重组人CDC42BPB蛋白:常见问题与关键参数
重组人CDC42BPB蛋白:常见问题与关键参数
Recombinant Human CDC42BPB Protein 是一种研究级重组激酶,可帮助科研人员在明确、可重复的体外系统中研究CDC42调控的细胞骨架动力学和肌球蛋白轻链磷酸化过程。
- 产品名称
- 重组人CDC42BPB蛋白
- 货号
- rp371440
- 蛋白别名
- MRCKbeta、MRCK-beta、CDC42结合蛋白激酶β
- 蛋白类别
- 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶;Rho GTP酶效应蛋白
- 物种来源
- 人(智人)
- 用途
- 仅供体外研究使用,不得用于诊断或治疗目的
- 储存建议
- 避免反复冻融,首次使用时分装
什么是CDC42BPB?其科学意义何在?
CDC42BPB(CDC42结合蛋白激酶β),又称MRCKbeta(强直性肌营养不良蛋白激酶相关CDC42结合激酶β),是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,属于DMPK(强直性肌营养不良蛋白激酶)家族。它作为小型Rho GTP酶CDC42的下游效应蛋白,在调节肌动蛋白细胞骨架和肌动球蛋白收缩性方面发挥核心作用。
CDC42BPB通过磷酸化肌球蛋白轻链(MLC)并抑制肌球蛋白轻链磷酸酶(通过MYPT1磷酸化),促进F-肌动蛋白束化、片状伪足形成及定向细胞迁移。这些功能使CDC42BPB与细胞极性、肿瘤细胞侵袭、神经元形态发生及细胞骨架力学生物学等研究领域密切相关。
阿拉丁科学重组人CDC42BPB蛋白(rp371440)为研究人员在无细胞及重建生化检测体系中研究上述激酶依赖性机制提供了明确的研究工具。
表达体系、纯度及质量规格
重组蛋白可通过多种表达体系生产,各体系在下游应用方面各具优势。CDC42BPB是一种含多个结构域的大型激酶,表达宿主的选择对蛋白折叠、翻译后修饰及酶活性均有显著影响。
表达宿主:当前资料中未列明rp371440的具体表达体系。如需了解该蛋白是在大肠杆菌、杆状病毒/昆虫细胞还是哺乳动物细胞中生产,请查阅阿拉丁科学网站上的产品数据表,或直接联系技术支持。
标签与纯化:重组CDC42BPB蛋白通常带有亲和标签(如His标签或GST标签),以便通过亲和层析进行纯化。rp371440的具体标签及纯度信息请以产品数据表为准。
质量控制:阿拉丁科学对重组蛋白产品实施标准质控措施,可能包括SDS-PAGE纯度评估、Western blot身份确认及适用时的活性检测。每批产品的批次特异性数据请参见随附的质量检验报告(CoA)。
储存、操作及复溶指南
妥善储存与操作对保持重组蛋白的活性和完整性至关重要。以下通用最佳实践适用于重组人CDC42BPB蛋白(rp371440);请务必参照产品专用数据表中的确认条件。
- 长期储存:重组蛋白通常在−70 °C或−80 °C下长期保存。根据制剂配方,在−20 °C下短期保存也可能适用。
- 避免反复冻融:反复冻融会导致蛋白变性并降低酶活性。首次解冻后,应将蛋白分装为单次用量后再冷冻保存。
- 复溶:若产品为冻干粉,请按数据表推荐的缓冲液复溶(通常为无菌水或含甘油或BSA作为稳定剂的蛋白储存缓冲液)。开瓶前应将小瓶平衡至室温,轻柔溶解,避免涡旋振荡。
- 工作浓度:每种检测方法的工作浓度需通过实验确定。建议在一定蛋白浓度范围内进行预实验,以确定线性范围和最佳信号。
- 载体蛋白:在稀释缓冲液中加入BSA(0.1–0.5%)有助于防止低蛋白浓度下的吸附损失。
科研应用:如何使用CDC42BPB重组蛋白
重组人CDC42BPB蛋白适用于多种体外生化及无细胞研究应用,典型用途包括:
- 激酶活性检测:CDC42BPB可磷酸化底物,包括肌球蛋白调节轻链(MLC2)和MYPT1。可采用放射性(³²P-ATP)或非放射性(ADP-Glo™、TR-FRET)激酶检测方案测定其催化活性并筛选抑制剂。
- 抑制剂筛选与药物发现:CDC42BPB与肿瘤细胞侵袭性密切相关,是肿瘤学研究中的靶标之一。重组CDC42BPB蛋白支持生化抑制剂谱分析和IC₅₀测定。
- 蛋白质-蛋白质相互作用研究:CDC42BPB通过其CRIB(Cdc42/Rac交互结合)结构域与活化的CDC42相互作用。可利用重组蛋白通过Pull-down、共免疫沉淀或表面等离子体共振(SPR)等方法表征这些相互作用。
- 结构与生物物理研究:纯化的重组蛋白可用于晶体学、冷冻电镜样品制备或氢氘交换质谱(HDX-MS)研究。
- 抗体验证:重组CDC42BPB蛋白可作为阳性对照抗原,用于Western blot、ELISA及点印迹实验中anti-CDC42BPB抗体的验证。
所有列出的应用均仅供研究使用,尚未经过临床或诊断目的验证。
订购、供货情况与技术支持
如何订购:重组人CDC42BPB蛋白可通过阿拉丁科学订购,货号为rp371440。可通过阿拉丁科学官方网店下单,或联系所在地区的销售代表。大批量订购及定制配方可按需申请。
数据表及文件:完整产品数据表(包括确认的表达宿主、标签、纯度、制剂、储存条件及质量控制数据)可在产品页面获取。每批货品均附质量检验报告(CoA),也可通过客户服务部门按批号申请。
技术支持:如有应用相关问题、实验方案指导或故障排除需求,请联系阿拉丁科学技术支持团队。联系时请准备好货号(rp371440)及批号,以便快速获得支持。
收货时的运输与储存:重组蛋白通常以干冰运输。收货后请立即按数据表规定转移至适当储存温度。使用前请检查产品是否有损坏或解冻迹象。
常见问题
CDC42BPB是什么?它在细胞中发挥什么功能?
CDC42BPB(又称MRCKbeta)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,作为小型GTP酶CDC42的下游效应蛋白发挥作用。它通过磷酸化肌球蛋白轻链和MYPT1来调节肌动球蛋白收缩性,从而控制细胞骨架组织、细胞极性和定向细胞迁移。
rp371440采用何种表达体系生产?
rp371440(重组人CDC42BPB蛋白)的具体表达宿主未在现有资料中注明。请参阅阿拉丁科学官网上的官方产品数据表,或联系技术支持以获取确认的表达体系、标签及制剂信息。
如何储存和操作重组人CDC42BPB蛋白以维持其活性?
长期保存请将蛋白储存于−70 °C至−80 °C,并在首次解冻后分装为单次用量,避免反复冻融。若从冻干粉复溶,请使用数据表指定的缓冲液,轻柔溶解,避免涡旋振荡。有关确认的储存条件,请务必参阅产品专用数据表及质量检验报告(CoA)。
重组人CDC42BPB蛋白适用于哪些研究应用?
rp371440适用于体外激酶活性检测、抑制剂筛选、蛋白质-蛋白质相互作用研究(如与CDC42的Pull-down或SPR实验)、结构与生物物理分析,以及作为阳性对照抗原用于抗体验证。所有用途均仅限科研目的。
如何订购rp371440?可获取哪些产品文件?
重组人CDC42BPB蛋白(rp371440)可通过阿拉丁科学官方网店或联系当地销售代表订购。产品数据表和批次特异性质量检验报告(CoA)均可获取;CoA可通过客服部门按批号申请。
CDC42BPB重组蛋白是否可用于药物发现中的抑制剂筛选?
可以。由于CDC42BPB激酶活性与肿瘤细胞侵袭性和细胞骨架重塑密切相关,它是肿瘤学抑制剂筛选的相关靶标。重组CDC42BPB蛋白支持使用ADP-Glo™或TR-FRET等标准检测方案进行生化激酶抑制剂谱分析和IC₅₀测定。上述应用均仅供研究使用。
参考文献
- Leung T, et al. A novel serine/threonine kinase binding the Ras-related RhoA GTPase which translocates the kinase to peripheral membranes. J Biol Chem. 1998.
- Zhao Z and Manser E. MRCKα and MRCKβ: Closely related sister kinases with conserved functions in the cytoskeleton. J Cell Sci. 2015.
- Aladdin Scientific. Recombinant Human CDC42BPB Protein, SKU rp371440. Product Datasheet.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)