实验方案(Protocols)
斑点滤膜结合法测定蛋白质浓度实验
斑点滤膜结合法测定蛋白质浓度实验
斑点滤膜结合法是一种初步测定蛋白质含量的快速方法。此法尤其适用于密度梯度离心或柱层析中筛选有用的组分。也可用于指示蛋白峰的存在,以减少进一步进行蛋白定量的样品数。来源:《蛋白质技术手册》
操作方法
斑点滤膜结合法
材料与仪器
待测蛋白质样品 步骤 1. 用铅笔在 3 mm 滤纸上画出 1 cm x 1 cm 大小的方格; 2. 在每一方格中心加入 3 ul 样品; 3. 将滤纸凉干,大约需要 15 min; 4. 将滤纸浸入 10% TCA 溶液中 30 s(TCA 溶液可重复使用); 5. 用水快速漂洗滤纸; 6. 将滤纸浸入考马斯亮蓝凝胶染液中 30 s(染液可重复使用); 7. 用水快速漂洗滤纸; 8. 在考马斯亮蓝凝胶脱色液中使滤纸脱色,脱色在几分钟之内完成; 9. 通过相应显蓝色的方格,可判断其含有一定量的蛋白质存在。 如需了解更多产品详情,请前往阿拉丁官网查询。
10%三氯醋酸(TCA) 考马斯亮蓝凝胶染色液 考马斯亮蓝凝胶脱色液
Whatman 3 MM 滤纸
危险品化学品经营许可证(带存储)