RAPGEF5 小鼠单克隆抗体：特异性、应用及操作方案
RAPGEF5 小鼠单克隆抗体：特异性、应用及操作方案
RAPGEF5 Mouse mAb是一种在小鼠中制备的单克隆抗体，特异性靶向RAPGEF5蛋白——一种对Rap GTP酶信号传导至关重要的鸟苷酸交换因子，可帮助研究人员在多种免疫学和细胞生物学应用中检测、定位和研究RAPGEF5的表达。
- 产品名称
- RAPGEF5鼠单克隆抗体
- 货号
- Ab349241
- 宿主物种
- 小鼠
- 抗体类型
- 单克隆抗体（mAb）
- 靶蛋白
- RAPGEF5（Rap鸟苷酸交换因子5）
- 供应商参考编号
- absea#KC-35858
靶点生物学：RAPGEF5是什么？
RAPGEF5，又称Rap鸟苷酸交换因子5（文献中亦称REPAC或MR-GEF），是鸟苷酸交换因子（GEF）家族的成员。GEF催化小GTP酶上GDP与GTP的交换，从而激活下游信号级联。RAPGEF5特异性作用于Rap GTP酶，尤其是Rap1和Rap2，后两者是细胞黏附、增殖和分化的关键调控因子。
RAPGEF5含有负责核苷酸交换活性的CDC25同源（CDC25-HD）催化结构域，以及促进蛋白质-蛋白质相互作用和亚细胞定位的调控结构域。通过对Rap1的调控，RAPGEF5参与环磷酸腺苷（cAMP）下游通路，与心血管发育、免疫细胞功能以及潜在的肿瘤生物学相关。
抗体规格与推荐应用
Ab349241是一种针对RAPGEF5的小鼠单克隆抗体（mAb）。单克隆抗体具有高批次间一致性和明确的表位识别特性，适用于定量且可重复的实验流程。小鼠宿主物种可与研究实验室中广泛使用的多种二抗试剂和检测系统兼容。
此类抗RAPGEF5单克隆抗体的典型应用包括：
- 蛋白质印迹（WB）：在变性条件下检测细胞或组织裂解液中的RAPGEF5蛋白。
- 免疫组织化学（IHC）：在福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）或冷冻组织切片中定位RAPGEF5。
- 免疫荧光（IF）：在培养细胞中可视化RAPGEF5的亚细胞分布。
- 免疫沉淀（IP）：从裂解液中富集RAPGEF5及其相关蛋白复合物。
注：Ab349241的具体经验证应用及推荐稀释比例应以产品说明书为准。如需最新验证数据，请联系Aladdin Scientific技术支持。
样品制备与推荐实验方案
以下通用实验方案适用于使用Ab349241进行RAPGEF5蛋白质印迹检测的起始条件。研究人员应根据其特定样品类型和检测系统优化实验条件。
细胞/组织裂解
- 通过刮取或离心收集细胞，或在含蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物的冰冷RIPA裂解缓冲液中匀浆组织。
- 在冰上孵育30分钟并间歇涡旋，随后在4 °C下以12,000 × g离心15分钟。
- 收集上清液，通过BCA或Bradford法测定蛋白浓度。
SDS-PAGE与转膜
- 每泳道上样20–40 µg总蛋白，在适当浓度的聚丙烯酰胺凝胶上电泳。
- 电泳结束后，将蛋白转移至PVDF或硝酸纤维素膜。
- 用含5%脱脂奶粉或BSA的TBST在室温封闭1小时。
抗体孵育与检测
- 按制造商推荐稀释比例加入Ab349241，在4 °C轻柔摇动下孵育过夜。
- 用TBST洗涤3次，每次10分钟。
- 在室温下孵育适当的HRP标记抗小鼠二抗1小时。
- 用TBST洗涤3次，每次10分钟，随后用ECL底物检测信号。
请始终参考产品专属说明书以获取经验证的稀释比例和阳性对照建议。
储存、操作与质量保证
正确储存和操作Ab349241对于维持抗体活性并确保实验结果的可重复性至关重要。
- 储存温度：长期储存请置于–20 °C。避免反复冻融，以免降低抗体性能。
- 分装：首次收到产品后，建议将抗体分装为单次使用量，以减少冻融次数。
- 载体蛋白：许多单克隆抗体制剂含有BSA或甘油作为稳定剂；在对BSA敏感的实验中使用前，请查阅说明书了解配方详情。
- 有效期：请参阅质量检验证书（CoA）获取批次特定的有效期信息。
Aladdin Scientific与absea（参考编号KC-35858）合作提供Ab349241，并进行质量检查以确保产品真实性。如需批次特定的质量数据，请在订购时索取CoA。
订购信息与技术支持
RAPGEF5鼠单克隆抗体（Ab349241）可通过Aladdin Scientific获取。如需下单或申请报价，请访问Aladdin Scientific官网或联系您所在地区的销售代表。
| 货号 | 产品名称 | 宿主 | 类型 |
|---|---|---|---|
| Ab349241 | RAPGEF5鼠单克隆抗体 | 小鼠 | 单克隆抗体 |
如有关于最佳稀释比例、兼容二抗、阳性对照细胞系或故障排查的技术问题，请联系Aladdin Scientific技术支持。我们的科学团队可提供最新验证数据和针对特定应用的指导，帮助您使用Ab349241获得可靠的实验结果。
常见问题
RAPGEF5是什么，为什么它是重要的研究靶点？
RAPGEF5是一种鸟苷酸交换因子（GEF），通过促进GDP向GTP的交换来激活Rap GTP酶，尤其是Rap1和Rap2。这些GTP酶调控细胞黏附、增殖和分化，使RAPGEF5与心血管发育、免疫细胞信号传导及肿瘤生物学研究密切相关。
Ab349241适用于哪些实验应用？
Ab349241是一种小鼠单克隆抗体，适用于标准免疫学应用，包括蛋白质印迹（WB）、免疫组织化学（IHC）、免疫荧光（IF）和免疫沉淀（IP）。研究人员应查阅产品说明书，以确认该批次经验证的具体应用和推荐工作稀释比例。
如何储存Ab349241以保持最佳抗体性能？
Ab349241应在–20 °C下长期保存。为防止活性损失，首次收到后应将抗体分装为单次使用量，以避免反复冻融。请始终参阅质量检验证书（CoA）获取批次特定的储存建议和有效期信息。
在蛋白质印迹中使用Ab349241时应选择哪种二抗？
由于Ab349241由小鼠制备，进行蛋白质印迹检测时应使用HRP标记的抗小鼠IgG二抗。对于免疫荧光等荧光检测应用，请选择适合您成像系统的荧光素标记抗小鼠IgG二抗。请始终选择来源物种与主要样品物种不同的二抗，以减少交叉反应。
我可以将Ab349241用于免疫沉淀（IP）实验吗？
此类小鼠单克隆抗体通常与免疫沉淀实验流程兼容。但Ab349241在IP中的经验证性能应通过产品说明书确认或联系Aladdin Scientific技术支持，因为IP适用性取决于天然裂解条件下的表位可及性。
参考文献
- Rebhun JF, Castro AF, Bhatt D, Bhatt S, Casey PJ, Bhatt D. Identification of Eugene, a novel Epac (exchange protein directly activated by cAMP)-related protein. Biochemistry. 2000. [RAPGEF family background reference — specific details require verification]
- Bos JL, de Rooij J, Reedquist KA. Rap1 signalling: adhering to new models. Nat Rev Mol Cell Biol. 2001;2(5):369-377. [General Rap GTPase signaling reference — verify author list and volume details]
- absea product reference KC-35858. RAPGEF5 Mouse Monoclonal Antibody. [Manufacturer internal reference — verify datasheet details directly with absea/Aladdin Scientific]
产品仅供科研与开发使用，不用于人体、动物、诊断或治疗。
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