本实验主要用于检测麻黄碱类兴奋剂。

操作方法

芯片毛细管电泳法

原理

研究用芯片毛细管电泳激光诱导荧光检测系统分离测定经7-chloro-4-nitrobenzo-2-oax-1，3-diazole(NBD-Cl)衍生的麻黄碱和伪麻黄碱的实验条件。采用胶束毛细管电动色谱分离体系(12 mmol/L SDS+10 mmol/L硼砂缓冲液,pH9.0)，在45 mm长的通道上实现了麻黄碱和伪麻黄碱的快速分离，一次分离小于1.5min。10～100 mg/L范围内,峰高与浓度呈良好的线性关系，麻黄碱、伪麻黄碱的检出限分别是0.83 mg/L和1.10 mg/L。

材料与仪器

尿液样品
盐酸麻黄碱标准品 盐酸伪麻黄碱标准品 NBD2Cl 十二烷基磺酸钠 PEP标准溶液 乙腈
共聚焦式激光诱导荧光检测系统 倒置显微镜 光电倍增管

步骤

1. 芯片的制作

十字通道玻璃芯片制备。分离通道总长45 mm(有效长度38 mm)，进样通道总长10 mm，通道顶宽50 μm，深15 μm。

2. 尿样预处理　

取5 mL尿样于20 mL离心管，加入2 mL乙醚和1 g无水Na₂SO₄，振荡5 min后离心分离。移取上层有机相于2 mL离心管，用N₂吹干，加100 μL水溶解残留物。

3. 待测物的衍生　

移取EP和PEP混合标准溶液(或上述溶液)100μL于2 mL的离心管，加入100μL 100 mmol/L硼砂缓冲液(pH8.4)，25 mmol/L NBD-Cl溶液200 μL，用水稀释至1 mL后，50℃水浴中温浴30 min。

4.分离测定　

十字通道依次用0.1 mol/L NaOH、水、运行缓冲溶液各冲洗20、10、20 min。在芯片的试样废液池、缓冲液池、缓冲液废液池中加入运行缓冲液,并使通道内充满运行缓冲液;在试样液池中加入试样溶液,使激光束聚焦于芯片分离通道下游离十字交叉口38 mm处。按下列程序分别向4个储液池施加电压,进行进样和分离操作：进样30 s，试样液池、试样废液池、缓冲液池、缓冲液分别施加1000、0、830、1000 V；分离120 s，试样液池、试样废液池、缓冲液池分别施加2170、2170、2600和0 V电压。

注意事项

1. 注意夹流电压的选择。

2. 不同SDS浓度对分离影响不同。

3. 选择合适的pH、分离电压。

常见问题

来源《芯片毛细管电泳激光诱导荧光快速分离检测麻黄碱类兴奋剂》

如需了解更多产品详情，请前往阿拉丁官网查询。

https://www.aladdin-e.com