重组人CDCA3蛋白:研究指南与实验方案
重组人CDCA3蛋白:研究指南与实验方案
Recombinant Human CDCA3 Protein 是一种重要的科研试剂,使科学家能够在体外研究细胞周期调控、有丝分裂进程及CDCA3相关致癌通路的分子机制。
- 产品名称
- 重组人CDCA3蛋白
- 货号
- rp374385
- 蛋白功能
- CDCA3(细胞分裂周期相关蛋白3)参与细胞周期调控和有丝分裂进程,作为SCF泛素连接酶复合体的组成部分,促进有丝分裂启动。
- 主要应用
- 体外生化分析、蛋白质相互作用研究、Western blot标准品、细胞周期研究、肿瘤学靶点验证
- 储存建议
- 收到后立即于-80°C保存;避免反复冻融,以保持蛋白活性。
- 表达系统
- 重组蛋白在异源系统中表达(具体宿主系统请参阅产品说明书;需审核确认)。
背景:CDCA3生物学特性与研究意义
CDCA3,又称细胞分裂周期相关蛋白3(在部分文献中亦称为Tome-1),是一种细胞周期调控蛋白,在控制G2/M期转换中发挥重要作用。它作为SCF(Skp1–Cullin–F-box)E3泛素连接酶复合体的接头亚基,促进Wee1激酶等关键底物的泛素化降解,从而推动有丝分裂启动。
据报道,CDCA3在多种肿瘤类型中表达升高,使其成为肿瘤学研究的热点,并被视为潜在的生物标志物或治疗靶点。研究有丝分裂检查点机制、细胞增殖或肿瘤生物学的科研人员,通常需要高质量重组CDCA3蛋白用于体外生化实验、结构研究和检测方法开发。
Aladdin Scientific重组人CDCA3蛋白(货号:rp374385)为研究人员提供可靠的即用型试剂,满足上述研究应用需求。
复溶与操作方案
正确处理重组蛋白对于维持其生物活性、确保实验结果的可重复性至关重要。使用重组人CDCA3蛋白时,请遵循以下步骤:
- 开瓶前离心:打开瓶盖前,短暂低速离心(如低速离心5–10秒),使冻干或冷冻物料沉积于瓶底。
- 复溶:用适当缓冲液复溶蛋白(通常为无菌去离子水或PBS,pH 7.4;如需提高稳定性,可添加载体蛋白如0.1% BSA)。复溶体积和缓冲液组成请参阅产品说明书。
- 轻柔混匀:通过吸管轻轻吹打或低速涡旋混匀,切勿剧烈涡旋,以免蛋白变性。
- 分装:复溶后立即制备单次使用的分装份,避免反复冻融导致蛋白质完整性和活性下降。
- 复溶后储存:短期使用的分装样品可于4°C保存不超过1周;长期保存请置于-20°C至-80°C。具体稳定性数据请参阅产品说明书。
注意:复溶条件(缓冲液、体积、添加剂)应以随产品附带的说明书为准。上述内容为重组蛋白的通用最佳操作规范。
推荐应用与实验指南
重组人CDCA3蛋白适用于多种体外研究应用。以下指南概述了常见用途及各自的注意事项:
- 生化分析(如泛素化分析):CDCA3可作为重建SCF复合体分析的组分或底物,用于研究其在泛素介导蛋白水解中的作用。应针对每种检测形式经验性优化蛋白浓度。
- 蛋白质相互作用研究(共免疫沉淀、pull-down、SPR):以CDCA3蛋白作为诱饵或猎物,鉴定参与细胞周期调控的结合伴侣。确保设置适当对照,包括使用无关蛋白的阴性对照。
- Western Blot标准品:重组CDCA3蛋白可作为分子量和免疫反应性标准品,用于验证Western blot实验中抗CDCA3抗体的特异性。
- ELISA开发:可用作靶向CDCA3的夹心ELISA开发中的包被抗原或检测抗原。
- 无细胞表达与功能研究:适用于需要添加外源重组蛋白以补充或重建无细胞系统活性的体外功能分析。
始终对蛋白用量进行梯度滴定并针对每种特定检测优化条件。请参阅已发表的CDCA3生物学文献以获取检测设计指导。
质量、安全与法规注意事项
使用重组人CDCA3蛋白时,研究人员应注意以下质量与安全事项:
- 纯度与质量:重组蛋白在受控条件下生产。请查阅随每批产品提供的质量检测报告(CoA),了解该批次的纯度等级、内毒素水平和活性数据。
- 内毒素含量:若蛋白用于细胞实验或体内研究,请验证内毒素水平是否符合目标应用的可接受限值。如需批次特定的内毒素数据,请参阅产品说明书或联系Aladdin Scientific技术支持。
- 生物安全:重组人CDCA3蛋白源自在重组宿主中表达的人类基因序列。请按照所在机构针对重组蛋白的生物安全规程进行操作,使用前请查阅Aladdin Scientific提供的安全数据表(SDS)。
- 仅供科研使用:本产品仅供体外科学研究使用,不适用于诊断、治疗或兽医学用途。
- 批次间一致性:对于需要严格重复性的研究,尽量从同一批次购买足量产品。如需批次预留咨询,请联系Aladdin Scientific。
常见问题
CDCA3是什么?它在细胞周期研究中为何重要?
CDCA3(细胞分裂周期相关蛋白3)是SCF E3泛素连接酶复合体中的一种接头蛋白,通过促进Wee1激酶的泛素化降解来推动有丝分裂启动。CDCA3在多种肿瘤类型中存在过表达,使其成为肿瘤学研究的重要靶点,也是研究G2/M检查点调控的热门蛋白。
如何储存重组人CDCA3蛋白以维持其活性?
收到产品后应立即于-80°C保存。复溶后请制备单次使用的分装份,以避免反复冻融导致蛋白质完整性下降和活性损失。正在使用的分装样品可于4°C短期保存(约一周)。具体稳定性数据请以产品说明书为准。
重组人CDCA3蛋白适用于哪些应用?
重组人CDCA3蛋白适用于体外生化分析(如泛素化分析)、蛋白质相互作用研究(共免疫沉淀、pull-down、表面等离子体共振)、Western blot阳性对照或分子量标准品、ELISA抗原开发以及无细胞功能分析。本产品仅供科研使用,不适用于临床或诊断目的。
如何复溶重组人CDCA3蛋白?
开瓶前先短暂离心,然后用无菌去离子水或PBS(pH 7.4)复溶,可选择性添加0.1% BSA作为载体蛋白以提高稳定性。通过吸管轻轻吹打混匀,避免剧烈涡旋。具体复溶体积和缓冲液请以随产品附带的说明书为准。
重组人CDCA3蛋白是否经过内毒素检测?
内毒素检测通常在生产过程中进行,但批次特定的内毒素数据应通过查阅随货提供的质量检测报告(CoA)或联系Aladdin Scientific技术支持加以确认。若该蛋白用于细胞实验或内毒素污染可能干扰结果的任何应用,此项确认尤为重要。
参考文献
- Ayad NG, Rankin S, Murakami M, Jebanathirajah J, Gygi S, Kirschner MW. Tome-1, a trigger of mitotic entry, is degraded during G1 via the APC. Cell. 2003;113(1):101-113.
- Penas C, Ramachandran V, Bhaskara S, et al. Casein kinase 1delta-dependent Wee1 protein degradation. Journal of Biological Chemistry. 2014;289(27):18893-18903.
- Aladdin Scientific. Recombinant Human CDCA3 Protein, SKU rp374385. Product Datasheet. Aladdin Scientific.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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