常见问题(FAQs)

重组人CHKB蛋白:常见问题与技术指南

Recombinant Human CHKB Protein 是人类胆碱激酶β(CHKB)酶的重组形式,专为研究磷脂生物合成、激酶活性及相关代谢与疾病通路而生产。

产品名称
重组人CHKB蛋白
货号
rp375976
蛋白功能
催化胆碱磷酸化生成磷酸胆碱,是CDP-胆碱(Kennedy)通路合成磷脂酰胆碱的关键步骤
基因名称
CHKB(又称CHK、CHETK)
物种来源
人类(智人)
应用
生化分析、酶活性研究、药物发现、磷脂代谢研究
储存建议
建议于-80°C储存,避免反复冻融(重组蛋白通用建议,请以产品说明书为准)

CHKB是什么?其研究意义何在?

CHKB(胆碱激酶β)是由人类CHKB基因编码的一种酶,催化CDP-胆碱(Kennedy)通路的第一步限速反应:以ATP为磷酸基团供体,将胆碱磷酸化生成磷酸胆碱。该反应是从头合成磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)的必要步骤,而这两者是真核细胞膜中最主要的磷脂成分。

CHKB在维持细胞膜完整性和磷脂稳态中发挥关键作用。CHKB基因突变与伴线粒体结构异常的先天性肌营养不良(巨线粒体型)相关,凸显了其重要的生理意义。此外,由于磷脂代谢异常是多种癌细胞的标志特征,胆碱激酶活性在肿瘤学研究中也备受关注。

重组人CHKB蛋白使研究人员能够在受控的体外环境中研究激酶动力学、筛选抑制剂,并探索CHKB相关疾病的分子机制。

产品规格与质量

阿拉丁科学重组人CHKB蛋白(货号:rp375976)专为生化及无细胞研究应用而设计。完整规格信息请以最新产品说明书为准,以下为此类重组激酶蛋白的通用参考信息:

  • 表达体系:通常采用原核(如大肠杆菌)或真核(如昆虫细胞或HEK293细胞)表达体系生产,具体请查阅产品说明书。
  • 纯度:阿拉丁重组蛋白通常经SDS-PAGE检测纯度>85–95%,具体纯度请参见产品质检报告(CoA)。
  • 标签:可能含有亲和纯化标签(如His标签)以便纯化,标签类型及位置请查阅说明书。
  • 制剂:通常以冻干形式或稳定缓冲液形式提供,详情请查阅产品说明书。
  • 活性:可能经过功能活性验证(如对胆碱底物的激酶活性),批次特异性数据请参见CoA。

注意:所有具体数值(分子量、精确纯度、内毒素水平、活性单位)均需根据货号rp375976的产品说明书和质检报告核实。

储存、操作与复溶

正确储存和操作重组人CHKB蛋白对于维持其生物活性和实验重复性至关重要。以下指南为重组蛋白操作的最佳实践,请以产品说明书中的具体指导为准。

储存

  • 长期储存请置于-80°C。
  • 短期使用(1–2周内),根据制剂不同可在-20°C储存。
  • 避免反复冻融,以防蛋白聚集、活性丧失及降解,建议首次使用时分装。

复溶(适用于冻干产品)

  • 开瓶前将小瓶置于室温平衡,以减少冷凝水影响。
  • 按说明书推荐体积加入无菌水或缓冲液,达到所需浓度。
  • 轻柔吸打或摇动溶解,切勿剧烈涡旋。
  • 静置10–15分钟待充分溶解后,短暂离心再使用。

操作

  • 实验过程中请置于冰上。
  • 使用低蛋白吸附管和吸头,减少蛋白吸附损失。
  • 在稀释缓冲液中添加载体蛋白(如0.1% BSA)有助于在长时间分析中稳定蛋白。

重组人CHKB蛋白的研究应用

重组人CHKB蛋白是一种多功能试剂,适用于多种研究场景:

  • 酶动力学研究:利用标准放射性或荧光激酶分析方法,测定胆碱磷酸化的动力学参数(Km、Vmax、kcat)。
  • 抑制剂筛选:作为靶标酶用于高通量或聚焦筛选,鉴定胆碱激酶活性的小分子抑制剂,与癌症代谢和肌营养不良研究相关。
  • 结构与生物物理研究:用于晶体学、冷冻电镜或生物物理分析(如SPR、ITC),表征CHKB结构及底物相互作用。
  • 抗体验证:作为阳性对照抗原,用于Western blot或ELISA格式验证抗CHKB抗体。
  • 疾病机制研究:探究CHKB相关先天性肌营养不良(巨线粒体型)及其他磷脂代谢障碍的分子机制。
  • 药物发现:支持针对Kennedy通路治疗程序的靶标结合分析和构效关系(SAR)研究。

常见问题排查

若使用重组人CHKB蛋白时出现意外结果,请参考以下排查步骤:

问题可能原因建议措施
无酶活性或活性偏低储存不当或反复冻融导致蛋白降解使用新鲜分装蛋白;核实储存条件;查阅CoA活性数据
蛋白沉淀或聚集复溶方法不当或缓冲液不相容按说明书复溶流程操作;使用推荐缓冲液并轻柔混合
SDS-PAGE条带大小异常标签对分子量的贡献;翻译后修饰;真核表达时的糖基化与含标签理论分子量对比;查阅产品说明书
激酶分析背景偏高ATP污染或非特异性磷酸化设置无酶对照;核实底物和ATP浓度
批次间结果不一致批次间差异索取每批次CoA;同时运行内部参考标准品

如问题仍未解决,请联系阿拉丁科学技术支持,并提供批号、CoA数据及实验方案详情。

常见问题

CHKB蛋白的生物学功能是什么?

CHKB(胆碱激酶β)催化ATP依赖的胆碱磷酸化反应,生成磷酸胆碱,这是CDP-胆碱(Kennedy)通路合成磷脂酰胆碱的第一步限速反应,对真核细胞膜磷脂的从头合成至关重要。

重组人CHKB蛋白(rp375976)采用何种表达体系生产?

rp375976的具体表达体系请以阿拉丁科学提供的产品说明书为准。重组CHKB蛋白通常根据供应商的生产工艺和预期应用,采用大肠杆菌、昆虫细胞(杆状病毒)或哺乳动物细胞体系表达。

如何储存重组人CHKB蛋白以保持其活性?

长期储存请将蛋白置于-80°C。首次使用时应分装,以避免反复冻融导致蛋白聚集和酶活性丧失。若产品为冻干形式,请在推荐温度下干燥保存,待复溶后使用。

重组人CHKB蛋白适用于哪些研究应用?

重组人CHKB蛋白适用于酶动力学研究、抑制剂筛选、结构与生物物理表征、抗体验证(作为阳性对照抗原),以及探究CHKB相关疾病(如巨线粒体型先天性肌营养不良)的机制研究,也可用于靶向磷脂代谢的药物发现项目。

重组人CHKB蛋白适合用于细胞实验吗?

重组人CHKB蛋白主要用于无细胞生化分析,如酶活性检测、抑制剂筛选和生物物理研究。是否适用于细胞实验取决于递送方式和实验设计,请查阅产品说明书或联系阿拉丁科学技术支持,获取针对您具体应用的建议。

哪些疾病与CHKB基因突变相关?

CHKB基因突变与巨线粒体型先天性肌营养不良(又称CHKB相关性肌营养不良)相关,这是一种罕见常染色体隐性遗传病,以肌肉无力和肌纤维线粒体结构异常(线粒体肿大)为特征。胆碱激酶活性的改变也在癌症代谢研究领域受到关注。

参考文献

  1. Aladdin Scientific. Recombinant Human CHKB Protein (rp375976). Product datasheet. Aladdin Scientific.
  2. Aoyama C, Liao H, Ishidate K. Structure and function of choline kinase isoforms in mammalian cells. Prog Lipid Res. 2004;43(3):266-281.
  3. Mak BC, et al. Mutations in CHKB cause megaconial congenital muscular dystrophy. Nature Genetics. 2011.
  4. Glunde K, Bhujwalla ZM, Bhujwalla S. Choline metabolism in malignant transformation. Nat Rev Cancer. 2011;11(12):835-848.

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

目录: 常见问题(FAQs)

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《重组人CHKB蛋白:常见问题与技术指南》. 阿拉丁知识库,更新于 2026年10月29日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/recombinant-human-chkb-protein-faq.html
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