PSMC3IP 抗体使用指南 | 研究方案
PSMC3IP 抗体使用指南 | 研究方案
PSMC3IP Antibody是一种研究级免疫试剂,专为检测PSMC3IP蛋白而设计,该蛋白在蛋白酶体组装及DNA损伤应答通路中发挥重要调控作用。
- 货号
- Ab350658
- 产品名称
- PSMC3IP抗体
- 制剂
- 仅含PBS(未添加载体蛋白或防腐剂)
- 参考克隆/来源编号
- absea#OC-683
- 建议储存条件
- 建议储存于-20°C;避免反复冻融
- 靶蛋白
- PSMC3IP(26S蛋白酶体ATP酶亚基互作蛋白)
背景:PSMC3IP及其生物学功能
PSMC3IP(26S蛋白酶体ATP酶3互作蛋白),又称HOP2或TBPIP,是一种核蛋白,在哺乳动物细胞中发挥双重功能。它作为26S蛋白酶体调控性ATP酶PSMC3的共激活因子,参与泛素介导的蛋白质降解过程。此外,PSMC3IP还参与同源重组介导的DNA修复,在减数分裂及有丝分裂DNA损伤修复过程中与MND1形成复合体,促进RAD51和DMC1介导的链侵入反应。
PSMC3IP的功能失调与卵巢功能障碍及卵巢早衰(POF)有关,使其成为生殖生物学及肿瘤学研究的重要靶点。PSMC3IP抗体使研究人员能够在多种实验模型中研究其表达水平、亚细胞定位及蛋白质-蛋白质相互作用。
产品规格与制剂
PSMC3IP抗体(货号:Ab350658)以磷酸盐缓冲液(PBS)为溶剂,不含甘油、牛血清白蛋白(BSA)或叠氮化钠防腐剂。这种纯PBS制剂在需要最小化外源蛋白或叠氮化物干扰的实验中尤为适用,例如偶联反应、邻位连接分析(PLA)或特定酶联免疫分析。
主要规格:
- 货号:Ab350658
- 来源编号:absea#OC-683
- 缓冲液:仅含PBS
- 建议储存:-20°C(长期);4°C(短期,不超过1个月)
- 注意:避免反复冻融——收货后如需多次使用,建议分装保存
注:当前来源材料中未详细说明宿主种属、克隆性、同型及已验证应用,请联系Aladdin Scientific技术支持或查阅产品说明书获取完整规格信息。
PSMC3IP抗体使用通用实验方案指南
以下指南代表检测PSMC3IP等细胞内核靶蛋白的抗体实验通用最佳操作规范。用户应针对每种应用和样本类型进行经验性优化验证。
蛋白质印迹(WB)
- 在变性条件下制备全细胞或核裂解液(RIPA或等效裂解缓冲液,含蛋白酶抑制剂混合物)。
- 通过SDS-PAGE分离蛋白质,转印至PVDF或硝酸纤维素膜。
- 用5%脱脂奶粉或5% BSA(溶于TBST)在室温封闭1小时。
- 将PSMC3IP抗体按经验确定的稀释比(推荐起始范围:1:500–1:2000)稀释于封闭液中,4°C孵育过夜。
- 用TBST洗涤3次(每次10分钟),再与相应HRP偶联二抗在室温孵育1小时。
- 使用化学发光底物显色,通过胶片或数字成像系统采集信号。
免疫荧光(IF)/免疫细胞化学(ICC)
- 用4%多聚甲醛固定细胞(室温,10分钟),用0.1–0.3% Triton X-100通透。
- 用5%正常血清(与二抗宿主匹配)封闭30–60分钟。
- 按推荐稀释比加入PSMC3IP抗体,4°C孵育过夜。
- 洗涤后用荧光素偶联二抗检测,DAPI复染细胞核。
所有稀释比例和孵育时间均需由终端用户自行优化。强烈建议在每次实验中设置阳性和阴性对照。
常见问题排查
使用PSMC3IP抗体获得非预期结果时,可参考以下排查步骤:
| 问题 | 可能原因 | 建议措施 |
|---|---|---|
| 未检测到信号 | 抗体因储存不当或反复冻融而降解 | 收货后立即分装;储存于-20°C;使用新鲜分装液 |
| 背景过高 | 封闭不充分或抗体浓度过高 | 延长封闭时间;优化抗体稀释比;提高洗涤严格性 |
| 非特异性条带(WB) | 交叉反应或上样量过多 | 减少蛋白上样量;滴定抗体浓度;参阅说明书核实预期分子量 |
| 免疫荧光核信号弱 | 通透不充分 | 提高Triton X-100浓度或延长通透时间 |
| 长期储存后信号减弱 | 纯PBS制剂缺乏稳定剂 | 加入甘油(终浓度50% v/v)后置-20°C储存;分装以减少冻融次数 |
订购信息与技术支持
PSMC3IP抗体可通过Aladdin Scientific独家购买。请访问Aladdin Scientific官网下单,或联系您所在地区的销售代表。
- 货号:Ab350658
- 产品:PSMC3IP抗体
- 制剂:仅含PBS
- 来源参考:absea#OC-683
如需咨询最佳工作稀释比、已验证应用、种属交叉反应性或定制偶联服务等技术问题,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。我们的团队可提供针对特定应用的专业指导,并提供最新产品说明书。
采购注意事项:本产品仅供科学研究使用(RUO),未经批准用于人体或动物的诊断或治疗。
常见问题
PSMC3IP抗体(Ab350658)的储存缓冲液是什么?
PSMC3IP抗体仅以磷酸盐缓冲液(PBS)为溶剂,不含甘油、BSA或叠氮化钠。如需长期储存,用户可考虑加入甘油至终浓度50%(v/v),再置于-20°C保存。
如何储存PSMC3IP抗体以保持其活性?
长期储存请置于-20°C,短期使用(不超过一个月)可置于4°C。由于该制剂仅含PBS,缺乏甘油等稳定剂,强烈建议收货后立即将抗体分装为单次使用量,以避免反复冻融导致蛋白质聚集和免疫活性丧失。
PSMC3IP抗体适用于哪些实验应用?
针对核蛋白抗体的通用最佳实验规范支持蛋白质印迹(WB)、免疫荧光(IF)和免疫细胞化学(ICC)等应用。但Ab350658的具体验证应用在现有来源材料中未有完整说明,请参阅官方产品说明书或联系Aladdin Scientific技术支持获取已确认的应用数据。
PSMC3IP抗体的纯PBS制剂是否可直接用于偶联反应?
是的,纯PBS制剂不含BSA、甘油和叠氮化钠,使PSMC3IP抗体特别适合直接进行化学偶联(如荧光染料、生物素或酶的偶联),因为这些添加剂会干扰偶联反应。但用户在偶联前应核实抗体浓度和纯度,并遵循偶联试剂盒生产商的操作说明。
PSMC3IP的生物学意义是什么?为何将其作为研究靶点?
PSMC3IP参与两个关键细胞过程:通过与ATP酶亚基PSMC3相互作用调控26S蛋白酶体,以及通过其与MND1形成的互作复合体促进RAD51/DMC1链侵入,从而参与同源重组DNA修复。PSMC3IP基因突变与卵巢早衰有关,其在DNA修复中的作用使其在肿瘤生物学和生育研究中具有重要意义。这些多样化功能使PSMC3IP成为机制研究的重要靶点。
参考文献
- Aladdin Scientific Product Datasheet: PSMC3IP Antibody, Cat. No. Ab350658 (absea#OC-683). Aladdin Scientific, internal product documentation.
- Petukhova GV, et al. The Hop2 and Mnd1 proteins act in concert with Rad51 and Dmc1 in meiotic recombination. Nature Structural & Molecular Biology, 2005. [General reference for PSMC3IP/HOP2 biology — specific details require verification.]
- Zangen D, et al. XX ovarian dysgenesis is caused by a PSMC3IP/HOP2 mutation that abolishes coactivation of estrogen-driven transcription. American Journal of Human Genetics, 2011. [Reference for PSMC3IP and premature ovarian failure — specific details require verification.]
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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