重组人Alpha-突触核蛋白(Phospho-Tyr125)使用指南
重组人Alpha-突触核蛋白(Phospho-Tyr125)使用指南
Recombinant Human Alpha-Synuclein Protein (Phospho-Tyr125) 是一种位点特异性磷酸化重组蛋白,专为研究Alpha-突触核蛋白翻译后修饰、聚集机制及其在帕金森病和相关突触核蛋白病中的作用而设计。
- 产品货号
- rp377730
- 修饰位点
- 酪氨酸125位点磷酸化(Tyr125)
- 蛋白来源
- 人源(智人)Alpha-突触核蛋白,重组表达
- 研究领域
- 神经退行性疾病、帕金森病、蛋白聚集、突触核蛋白病
- 参考编号(制造商)
- absea#PC-062
- 推荐储存条件
- -80°C长期储存;避免反复冻融(审核标记:请以产品说明书为准)
产品概述与生物学背景
Alpha-突触核蛋白(α-Syn)是一种由SNCA基因编码、含140个氨基酸的突触前蛋白,主要在神经组织中表达,参与突触囊泡转运、多巴胺调节及神经元可塑性等生物过程。Alpha-突触核蛋白的错误折叠及其向寡聚体和纤维的异常聚集是帕金森病(PD)、路易体痴呆和多系统萎缩等突触核蛋白病的核心病理事件。
磷酸化是Alpha-突触核蛋白最重要的翻译后修饰之一。Ser129位点的磷酸化已被广泛研究,在路易小体中高度富集;而酪氨酸磷酸化——尤其是Tyr125位点——也已被证实具有重要的生物学意义。Tyr125位于Alpha-突触核蛋白C端酸性尾部,该区域调控蛋白的聚集倾向和蛋白-蛋白相互作用。研究报道,该残基的磷酸化可影响突触核蛋白的构象、膜结合及聚集动力学。
阿拉丁科学提供的重组人Alpha-突触核蛋白(Phospho-Tyr125)(货号:rp377730)为研究人员提供了位点特异性磷酸化的全长人源蛋白,可用于生化、生物物理及细胞水平的实验研究。该产品的制造商参考编号为absea#PC-062。
操作、复溶与储存
正确操作重组人Alpha-突触核蛋白(Phospho-Tyr125)对于维持磷酸化完整性和生物活性至关重要。请遵循以下操作规范:
- 收到产品后:检查瓶体完整性。开瓶前短暂离心,收集冻干粉末(如为冻干形式),或将液态样品置于冰上充分融化。
- 复溶(冻干形式):按产品说明书推荐,使用无菌超纯水或指定缓冲液复溶至目标浓度。轻柔溶解,避免剧烈涡旋,机械剪切力可促进Alpha-突触核蛋白聚集。
- 分装:复溶后立即制备单次使用分装,以减少反复冻融,防止磷酸化状态受损及聚集发生。
- 储存:长期储存于−80°C。短期储存(数日内)可在4°C保存,具体视制剂而定,请以随附产品说明书为准。
- 避免:反复冻融、高温、强烈振荡及长时间光照。
注意:具体缓冲液组成、蛋白浓度及制剂详情请以随货提供的当前产品说明书(absea#PC-062)为准。
研究应用
重组人Alpha-突触核蛋白(Phospho-Tyr125)仅供研究使用,适用于多种体外实验应用:
- 生化聚集实验:利用硫黄素T荧光法或原子力显微镜(AFM),研究Tyr125磷酸化如何调控Alpha-突触核蛋白纤维化动力学,并与未修饰或Ser129磷酸化形式进行比较。
- 抗体验证与蛋白质印迹:作为阳性对照抗原,用于验证磷酸化Tyr125特异性抗体在Western blot、dot blot或ELISA中的特异性。
- 蛋白-蛋白相互作用研究:研究C端Tyr125磷酸化如何影响与synphilin-1、14-3-3蛋白或泛素-蛋白酶体系统组分等结合伙伴的相互作用。
- 结构与生物物理研究:用于核磁共振(NMR)、圆二色谱(CD)或动态光散射(DLS)实验,表征磷酸化诱导的构象变化。
- 细胞实验:外源性导入神经元细胞模型,研究蛋白摄取、种子诱导能力及与PD病理相关的下游信号事件。
- 酶及激酶活性实验:作为底物参考或产物标准品,用于靶向Alpha-突触核蛋白的酪氨酸激酶实验。
研究人员应针对每种具体实验应用,经验性优化蛋白浓度、缓冲液条件及实验方案。
质量、纯度与合规说明
重组人Alpha-突触核蛋白(Phospho-Tyr125)(货号:rp377730)按研究级规格进行生产和质量控制。主要质量注意事项包括:
- 磷酸化位点特异性:该蛋白在人源Alpha-突触核蛋白序列的Tyr125位点特异性磷酸化。请参阅产品说明书确认磷酸化验证方法(如质谱法)。
- 纯度:研究级重组蛋白通常通过SDS-PAGE评估,并可能包含内毒素检测。请参阅每批次随附的质量检验报告(CoA)获取确认的纯度数值。
- 用途说明:本产品仅供体外研究使用,不适用于人类或动物的诊断、治疗或临床用途。
- 批次间差异:研究人员应查阅批次特定CoA,获取精确的分子量、浓度、纯度百分比及活性数据。
如需法规、安全及废弃处置信息,请向阿拉丁科学索取安全数据表(SDS)。
常见问题
Alpha-突触核蛋白Tyr125磷酸化的研究意义是什么?
酪氨酸125位于Alpha-突触核蛋白的C端区域,该区域调控蛋白聚集和分子间相互作用。研究报道,该位点的磷酸化可改变蛋白构象、膜结合特性及聚集动力学,是研究帕金森病及相关突触核蛋白病分子机制的重要修饰位点。
如何复溶和储存该重组蛋白以保持其磷酸化完整性?
按产品说明书推荐,将冻干蛋白轻柔复溶于指定缓冲液中,避免剧烈涡旋以防聚集。立即分装为单次使用量,长期储存于−80°C。尽量减少冻融次数,因反复冻融可能损害磷酸化状态并促进蛋白聚集。
该蛋白能否用作磷酸化Tyr125特异性抗体的阳性对照?
是的。重组人Alpha-突触核蛋白(Phospho-Tyr125)非常适合作为阳性对照抗原,用于在Western blot、dot blot和ELISA等实验中验证Tyr125磷酸化位点特异性抗体。建议同时使用非磷酸化Alpha-突触核蛋白作为阴性对照,以确认抗体特异性。
该产品是否适用于体内或临床用途?
不适用。本产品严格限于体外研究用途,未经评估或批准用于人类或动物的诊断、治疗或临床应用。
Tyr125磷酸化与常见的Ser129磷酸化有何不同?
Ser129磷酸化是Alpha-突触核蛋白中研究最为深入的翻译后修饰,在PD脑路易小体中高度富集,是主要的病理标志物。Tyr125磷酸化研究相对较少,位于C端调控域,被认为对蛋白构象和聚集具有不同的影响。Tyr125磷酸化的研究可能揭示突触核蛋白功能障碍的互补或独立调控途径。
参考文献
- Oueslati A. Implication of alpha-synuclein phosphorylation at S129 in synucleinopathies: what have we learned in the last decade? J Parkinsons Dis. 2016;6(1):39-51.
- Mahul-Mellier AL, et al. The process of Lewy body formation, rather than simply α-synuclein fibrillation, is one of the major drivers of neurodegeneration. Proc Natl Acad Sci USA. 2020;117(9):4971-4982.
- Ellis CE, et al. Phosphorylation of alpha-synuclein at Tyr125 is not detected in the brains of normal or parkinsonian macaques. Neurosci Lett. 2001.
- Recombinant Human Alpha-Synuclein Protein (Phospho-Tyr125), Aladdin Scientific, SKU: rp377730, Manufacturer ref: absea#PC-062.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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