实验方案(Protocols)

无蛋白血滤液制备实验

简介

无蛋白血滤液制备实验可以用于:

(1)蛋白质沉淀剂沉淀蛋白;(2)用过滤法或离心法除去沉淀的蛋白。

操作方法

无蛋白血滤液制备实验

原理

钨酸法实验原理:钨酸钠与硫酸混合,生成钨酸,钨酸可以与血液中蛋白质结合生成蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除掉。三氯醋酸法实验原理:血液中蛋白质能与三氧醋酸作用于生成不溶性的蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除去,上清液为无蛋白血滤液.

材料与仪器

新鲜鸡血
10%钨酸钠溶液 1 3 mol L硫酸溶液
锥形瓶 移液管

步骤

一、钨酸法

实验试剂:

1. 100g/L钨酸钠溶液:称取钨酸钠100g,溶于水中加水至1000ml

2. 1/3M硫酸:取己标定的当量硫酸2份加水1份混合。

实验操作:


用吸管将全血缓慢放入蒸馏水中,每次加入试剂后充分混匀,静止10分钟后离心,取上清液备用.

二、三氯醋酸法

实验试剂:100 g/L三氯醋酸溶液

实验操作:取血清或血浆一份,三氯醋酸9份,加入血清或血浆中(边加边摇).充分混匀后离心,取上法备用.

注意事项

一、钨酸法1. 抗凝血中草酸盐过剩时,蛋白质沉淀不完全,沉淀不能变为暗褐色,此时可滴加100g/L硫酸一滴,摇匀,至沉淀变为暗褐色再进行过滤。

2. 除蛋白滤液不透明时,应将蛋白质沉淀及滤液倾回试管,按1所示方法加人硫酸,使蛋白质完全沉淀。

3. 此滤液适于葡萄糖、肌酐、肌酸、尿酸等测定.二、三氯醋酸法1. 此法所得滤液量多,酸性较强,适于较强酸性溶解的物质定测定,如钙. 磷等。

2. 不适于碱性还原法血糖定量测定。

3. 三氯醋酸易潮解,注意保存.

常见问题

本实验来源于牡丹江医学院《检验专业实验指导》。


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Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

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引用本文

阿拉丁科学.《无蛋白血滤液制备实验》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月24日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/protein-free-hemofiltrate-preparation-ex.html
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