实验方案(Protocols)

冰冻切片淀粉样蛋白(AMYLOID)硫磺素T(thioflavine T)荧光染色

简介

蛋白纤维荧光染色

原理

硫磺素T(thioflavine T),阳离子苯并噻唑(benzothiazole)衍生物,在盐酸的参与下,通过脱氢硫甲苯胺(dehydrothiotoluidine)的甲基化而成,是最常用的淀粉样蛋白荧光探针,体内或体外识别显示和定量分析纤维化动力学。较之硫磺素S(thioflavine S),硫磺素T更为稳定和广谱,体内检测更佳,尤其适合在液体状态下检测。一旦与淀粉样蛋白纤维(寡聚体)结合,其荧光强度(激发波长440nm,散发波长490nm),显著增强,呈现苹果绿荧光。

应用

淀粉。肽类研究

操作方法

冰冻切片淀粉样蛋白(AMYLOID)硫磺素T(thioflavineT)荧光染色

材料与仪器

【材料】冰冻组织切片;冰冻切片淀粉样蛋白(AMYLOID)
【试剂,试剂盒】硫磺素T(thioflavine T),荧光染色试剂盒

步骤

取出10片待测的冰冻组织切片小心加上xx微升YIJI清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个切片样品表面小心移去切片上的YIJI清理液(Reagent A)小心加上xx微升YIJI固着液(Reagent B)在切片上,铺满整个切片样品表面在4冰箱里孵育10分钟小心移去切片上的YIJI固着液(Reagent B)小心加上xx微升YIJI清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个切片样品表面小心移去切片上的YIJI清理液(Reagent A)小心加上xx微升YIJI染色液(Reagent C),铺满整个切片样品表面室温下孵育10分钟,避免光照小心移去切片上的YIJI染色液(Reagent C)小心加上xx微升YIJI清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个切片样品表面室温下孵育1分钟小心移去切片上的YIJI清理液(Reagent A)小心加上xx微升YIJI强化液(Reagent D),铺满整个切片样品表面室温下孵育10分钟 小心移去切片上的YIJI强化液(Reagent D)小心加上xx微升YIJI清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个切片样品表面室温下孵育3分钟小心移去切片上的YIJI清理液(Reagent A)封片即刻在(共聚焦)荧光显微镜下(激发波长440nm,散发波长490nm)观察:淀粉样蛋白:呈现苹果绿荧光

注意事项

本产品为50次操作操作时,须带手套试剂具有腐蚀性,注意操作安全试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面组织细胞染色完成后,即刻进行荧光显微镜观察 槲皮素(Quercetin)、姜黄色素(curcumin)、 藜芦醇(resveratrol)等会干扰检测


如需了解更多产品详情,请前往阿拉丁官网查询。

https://www.aladdin-e.com

目录: 实验方案(Protocols)
探索主题: 蛋白质实验

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《冰冻切片淀粉样蛋白(AMYLOID)硫磺素T(thioflavine T)荧光染色》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月23日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/fluorescent-staining-of-frozen-sections.html
这篇文章对您有帮助吗? Yes No 有 1 人觉得有帮助