普鲁卡因胺净化板
普鲁卡因胺净化板
普鲁卡因胺标记后清洁板
应用:普鲁卡因胺清理
用于在普鲁卡因胺标记聚糖后去除多余的普鲁卡因胺标签。当过量的普鲁卡因酰胺干扰随后的样品分析时,使用该清洁板。
说明:普鲁卡因胺清理板是一个96孔膜底板,含有专门的聚糖结合膜。本产品设计用于真空歧管,可与其他流行的真空歧管系统一起购买。过量的普鲁卡因酰胺标签穿过膜,而聚糖结合到膜上,从而分离这两种成分。
板外观:板孔中的膜呈灰白色,膜上呈现灰色残留物。所见残留物和印版外观是正常现象,不会影响印版性能。
样本数量:足以容纳96个样本。
样品体积:每孔高达350µL。
合适的样品:普鲁卡因胺标记的聚糖。典型样品为普鲁卡因酰胺标记的聚糖,其IgG糖蛋白含量高达100µg。
储存:室温储存。避免热源、光源和湿气。正确储存后,该板应在购买之日起36个月内保持稳定。
装运:产品应在环境温度下装运。
仅供研究使用。不用于人类或药物
所需的其他试剂和设备
有关真空歧管附件的完整列表,请参阅我们网站上的Velocity指南或根据要求提供的Velocity指南。
纯水:电阻率高于18 MΩ-cm,无颗粒(>0.22µM),TOC<10 ppb
70%乙醇溶液
乙腈(HPLC级)
适用于96孔式SPE板的真空歧管
真空阱
用于收集聚糖的2 mL收集板
收集板盖(可选)
安全和处理
确保与本产品一起使用的任何玻璃、塑料制品或溶剂不含环境碳水化合物。在所有样品处理程序中使用无粉末手套,避免污染环境碳水化合物。
一旦使用,应根据当地安全规则丢弃钢板。
清理程序
程序时间线–96个样本
程序 | 时间 |
1.安装真空歧管 | 5分钟 |
2.普鲁卡因胺清洁板的制备 | 30分钟 |
3.添加样品 | 10分钟 |
4.洗脱聚糖 | 30分钟 |
5.干燥聚糖 | 8小时 |
总时间 | 2小时15分钟加上干燥时间 |
方法
1)安装真空歧管
按照通常的程序组装当前的真空歧管系统,或者按照真空歧管系统提供的说明进行操作。在歧管内放置一个收集板或其他合适的容器来收集废物(通常需要一个空的移液管尖端盒)。将顶部放回歧管上,并将普鲁卡因酰胺清洁板放在歧管顶部。
2) 普鲁卡因胺清洁板的制备
用移液管将200µL 70%乙醇溶液移入用于润湿膜的板孔中。施加真空并调节至-0.05至-0.2巴,直到所有乙醇溶液都通过孔。打开水龙头以释放真空。用移液管将200µL水注入每个孔中以清洗膜。施加真空并调节至-0.05至-0.2巴,直到水全部通过井。用移液管将200µL乙腈注入每个孔中,以填充膜。施加真空并调节至-0.05至-0.2巴,直到乙腈全部通过孔。
3) 制备普鲁卡因酰胺标记的聚糖样品
用移液管将230µL乙腈移入普鲁卡因酰胺标记的聚糖样品中(通常标记混合物+聚糖+水为20µL体积的样品)。用移液管轻轻混合样品。
4) 将样品涂抹到板上
将每个样品装入板的涂有底漆的孔中。在不施加真空的情况下,让样品在滤筒中沉淀5分钟。施加真空并调节至-0.05至-0.1巴,直到乙腈样品溶液全部通过孔。丢弃废物。
5) 洗掉非聚糖污染物
向每个含有样品的孔中加入200µL乙腈。施加真空并调节至-0.05至-0.1巴,直到乙腈全部通过孔。用200µL乙腈再洗两次,重复上述步骤。丢弃废物。
6)洗脱标记的聚糖
在真空歧管内放置96孔收集板。在顶部安装普鲁卡因胺清洁板的歧管,确保收集板与井对齐。确保收集板和歧管顶部之间的距离尽可能小,以减少普鲁卡因酰胺清洁板和收集板之间的间隙(可能需要垫片来提升收集板)。
向每个含有样品的孔中加入100µL水。施加真空并调节至-0.05至-0.1巴,直到液体全部通过孔。打开水龙头以释放真空。施加更高的真空(-0.5巴),以尽可能多地从井(和膜下方)中去除剩余的水。打开水龙头以释放真空。再次重复较高真空(-0.5巴)步骤。
向每个孔中再加入100µL水,以冲洗剩余的普鲁卡因酰胺标记样品。施加真空并调节至-0.05至-0.1巴,直到液体全部通过孔。打开水龙头以释放真空。施加更高的真空(-0.5巴),以尽可能多地从井(和膜下方)中去除剩余的水。打开水龙头以释放真空。再重复两次较高真空(-0.5巴)的步骤。这些真空步骤是为了尽可能多地从井(和膜下面)中去除剩余的水。
7)干燥样品
样品可在4℃下储存数小时,或在-20℃下存放更长时间。样品可储存在收集板中,盖上盖子,或转移到0.5mL离心瓶中。可选地,使用旋转速度真空吸尘器(约8小时)彻底干燥样品。我们不建议在此阶段加热。只有使用高质量的真空离心机,因为长时间的干燥或加热可能导致聚糖脱分析。
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