QPCT 抗体:应用、特异性及科研用途
QPCT 抗体:应用、特异性及科研用途
QPCT Antibody是一种专业免疫学试剂,专为检测和研究谷氨酰肽环转移酶(QPCT)而设计,该酶在分泌型肽和蛋白质N端焦谷氨酸的形成过程中发挥关键作用。
- 产品名称
- QPCT抗体
- 货号
- Ab349235
- 靶蛋白
- 谷氨酰肽环转移酶(QPCT)
- 靶点功能
- 催化分泌型肽和蛋白质N端谷氨酰胺残基转化为焦谷氨酸
- 研究意义
- 通过焦谷氨酸修饰的淀粉样β蛋白及其他底物,与神经退行性疾病、阿尔茨海默病及炎症过程相关
- 供应商
- Aladdin Scientific
靶点生物学:QPCT是什么?
谷氨酰肽环转移酶(QPCT),又称谷氨酰环化酶(QC),是一种催化N端谷氨酰胺残基(在特定条件下也可催化谷氨酸残基)翻译后环化形成焦谷氨酸的酶。这种修饰广泛存在于多种生物活性肽和蛋白质中,包括促甲状腺激素释放激素(TRH)、促性腺激素释放激素(GnRH)以及淀粉样β(Aβ)肽。
N端焦谷氨酸修饰可赋予底物更强的氨肽酶降解抵抗性,从而提高修饰肽的稳定性和生物活性。QPCT在多种组织中均有表达,在大脑、肝脏和分泌器官中表达尤为显著,使其成为具有广泛生理和病理意义的研究靶点。
在神经退行性疾病研究领域,由QPCT活性产生的N端截短焦谷氨酸修饰Aβ片段(Aβ3(pE)-42)被认为具有更强的聚集倾向和神经毒性,这使QPCT成为阿尔茨海默病研究中的重要研究靶标。
抗体概述与预期应用
Aladdin Scientific的QPCT抗体(货号Ab349235)是专为检测QPCT蛋白而设计的科研试剂。针对QPCT的抗体通常应用于蛋白质印迹(WB)、免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)及酶联免疫吸附试验(ELISA)等技术,使研究人员能够评估QPCT的表达水平、组织定位及蛋白质相互作用。
在为特定应用选择抗体时,研究人员应在完整产品说明书中确认已验证的应用范围、物种反应性及推荐稀释比例。如需获取Ab349235的最新验证应用数据,请参阅Aladdin Scientific产品页面。
QPCT抗体是以下研究方向的重要工具:淀粉样前体蛋白加工、神经炎症信号传导、激素肽成熟过程,以及在临床前模型中验证QPCT抑制剂的药效。
QPCT抗体蛋白质印迹(Western Blotting)推荐操作方案
以下为检测QPCT蛋白的蛋白质印迹通用操作指南。操作前请务必对照Ab349235产品说明书核实具体条件。
- 样品制备:在含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液中裂解细胞或研磨组织,采用BCA或Bradford法测定总蛋白浓度。
- 凝胶电泳:每孔上样20–40 µg总蛋白,使用SDS-PAGE凝胶(检测QPCT推荐10–12%聚丙烯酰胺凝胶,预期分子量约40 kDa),以100–120 V电压电泳至分离充分。
- 转膜:采用湿转或半干转方式将蛋白质转移至PVDF膜或硝酸纤维素膜。
- 封闭:室温下使用5%脱脂奶粉或5% BSA(溶于TBST)封闭膜1小时。
- 一抗孵育:按照厂商推荐稀释比例稀释QPCT抗体(Ab349235),4°C孵育过夜。
- 二抗与检测:用TBST洗涤3次,室温孵育适当的HRP偶联二抗1小时,再次洗涤后用ECL底物显色检测。
注意:确切稀释比例、封闭条件及预期条带大小应以最新Ab349235产品说明书为准。若说明书参数与本文不符,请标记此部分进行审核。
储存、操作与质量注意事项
妥善储存和操作QPCT抗体(Ab349235)对于维持试剂完整性和确保实验结果可重复性至关重要。抗体储存的通用最佳实践包括:
- 温度:长期储存应置于–20°C。避免反复冻融,因为反复冻融会降低抗体性能。若预计需要多次取用,收到后应立即分装。
- 缓冲液条件:大多数抗体以PBS或Tris基缓冲液供应,其中含有甘油或BSA等稳定剂以及叠氮化钠等防腐剂。具体配方请参阅Ab349235产品说明书。
- 浓度与体积:注意提供的浓度和总体积,以便按推荐稀释比例计算可进行的实验次数。
- 批次间一致性:更换抗体批次时,建议进行平行比较实验,以确保信号强度和特异性的一致性。
如遇无信号、背景过高或非特异性条带等异常结果,请参阅Aladdin Scientific技术支持资源中的故障排除部分,或直接联系我们的科学支持团队。
常见问题
QPCT是什么?为什么它是重要的研究靶点?
QPCT(谷氨酰肽环转移酶)是一种将分泌型肽和蛋白质N端谷氨酰胺残基转化为焦谷氨酸的酶。其重要性在于:QPCT活性影响激素肽的稳定性和生物活性,同时QPCT产生的焦谷氨酸修饰淀粉样β蛋白与阿尔茨海默病病理机制密切相关,因此QPCT是基础研究和转化研究的重要靶点。
QPCT抗体(Ab349235)已在哪些应用中得到验证?
针对QPCT的抗体通常用于蛋白质印迹、免疫组化、免疫荧光和ELISA。有关Ab349235的具体已验证应用和推荐条件,请参阅Aladdin Scientific网站上的最新产品说明书,因为已验证的应用可能因批次而有所不同。
如何储存QPCT抗体以维持其活性?
QPCT抗体应在–20°C条件下长期保存,收到后立即分装以避免反复冻融。实验操作过程中应置于冰上。请务必参阅Ab349235产品说明书中规定的具体储存条件,因为配方细节可能影响最佳储存要求。
测试QPCT抗体时,我可以使用哪些阳性对照样品?
已知内源性表达QPCT的细胞系或组织(例如脑组织或某些神经元细胞系)通常用作阳性对照。重组QPCT蛋白也可作为蛋白质印迹的阳性对照。在正式实验前,建议通过已发表的表达数据库核实QPCT在您所用模型系统中的内源性表达水平。
参考文献
- Schilling S, Zeitschel U, Hoffmann T, et al. Glutaminyl cyclase inhibition attenuates pyroglutamate Abeta and Alzheimer's disease-like pathology. Nature Medicine, 2008.
- Cynis H, Schilling S, Bäthge-Anhalt M, et al. Isolation of an isoenzyme of human glutaminyl cyclase: retention in the Golgi complex suggests a role in the protein maturation machinery. Journal of Molecular Biology, 2008.
- Busby WH Jr, Quackenbush GE, Humm J, Youngblood WW, Kizer JS. An enzyme(s) that converts glutaminyl-peptides into pyroglutamyl-peptides. Presence in pituitary, brain, adrenal medulla, and lymphocytes. Journal of Biological Chemistry, 1987.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)