膜），该膜与蛋白质以非共价的疏水作
亲和层析实验
将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中，当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时，与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力
谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白的表达及纯化实验
pGEX载体可用于表达和纯化用作免疫原和生化、生物试剂的多肽（包括短肽），或用cDNA构建表达文库。每个pGEX载体都有一个编码谷胱甘肽S-转移酶的开放阅读框，其后有单一限制
谷胱甘肽-S-转移酶活性测定
谷胱甘肽S-转移酶是指催化具有亲电取代基的外源性化合物与内源的还原谷胱甘肽(GSH)反应的酶。 可催化多种反应包括烃基、芳基、芳烃基、烯基和氧基的转移反应。
血清脂蛋白琼脂糖电泳实验
血清脂蛋白经苏丹黑B染色后，以琼脂糖为载体，在pH8.6巴比妥缓冲液中进行电泳，可将脂蛋白分成不同的区带。按电泳移动的速度不同，正常人血清脂蛋白可出现三条区带，从阴极
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验
本实验介绍钙调蛋白的胰蛋白酶消化过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
钙调蛋白的溴化氰裂解实验
本实验介绍钙调蛋白的溴化氰裂解过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
钙调蛋白的苯基-Sepharose 层析实验
本方案是经多年实践形成的，它不是用 HIC 层析纯化蛋白质的首次尝试的范例。对钙调蛋白来说，苯基-Sepharose 是优先选择的 HIC 填料。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指
钙调蛋白的 DEAE SEPHADEX A-50 阴离子交换层析实验
纯化钙调蛋白的下一步操作是用 DEAE 树脂进行阴离子交换层析。这步操作利用了以下事实，即钙调蛋内是一种强酸性蛋白因而在中性或微碱性 pH 条件下带有大量的净负电荷。本实
钙调蛋白的粗分级分离实验
为纯化钙调蛋白，对平滑肌组织提取物的粗分级分离采取了两步不同的操作：硫酸铵沉淀和等电点沉淀。这两步操作利用了钙调蛋白的两个不同的性质，即它在中性以上 pH 条件下的
从鸡胗提取钙调蛋白实验
钙调蛋白存在于所有哺乳动物组织，也存在于其他真核生物体。它是目前已知的最为普遍存在和高度保守的蛋白质之一。因为胗是一种丰富而又廉价的、且无太多血管、脂肪和结缔组
钙调蛋白样品的测活实验
本实验介绍钙调蛋白样品的测活过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
滴定曲线实验
滴定曲线是呈现样品中每个组分的迁移率对 pH 的曲线，为此先将含有载体两性电解质的凝胶进行等电聚焦。然后转 90°，加样，并使样品在垂直于 pH 梯度方向进行常规电泳。本
尿素梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳与折叠分析实验
Goldenberg 和 Creighfn(1984) 引入用含尿素浓度梯度的聚丙烯酰胺凝胶来分析蛋白质的折叠状态。对该操作程序的进一步描述连同技术考虑和理论解释均可见于 Goldenberg(1989)
胰岛素受体糖基化的分析实验
本实验介绍关于胰岛素受体糖基化的分析。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验
本实验介绍关于胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
配体与活化介质的偶联实验
在这里，我们以配体与 Affi-Gel10 的偶联为例介绍本操作程序。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
胰岛素亲和层析实验
在本实验中，我们用胰岛素琼脂糖柱层析作为胰岛素受体纯化的最后一步。这一方法利用了胰岛素受体对胰岛累的高亲和性结合能力（KD=10-9mol/L)。本实验来源于蛋白质纯化与鉴
溶解膜蛋白用的去垢剂的筛选实验
虽然 TriumX-100 是从鼠肝质膜溶解胰岛素受体的一种良好的去垢剂，但它未必适合其他膜蛋白的溶解。这里，介绍一种筛选去垢剂的策略以确定它是否适于溶解某一待分离的膜蛋白
胰岛素受体的溶解及活性测定实验
本实验介绍关于胰岛素受体的溶解及活性测定过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
膜上胰岛素受体数量的测定实验
胰岛素可高亲和性地与其受体结合（KD~109mol/L)，这一能力使我们能估测出甚至是相当粗制的制备物中的胰岛素受体数。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
存在干扰物质条件下的蛋白质浓度测定实验
习惯上，蛋白质的浓度通常是按 Lowry 及其合作者（Lowry 等，1951) 的方法用 Folin-Ciocalteau 试剂进行测定的。但样品中的盐或去垢剂等对这种方法有干扰。Peterson(1977)
从组织分离粗制质膜组分的另一实验方法
Neville(1968) 所述的方法对分离鼠肝质膜的效果较好，但对分离其他组织的质膜不一定适用。这里，介绍一种从其他组织制备粗制质膜组分的方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定
分离肝脏质膜的 Neville 法实验
本实验介绍分离肝脏质膜的 Neville 法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
细菌过表达产物（无二硫键者）新纯化实验
本节的目的是，为如何用一系列类似于本单元所述的实验来快速获得一种新的在细菌中过表达之蛋白质的初步纯化方案，提供一组简略的工作程序。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实
蛋白质与免疫亲和介质结合实验
本实验介绍蛋白质与免疫亲和介质结合需要多少时间。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
沉淀 σ32 和 RNA 聚合酶实验
本实验介绍沉淀 σ32 和 RNA 聚合酶需聚乙烯亚胺的含量。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
包涵体沉淀溶解实验
本实验介绍溶解包涵体沉淀需N-十二烷基肌氨酸钠的含量。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
快速蛋白质斑点印迹试验
在常规的蛋白质斑点印迹试验中，印迹膜封闭 1 小时后，与一抗反应 1 小时，再与二抗反应 1 小时。在允许灵敏度较低的情况下，封闭、一抗、二抗等几步可结合进行, 这样可加
由非变性凝胶电泳迁移率法评估均一性实验
当蛋白质在保持其天然构型不变的条件下进行电泳时，其迁移率可以作为它的均一性的一种量度。由于迁移率是电荷和形状两者的函数，因此可以预期，能将单体、二聚体等形式彼此
过载染色 SDS 凝胶扫描法估测纯度实验
由于蛋白质在 SDS 凝胶上可得到高分辨分离，并可用考马斯亮蓝（CBB) 给予灵敏的染色，故按本单元实验 4 所述的方法，对经 SDS 凝胶分离的蛋白质制备物进行染色和脱色后扫描
酶测定法实验
在本单元中，用一种较简单的方法测定它对核心 RNA 聚合酶自非特异性模板 poly(dAT) 起始转录的刺激作用。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
定量蛋白质斑点印迹实验
蛋白质印迹法，它是用免疫学方法来测量某一蛋白质的量。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
蛋白质的定量测定实验
极需一种定量测定样品中蛋白质浓度的快速而准确的方法，以使人们能在纯化过程中跟踪蛋白质的回收。虽然至今还没有一种理想的方法，但 Bradford(1976) 法目前用得非常普遍。
大肠杆菌细胞的破碎和包涵体的制备实验
本实验介绍大肠杆菌细胞的破碎和包涵体的制备。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
肝素-Sepharose CL-2B 的制备实验
本实验介绍肝素-Sepharose CL-2B 的制备过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
凝胶迁移率变动分析实验
在本实验中, 我们用 DNA 亲和层析所用的同一互补寡核苷酸 (具体序列见实验 3 的引言的末尾) 来进行 AP-1 的凝胶迁移率变动分析。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作
DNA 亲和介质的制备实验
本实验介绍DNA 亲和介质的制备过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
用制备凝胶电泳纯化寡核苷酸实验
本实验介绍如何用制备凝胶电泳纯化寡核苷酸。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
HeLa 细胞核提取物的 Sephacryl S-300 HR 柱层析实验
本实验介绍HeLa 细胞核提取物的 Sephacryl S-300 HR 柱层析过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
如何装填凝胶过滤柱实验？
本实验介绍如何装填凝胶过滤柱的方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
HeLa 细胞核提取物的制备实验
在本实验中，基本上是按Dignam等（1983)所述的方法从HeLa细胞制备核提取物的。这一基本方法大概是制备体外转录和DNA结合实验用因子的最常用的方法。本实验来源于蛋白质纯化
亲和层析的操作实验
本实验介绍亲和层析的相关操作。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验
本实验中，我们将考察胰岛素受体的胰岛素刺激酪氨酸激酶活性。用抗磷酸酪氨酸抗体（antiphosphotyrosine antiboty) 来检测磷酸化的受体，后者可用 SDS-PAGE 来分离。本实验
免疫亲和层析实验
本实验介绍免疫亲和层析的方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
溶解受体的凝集素亲和层析实验
本实验介绍关于溶解受体的凝集素亲和层析过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
简并寡核苷酸基因混编实验
蛋白酶生化性质的改善可以通过对该酶基因的错掺突变和 DNA 混编方法实现。混编技术可用于同一基因的一组突变体，或者对相关家族基因的片段进行新的组合，产生嵌合突变基因
蛋白质库的设计和筛选---概率计算实验
在设计蛋白质库进行筛选时，在能够进行筛选的物理极限内我们必须尽一切可能产生出蛋白质变体的多样性。本章的目标是将概率的语言引入蛋白质工程实验中，进而来回答一些常见
位点特异性核酸内切酶的蛋白质工程实验
位点特异核酸内切酶涉及核酸生物化学的许多方面。限制酶及相关酶已成为作用于 DNA 的酶的典范。通过理性蛋白设计，投入了无数的精力试图改变其特异性。本实验来源「现代蛋
人造锌指蛋白的设计和合成实验
在 DNA 结合模体中，（Cys)2(His)2 类型的锌指模体具有大的操控潜力。为新的 DNA 结合蛋白设计，锌指模体提供了有吸引力的框架。特别是为产生新的、具有全新的 DNA 结合特
基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂实验
钙调素（CaM) 是普遍分布的蛋白质，参与钙介入的信号转导。当 Ca2+ 流入时，CaM 获得强亲和力，结合各种带有一个或多个CaM 识别序列的胞内蛋白，启动或终止 Ca2+ 调控的信
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验
虽然表观上简单，盘绕螺旋（coiled coil ) 模体是高度专一的，并在理解三级结构及其形成方面具有重要意义。最常观察到的盘绕螺旋形态——平行二聚态，其一般的结构类型仍有
采用计算方法的组合式蛋白质设计策略实验
计算方法一直在蛋白质设计中发挥重要作用。本工作主要集中在搜索蛋白质序列空间，以找到一条或数条与已知结构和功能相容的蛋白质序列。在期望的功能和结构限制下，概率性计
等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点
等电聚焦（Isoelectric focusing，简称 IEF）是六十年代中期出现的新技术。近年来等电聚焦技术有了新的进展，已迅速发展成为一门成熟的近代生化实验技术。目前等电聚焦技术
SDS-PAGE 蛋白质样品的制备
本实验介绍SDS-PAGE 蛋白质样品的制备。
蛋白质内序列分析用肽段的分离与纯化实验
分子生物学中最重要的环节之一是对微量蛋白质进行分析，使对编码待研究蛋白的 cDNA 序列的克隆成为可能。为有效地做到这一点，通常需要知道蛋白质的内序列。在这一方面，肽
用亚氨基二乙酸（铁螯合）Sepharose6B 分离磷酸肽实验
在进行蛋白质（phosphorylated protein) 的结构与功能分析时，接蛋白质水解后即能将磷酸肽与未修饰的（未磷酸化的）肽分开是很有助益的。可利用的最有效的方法之一是使用载
蛋白质的过甲酸氧化实验
用过甲酸氧化蛋白质是使蛋白质部分变性和稳定含硫氨基酸的一种简易而有效的方法。过甲酸氧化能定量地将半胱氨酸残基转化为胱氨酸，将甲硫氨酸残基转化为甲硫氨酸砜。这些残
酸化丙酮/甲醇沉淀法实验
TCA 沉淀的另一有用的替代方法是使用酸化的丙酮-甲醇混合液。酸化有助于通过将去垢剂溶于有机相而蛋白质产生沉淀以去除样品中的 SDS。丙酮和甲醇都能以任何比例溶解于水中
三氯乙酸沉淀实验
三氯乙酸沉淀实验主要用于（1）蛋白质的沉淀纯化；（2）试样化合物的提取。
银染实验
本实验介绍凝胶染色银染的过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
利用核苷酸交换和剪切技术进行DNA碎裂和定向进化实验
利用 DNA 混编模仿自然进化过程是优化 DNA 和蛋白质性质的常用方法。这里我们介绍这类方法的一个新进展，即利用标准的聚合酶链反应（PCR)放大基因文库时与其他 4 种标准 dN
大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入实验
氨基酸类似物的掺入越来越有用。非天然氨基酸的定点掺入，使得运用化学生物学对特定蛋白质的研究和应用成为可能。但是，非天然氨基酸的整体掺入也检验着蛋白质组和基因编码
基于纤连蛋白类型Ⅲ结构域框架的抗体模拟实验
我们发展了用人纤连蛋白的第 10 个纤连蛋白类型Ⅲ结构域（FNfnlO)作为框架以显示用于与其他分子结合的多重表面链套的用法。我们把具有新的结合功能的 FNfnlO 变体称为“独
蛋白质纯度测定实验
任何方法都不能直接定量蛋白质样品的纯度。通常情况下，蛋白质纯度测定涉及评价特定杂质的含量或仅仅验证蛋白质样品中是否存在杂质。无论最终 g 的是为了解释分析数据、验
凝胶中蛋白质的洗脱实验
SDS-PAGE 在确定样品中多肽的数量和大小方面已被证明是极有用的分析方法。若能熟练运用的话, 它还具有分离许多大小不一的单体蛋白质的能力。许多人在凝胶电泳应用的早期希
膜蛋白的纯化实验
膜蛋白在生物进程中具有关键性的作用。它们参与细胞与细胞之间、细胞与细胞基质 之 间 的 相 互 联 系 胞 器 及 细 胞 的 形 成 过 程 ，各种离子、代谢产物和蛋白质的跨质
多羟基反应单克隆抗体的鉴定、生产和使用——用于免疫亲和层析
所有形式的亲和层析法都需要两个组分间形成特异性相互作用，通过这种作用可以纯化其中一种组分。免疫亲和层析即利用抗原和抗体的特异性相互作用，是遵循亲和层析原理的一个
蛋白质凝胶染色法实验
本 章 讲 述 了 基 于 电 泳 的 蛋 白 质 检 测 法 , 重 点 讨 论 总 蛋 白 质 检 测 、常 见 蛋 白 质 翻 译 后 修饰 (P T M ) 检 测 、磷 酸 化 作 用 检 测 和 糖 基 化
羟基磷灰石柱用于蛋白质层析实验
羟基磷灰石 (hydroxyapatite,HA) 是一种以磷酸钙为原料的羟基化物, 其大量地用于蛋白质的层析分离主要是在 1991?2009 年，并且最初只是用于重组蛋白的纯化。HA 的使用方法
蛋白质沉淀技术
在过去的 100 年里，虽然人们已经使用过多种不同的沉淀方法，但是 AS 沉淀一直都得到了最广泛的应用，尤其对于酸性蛋白质。此外，PEI 沉淀的应用也正日益普及。接下来，将
凝胶过滤实验
蛋白质纯化的层析技术中，凝胶过滤比较独特,它是基于蛋白质分子质量的相对大小而分离。与传统的过滤相反，通过凝胶过滤柱后,并没有任何蛋白质留存于其中。凝胶过滤优缺点明
蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验
蛋白质组学和结构基因组学需要这种蛋白质提取方法, 它能够允许同时将几百个蛋白质在不同的载体和宿主的组合上进行筛选 (Stevensetal.，2001)。在这种多因素平行筛选 (multi
用于蛋白质表达的标签实验
大多数蛋白质都是利用重组表达技术进行制备的。在克隆的过程中，可以将额外的残基或标签添加到目标蛋白质的 N 端或 C 端。这些标签的长度可以从仅仅几个氨基酸残基到全长的
包涵体蛋白溶解后的重折叠实验
当蛋白质在大肠杆菌和其他表达宿主内高水平表达时，通常会发现它们中的大部分是不溶的, 并以称为包涵体的不溶形式存在。尽管包涵体形成的准确机制还不完全清楚，而且可能因
哺乳动物细胞瞬时基因转移法制备重组蛋白实验
报道显 TK，在 过 去 的 1 0 年 ，已经开发出 了多种高效的瞬时转染（transient transfection) 方法 ， 它们可 以 满 足 甚 至 超出 了 上 述 需 求 。 目 前 蛋 白 质 的
杆状病毒-昆虫细胞表达系统
本章将以介绍基本的杆状病毒-昆虫表达系统的北京信息作为开始，然后重点介绍最近的进展，这些进展极大地方便了普通研究人员对该系统的运用。
用于外源蛋白质生产的细菌表达系统
细菌表达系统有各种各样的载体和宿主菌可供选择，大部分工程菌的增殖时间短, 不仅便于快速评价实验结果，而且降低了技术和设备无菌要求的严格性。经过简单的调整, 许多在实
蛋白质浓缩和溶质的去除实验
预计在新奇的一级分子和生物仿制药实体方面将会有突出的增长。一些进步的是改良的分析、开发和相互作用。现在已有许多用于去除關的方法，包括冻干、反向萃取、溶质析出，pr
蛋白质稳定性的保持
本方法主要用于保持蛋白质的稳定性。
用蛋白质组学方法对海洋环境中过氧 化物酶体增殖污染物进行风险评估实验
由于海洋污染可影响人类和其他自然物种，因此海洋环境的污染越来越受到人们的关注。应用蛋白质组学方法对海洋污染进行监测是评估环境污染对生态影响的一种新方法。生活在岸
以AtT20脑垂体细胞作为模型进行神经内 分泌肽能系统干扰中的蛋白质组学分析实验
环境污染物可以影响许多胞内酶活性。酶抑制因子对蛋白质组的影响可以利用双向电泳来确定。在神经内分泌细胞中，前体蛋白转化酶 1 和 2 (proprotein convertase 1 和2, P C
应用末端截切、进化、再延长技术提高酶稳定性的方法实验
提高酶稳定性是改造酶在高温等极端条件下行使其活性理想的设计步骤，同时也能降低酶对蛋白酶剪切的敏感性。由于这些优点，研究者已经发明了很多不同的方法和技术改造蛋白质
Raf蛋白Ras结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的克隆实验
蛋白质工程领域主要涉及关于设计新的酶活性或折叠，以及理解蛋白质正确折叠和稳定的最基本的序列决定因素。迄今，已有巨大的精力投入到设计构建多肽文库方法的研究中。最常
分隔式自我复制（聚合酶和其他酶的定向进化的一个新方法）实验
分隔式自我复制（CSR)是蛋白酶，特别是聚合酶，定向进化的一种新方法。在 CSR 最简单形式中，它包括一个简单的环路反馈，即聚合酶只复制编码自身的基因 (自我复制）。自我
核糖体失活展示系统实验
在这里我们介绍一种在体外将基因型和表现型相联系的新策略，用来选择功能蛋白质。这个策略里，蓖麻蛋白的 A 链在翻译时被激活，因此不需要去掉终止密码子，就能形成核糖体
M13 噬菌体衣壳蛋白改造在改良噬菌体展示技术中的应用实验
本章描述了改进融合蛋白在 M13 噬菌体颗粒表面展示水平的一个方法。向 M13 衣壳锚定蛋白引入突变后，蛋白质展示水平约能增加两个数量级。本实验来源「现代蛋白质工程实验指
选择重组蛋白表达的合适方法
重组蛋白是研究生物学过程的重要工具。需要使用表达系统来对其进行制备。合适表达系统的选择取决于重组蛋白的特性、重组蛋白的预期应用以及该系统能否生产足够量的蛋白质。
二维聚丙烯酰胺凝胶电泳样品的溶解与还原
来源：《蛋白质组学：从序列到功能》
滤胶过滤层析法蛋白质的纯化实验
凝胶过滤层析是一项重要的蛋白质纯化技术，又称为大小排阻、凝胶排阻、分子筛或凝胶过滤层析这种方法利用分级分离，而不需要蛋白质的化学结合，这就明显降低了因不可逆结合
相互作用克隆实验
相互作用克隆（也称表达克隆）用于确认并克隆编码与目的蛋白或「诱饵」蛋白相互作用的蛋白质。这种方法绕过了纯化、微量测序或抗体制备等必要过程。来源《精编分子生物学实
蛋白质在哺乳动物细胞中表达实验
内容来源于《精编分子生物学实验指南（第５版）》
染料配基层析法纯化蛋白质实验
染料配基层析不是真正意义的亲和层析，因为它们并不是与它们结合的蛋白质的天然配基。然而染料柱能很好地结合蛋白质，并能导致满意地纯化蛋白质。事实上，有时这种结合甚至
免疫纯化实验
在蛋白质纯化方法中抗体亲和纯化是非常有效的方法之一。仅此一步常可获得 1000～10 000 倍的纯化。如果抗体与目的蛋白的结合的特异性得到证明，并且洗脱的目的蛋白没有受到
亲和柱的制备实验
本节将重点叙述用溴化氰活化的琼脂糖凝胶配体固相化技术。绝大多数配体，如多肽、蛋白质、凝集素和核酸，都能较容易地用该法偶联。来源：《蛋白质技术手册》
批量层析法浓缩蛋白质实验
批量层析法简单快速，适用于对蛋白质分辨率要求不高的情况，也是浓缩蛋白质的有效手段。来源：《蛋白质技术手册》
蛋白质的毛细管电泳分析实验
毛细管电泳的主要特点是柱效高（N＞105～106）、分析时间短，所用样品量和试剂消耗少，操作模式多，更容易改变背景电解质，在线检测和自动化，使其成为同 HPLC 互补的分析
不连续非变性凝肢电泳实验
非变性凝胶电泳，也称为天然凝胶电泳。在凝胶中蛋白质的分离取决于它所带电荷及分子大小。按丙烯酰胺凝胶孔径大小去筛分不同尺寸蛋白质的同时，在分离胶酸性 pH 条件下高电
斑点滤膜结合法测定蛋白质浓度实验
斑点滤膜结合法是一种初步测定蛋白质含量的快速方法。此法尤其适用于密度梯度离心或柱层析中筛选有用的组分。也可用于指示蛋白峰的存在，以减少进一步进行蛋白定量的样品数
Lowry 检测法测定蛋白质浓度实验
Lowry 法是标准、快速的蛋白质定量检测方法，已得到广泛应用在检测之前可通过蛋白质沉淀将干扰物质去除。来源：《蛋白质技术手册》
包涵体蛋白质的溶解及复性实验
虽然包涵体是表达蛋白非天然形式的混合物，但是其肽链本身是完整的，或者说一级结构是正确的。从包涵体纯化表达蛋白的一个优点是包涵体易于与细胞其他成分分离。一般的水溶
融合蛋白化学降解实验
使用基因融合表达系统在大肠杆菌中表达外源基因已越来越受欢迎。其原因在很大程度上归因于融合系统能够产生大量的可溶性的融合蛋白。谷胱甘肽转移酶以及硫氧还蛋白均被证实
融合蛋白酶解实验
使用基因融合表达系统在大肠杆菌中表达外源基因已越来越受欢迎。其原因在很大程度上归因于融合系统能够产生大量的可溶性的融合蛋白。谷胱甘肽转移酶以及硫氧还蛋白均被证实
凝胶中激酶直接分析实验
蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物，当酶样品中含有磷酸转移酶活性时，蛋白 质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。内容来源于《精编分子生物学实验指南（第五
酪氨酸激酶分析实验
蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物，当酶样品中含有磷酸转移酶活性时，蛋白质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。内容来源于《精编分子生物学实验指南（第五版
Ca2+/钙调蛋白依赖性激酶分析实验
蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物，当酶样品中含有磷酸转移酶活性时，蛋白 质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。内容来源于《精编分子生物学实验指南（第五
环核苷酸依赖性蛋白激酶分析实验
蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物，当酶样品中含有磷酸转移酶活性时，蛋白 质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。内容来源于《精编分子生物学实验指南（第五
抗磷酸肽的单克隆抗体制备实验
本实验提供了从将候选杂交瘤克隆接种到 96 孔培养板开始一直到分离出具有所需活性的杂交瘤克隆的步骤。内容来源于《精编分子生物学实验指南（第五版）》
二次鉴别性消化法检测磷酸肽中特定氨基酸实验
通过用序列特异性的蛋白酶进行消化或用位点特异性的化学试剂进行裂解的方法可 以获得更多关于磷酸肽的信息。内容来源于《精编分子生物学实验指南（第五版）》
肽中磷酸化氨基酸位置测定实验
如果样品量不足以用于直接测序，可以用手工Edman降解法来降解肽以确定磷酸化氨基酸在肽中的位置。来源：《精编分子生物学实验指南（第五版）》
解析多肽分离实验
CE 分离来自复合体混合物如蛋白酶解产物的特定多肽尤其有用。以下的方案阐述使用低压样品注射的 P/ACE 5000 CE 仪器（Beckman） 的用法。但其他仪器也可以依据制造商的操作
等电点聚焦分离蛋白质实验
蛋白质可以在包被或非包被的毛细管柱分离，分离方案的选择取决于靶蛋白的特异属性。最重要的属性就是pl，这由一般的凝胶电泳或CE决定。等电点聚焦分离是CE分离的一种。内容
离子交换层析法蛋白质的纯化实验
离子交换层析在纯化蛋白质的层析手段中使用最为广泛。它对蛋白质的分辨率高，操作简易，重复性好，成本低。按照离子交换原理，蛋白质可从大量缓冲性溶液中被分离，所以此方
凝集素亲和层析法纯化蛋白质实验
凝集素是能可逆性结合碳水化合物的蛋白质。因为绝大多数凝集素至少每个分子有两个碳水化合物结合部位，所以它们可以沉淀糖蛋白和凝集细胞。凝集素也就可以用作糖蛋白的亲和
纯蛋白质的紫外光谱 A280 nm/A260 nm 实验
蛋白质纯度的一种较为简单而有效的量度是通过测定经纯化的蛋白质的紫外 (UV）光谱得到的。即使十二烷基硫酸钠（SDS) 凝胶电泳分析表明没有杂蛋白存在, 但蛋白质也可能会含
消光系数的测定（Scopes 法）实验
Scopes 发表了一种测定蛋白质消光系数（E) 的简便方法（Scopes,1974)。此法基于如下事实，即尽管蛋白质在 205nm 处的吸收大部分是由肽键造成的，但仍有一些吸收取决于其中
透析法除 N- 十二烷基肌氨酸钠实验
本实验介绍透析法除N- 十二烷基肌氨酸钠需要多少时间。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
重组 MVA 活体免疫染色实验
活体免疫染色可用于检测改造的痘苗病毒Ankara （MVA），也可用于鉴定细胞表面或在细胞质中表达的蛋白质。当然也适用于标准痘苗病毒株。来源《精编分子生物学实验指南（第五
GST 融合蛋白的亲和纯化实验
本实验介绍了应用与谷胱甘肽-S-转移酶融合的蛋白质（GST 融合蛋白）来亲和纯化其他蛋白质，又称 GST 共结合纯化方法。这种共结合技术可用来补充评估蛋白质-蛋白质相互作用
Far Western 分析蛋白质相互作用实验
使用 Far Western blot 分析蛋白质相互作用时，目的蛋白固定在一个固体支持膜上，然后用非抗体蛋白探测。 Far Western blot 能够用于识别复杂的蛋白复合物中蛋白质的特异性
RIP 技术
研究细胞内RNA与蛋白结合情况
生物药糖基化位点检测
N-糖基化位点研究是理解糖链功能的重要前提之一
BCA法测定蛋白质浓度
测定样品中蛋白浓度
酵母提取物的制备实验
来源:《蛋白质与蛋白质组学实验指南》
细菌中重组蛋白的大量提取实验
来源：《蛋白质与蛋白质组学实验指南》
氮舱减压法裂解培养细胞实验
来源：《蛋白质与蛋白质组学实验指南》
用于免疫印迹的动物培养细胞、酵母和细菌的裂解实验
来源：《蛋白质与蛋白质组学实验指南》
磷酸化位点分析实验-确定磷酸化氨基酸类型
来源：《蛋白质组学：从序列到功能》
脂肪组织和细胞的总蛋白提取
提取脂肪组织和细胞的总蛋白
蛋白激酶C异构体分析实验
蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物，当酶样品中含有磷酸转移酶活性时，蛋白 质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。内容来源于《精编分子生物学实验指南（第五
从包含体中溶解大肠杆菌重组蛋白实验
来源：《蛋白质与蛋白质组学实验指南》
冰冻切片淀粉样蛋白（AMYLOID）硫磺素T（thioflavine T）荧光染色
蛋白纤维荧光染色
磷酸戊糖途径
磷酸戊糖途径（pentose phosphate pathway）是葡萄糖氧化分解的一种方式，可以产生 NADPH，并合成磷酸核糖，为核酸代谢提原料。葡萄糖－6－磷酸脱氢酶（G6PDH）是磷酸戊糖
无氧氧化途径中关键酶和重要产物测定
葡萄糖经历糖酵解（glycolysis）的 10 步代谢反应，生成酮酸，然后进一步生成乳酸，或者进入线粒体脱羧成为乙酰辅酶 A（CoA），进入柠檬酸循环。在葡萄糖无氧氧化生成乳酸
X 射线晶体学
蛋白质分子能够结晶的现象在 170 多年以前就已被报道。1895 年 R？ntgen WC 发现 X－射线和 1912 年 Laue MV 发现晶体的 X－射线衍射（X－raydiffraction）现象，开创了晶
GST pull-down 分析
蛋白质-蛋白质相互作用在诸如生物催化、转运、信号传导、免疫、细胞调控等多种生命过程起着重要的作用，因此对这种作用的研究对于了解生命活动规律具有深远意义。GST pull-
蛋白质的等电点测定实验
蛋白质的等电点是蛋白质的重要特性之一。测定蛋白质的等电点对于了解目的蛋白质的理化性质和设计纯化目的蛋白的策略均有重要帮助。目前，用于测定蛋白质的等电点的方法主要
蛋白质的精确分子量测定实验
蛋白质的精确分子量是指分子中含有的全部原子量的总和。目前，用于测定蛋白质精确分子量的方法主要有一种：质谱法测定蛋白质精确分子量。
基于蛋白质光吸收特性测定蛋白质总含量
基于蛋白质光吸收特性测定蛋白质总含量是基于蛋白质不同化学键光吸收特性。目前，基于蛋白质光吸收特性测定蛋白质总含量的方法主要有一种：如紫外光谱吸收法。
基于蛋白质元素组成测定蛋白质总含量
基于蛋白质元素组成测定蛋白质总含量是基于蛋白质的元素组成特点直接进行分析的方法。目前，基于蛋白质元素组成测定蛋白质总含量的方法主要有一种：如凯氏定氮法。
细胞膜蛋白质的含量测定实验
膜蛋白是存在于细胞质膜中的蛋白质分子，在细胞内分子运输、能量代谢、细胞和组织结构的维护以及细胞信号转导中发挥重要作用。目前，用于细胞膜蛋白提取的方法主要有三种：
NADPH-细胞色素 C(P-450)活性测定
NADPH-细胞色素C（P-450）是一种血红素蛋白，它是一个末端氧化酶，由于当它处于还原形式时，与一氧化碳结合形成一种亚铁羰基加成物。在可见光450nm处有最大的吸收峰，故命
DNA 酶 I 足迹探针的制备实验
DNA 酶 I 足迹分析是检测和鉴定转录因子对 DNA 的序列特异性结合能力的一种有效方法（Galas 和 Schmitz,197S)。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
从 PEI 沉淀洗脱 σ32 和 RNA 聚合酶实验
本实验介绍从 PEI 沉淀洗脱σ32 和 RNA 聚合酶需要的盐量。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
透析得可溶的重折叠 σ32 单体实验
本实验介绍什么透析条件可使可溶的重折叠σ32 单体得率最高的方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定 IgG 纯度
由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制，因此可以形成「连续系统」和「不连续系统」两种电泳系统。「不连续系统」最大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的
PPO 粗酶液的纯化
PPO的纯化可应用于：（1）研究PPO营养机制；（2）PPO生理机制与调节。
TNF-α 生物学活性检测方法
TNF的生物学活性之一是能直接杀伤肿瘤细胞。TNF与相应受体结合后向细胞内移，被靶细胞溶酶体摄取导致溶酶体稳定性降低，各种酶外泄，引起细胞溶解。肿瘤细胞株对TNF-&alpha
心肌肌原纤维 ATP 酶的提取和活性测定
心肌肌原纤维ATPase为Ca2+、Mg2+ATPase，分解ATP成ADP和Pi，并释放能量，提供肌原纤维收缩需要。肌原纤维的提取采用Salaro和Pagani法，主要采用差速离心和Triton X-100脱膜
底物与肝细胞色素P-450 结合光谱的测定
肝脏的细胞色素P450系统在药物的代谢中起着重要作用，它将药物由疏水型转化为更易排泄的亲水型。生物转化反应一般可分为细胞色素P450依赖的I相和II相结合反应。最近几年内
肝药酶 Lowry 比色法测定
Lowry比色法是蛋白质测定最灵敏的方法之一。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵
LacZ 和 trpE 融合蛋白的表达及纯化实验
融合蛋白一般都作为抗原使用以刺激抗体的产生，许多情況下也可用于生化分析。目前两种广泛应用的大肠杆菌表达系统是利用pUR载体系列的lacZ融合系统及利用pATH载体系列的trp
动物基因组 DNA 的分离纯化实验
本实验目的是掌握盐溶法大量制备动物基因组DNA 的基本原理和方法，根据核糖核蛋白与脱氧核糖核蛋白在一定浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同进行分离, 然后用蛋白质变性沉淀剂
DNA 的 Tm 值测定实验
当DNA 的稀盐溶液加热到80～100 ℃ 时, 双螺旋结构即发生解体, 两条链分开, 形成无规线团。一系列物化性质也发生改变: 260 nm区紫外吸收值增高(增色效应) , 粘度降低, 浮力
植物总 RNA 的提取实验
在液氮中研磨植物材料, 使部分细胞破碎, 进一步使植物细胞在裂解液中裂解, 用醋酸钠和氯仿沉淀蛋白质, 异丙醇沉淀核酸, 溶解后经氯化锂沉淀总RNA, 洗涤后得到高质量的RNA。
甲醛变性凝胶电泳鉴定 RNA 实验
本实验旨在学会甲醛变性凝胶电泳鉴定RNA 的方法。琼脂糖凝胶电泳作为鉴定大分子物质经常被使用, 但含有RNase 酶活性, 因此要使RNase 变性而不使RNA 变性的, 故采用甲醛变性
DEAE 纤维素柱层析纯化酶蛋白实验
本实验目的是以柱层析的方法进一步纯化蔗糖酶蛋白，利用DEAE 纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分离。
各级分蔗糖酶活性测定及纯化率的计算实验
用测定生成还原糖（葡萄糖和果糖）的量来测定蔗糖水解的速度，本实验中，蔗糖酶的活力单位指在一定条件下反应5 min，每产生1毫克葡萄糖所需酶量。本实验旨在测定各级分的蛋
载体两性电解质 pH 梯度等电聚焦实验
等电聚焦（isoelectrofocusing)，缩写为 IEF 或 EF，是 60 年代建立起来的一种蛋白质分离分析手段。30 多年来发展很快，成为当前电泳中具有最高分辨率 的技术。本实验来源
包涵体沉淀(σ32)的溶解、重折叠和离子交换层析实验
本实验介绍包涵体沉淀（σ32)的溶解、重折叠和离子交换层析。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。
定量 SDS 凝胶染色与扫描
大多数蛋白质虽然每毫克能结合大致相同量的染料，但不同蛋白质之间结合染料的能力仍有 10% 或更大的差异。因此，本法所得的数值不是非常准确的，除非你能用相同的蛋白质作
PVDF 膜上蛋白的可逆染色
PVDF膜上蛋白的可逆染色可以用于：Western杂交时，确认蛋白是否转至PVDF膜上。
琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶实验
乳酸脱氢酶存在于一切有糖酵解作用的细胞中, 在NAD+存在下催化乳酸脱氢形成丙酮酸或使丙酮酸还原成乳酸。本实验目的是掌握用琼脂糖凝胶电泳分离LDH 的原理和方法，学习定量
二喹啉甲酸(BCA)检测法测定蛋白质浓度实验
二喹啉甲酸（BCA）检测法是近来新研制的一种改进的 Lowery 测定法，反应简单而且几乎没有干扰物质的影响。来源：《蛋白质技术手册》
酵母双杂交技术
酵母双杂交系统(yeast two-hybrid)以酵母遗传分析为基础，研究反式作用因子之间相互作用对真核基因转录调控影响的实验系统。 其最有价值的应用是用BD-X筛选由AD-Y构成的cDN
蛋白质的电泳分离
蛋白质为两性电解质，在高于或低于等电点的溶液中会表现出带电的特性。在直流电场力的作用下，这些带电的蛋白质会发生泳动迁移。利用蛋白质在电场中的泳动速度来分离蛋白质
氨基酸代谢产物分析
氨基酸在体内一方面主要用以合成机体自身所特有的蛋白质、多肽及其他含氮物质；另一方面可通过脱氨作用、转氨作用、联合脱氨或脱羧作用，分解成α－酮酸、胺类及二氧化碳。
脂肪代谢产物分析
脂肪代谢是机体能量供应的重要来源，脂质的合成与分解失衡则引发脂质代谢紊乱。脂肪酸合成增多，氧化分解降低，会导致细胞内脂质积累。脂肪细胞的积累是肥胖病的基础，也是
蛋白表达体系构建
大肠杆菌蛋白表达是一种常用的蛋白质表达体系。大肠杆菌是一种常见的细菌，其在生物工程领域中得到了广泛的应用。通过将目的基因插入到大肠杆菌表达载体中，并利用大肠杆菌
蛋白质的真核表达
蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系，载体中含有外源的基因片段，通过载体介导，目的是实现外源基因在宿主中的表达，本文以用于小鼠及兔源 IgG
双荧光素酶报告实验
将目的基因转录调控原件构建到萤火虫荧光素酶报告基因质粒上，与海肾荧光素酶内参基因质粒共转染细胞，裂解细胞后分别加入荧光素酶底物，会发出生物荧光，从而被荧光测定仪
蛋白质寡聚化检测
寡聚化指单体化合物之间形成二、三、四聚体或长链分子（低聚物）。在生物背景下，寡聚化通常是指生物大分子（如蛋白质）通过非共价相互作用形成大分子复合物的过程。在生理
炎症小体的激活及监测
核苷酸结合寡聚化结构域样受体含 pyrin 结构域蛋白 3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor family, pyrin domain-containing 3, NLRP3）炎症小体是近年来研究较多的一类多蛋白复合体，通过调控 caspase-1 活化，诱导炎症因子 IL-1β 和 TNF-α ...
酸性磷酸酶活性测定
酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）广泛存在于各种细胞中，在部分癌细胞中酸性磷酸酶往往会异常表达。以对硝基酚磷酸钠作为酸性磷酸酶反应底物，在碱性条件下能够水解生成黄色的对硝基酚，通过比色测定即可对 ACP ...
破骨细胞的分离培养
作为高度分化的多核巨细胞，破骨细胞主要来源于单核/巨噬细胞造血干细胞系，是一种具有骨吸收功能的细胞，目前研究破骨细胞分化的经典细胞系包括小鼠 RAW264.7 单核巨噬细
血管形成实验
在肿瘤发生发展过程中，肿瘤组织常处于缺氧、低营养状态，在这种条件下，由于癌细胞分泌的血管生成因子的激活，会促进大量的新血管生成，为肿瘤生长提供所需的氧气和营养物
蛋白纯化实验
在重组蛋白表达纯化的过程中 His-Tag 是最为常见的标签，对于大多数蛋白（可溶或包涵体）都可以使用该方法进行初步的纯化。
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常与免疫学实验一起研究的技术。
危险品化学品经营许可证（带存储）